虎奶菇Pleurotus tuber-regium深层发酵的研究

报道了虎奶菇Pleurotus tuber-regium深层发酵的最适培养基和摇瓶发酵条件。试验结果表明,Pleurotus tuber-regium对单糖、双糖、多糖和糖醇都有一定的利用,但葡萄糖、麦芽糖等对菌丝生长效果较好;酵母粉、黄豆饼粉等蛋白质含量高的氮源对菌丝的生长较为有利;通过L9(34)正交试验确定了Pleurotus tuber-regium发酵的最适培养基为:5%葡萄糖,0.4%酵母粉,0.1%KH2PO4,0.3%MgSO4.7H2O,0.001%VB1及微量NaCl;一定浓度内Na+对菌丝体生长有促进效果。最适的摇瓶发酵条件为:培养基起始pH7.0,培养温度32℃,接种量15%,摇床转速150r/min,250mL三角瓶最适装液量为70mL,发酵周期为6d。

虎奶菌多糖的分离纯化及成分分析

目的 :虎奶菌碱溶性多糖的分离纯化及成分分析。方法 :用 0 .5mol·L-1氢氧化钠溶液从虎奶菌核中提取多糖 ,利用气相色谱法 (GLC)测定多糖组成 ,凝胶渗透色谱法 (GPC)测定相对分子质量 ,红外光谱法 (FT IR)测定糖苷键构型 ,高碘酸氧化及Smith降解确定糖基间连接方式。结果 :虎奶菌多糖由葡萄糖组成 ,平均相对分子质量为 4.3× 10 5。经高碘酸氧化 ,每摩尔单糖残基消耗 0 .48mol·L-1高碘酸 ,同时释放 0 .2 4mol·L-1甲酸 ,氧化产物经还原 ,水解后检出葡萄糖和甘油。红外光谱在890cm-1处有吸收 ,而在 840cm-1处无吸收。结论 :虎奶菌碱溶性多糖为 (1→ 3) β D 葡聚糖 ,并含 1,6 连续支链。

虎奶菇菌核多糖的化学修饰及活性研究

对虎奶菇菌核多糖进行硫酸化、羧甲基化、乙酰化、磷酸化修饰,并对其体外抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率进行了研究.结果表明:羧甲基化和硫酸化修饰提高了虎奶菇菌核多糖的抗氧化活性,其中羧甲基化修饰效果更为显著.乙酰化和磷酸化修饰使羟自由基清除率和还原力有所下降,但超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)清除率有所增高.修饰后的多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率和α-淀粉酶的抑制率均有不同程度的提高,其中羧甲基化和硫酸化修饰后提高显著,且羧甲基化优于硫酸化.研究发现采用合适的修饰方法,可以明显提高虎奶菇菌核多糖的抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率.

虎奶菇菌核多糖对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的降血糖作用

通过腹腔注射四氧嘧啶建立小鼠糖尿病(DM)模型,分别用虎奶菇菌核水提多糖(W-HNP)、碱提多糖(A-HNP)按每千克体质量200和100 mg灌胃给药,阳性对照用盐酸二甲双胍片(MH)按每千克体质量500 mg灌胃给药,连续15 d后,分别测定空腹12 h后血糖,并对小鼠血清进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳.试验结果显示:与DM对照组相比,W-HNP、A-HNP处理组的小鼠血糖分别降低了(34.499±9.345)%、(46.820±7.032)%(P<0.01),且不影响正常小鼠血糖;同时,多糖可改善DM小鼠的饮水、摄食和体质量,提高DM小鼠的胸腺、脾指数;DM对照组血清的LDH4、LDH5的活性比正常组高,W-HNP、A-HNP处理组的LDH4、LDH5活性比DM对照组低.

虎奶菇菌丝生长的氮源和碳源筛选及其抑菌作用

结果表明:虎奶菇菌丝生长的最佳氮源为黄豆粉,碳源为葡萄糖.获取菌丝体的适宜配方为8 g.L-1黄豆粉和20 g.L-1葡萄糖,菌丝体含量可达11.558 mg.mL-1;虎奶菇菌丝体对革兰氏阳性细菌有较强的抑制作用,对革兰氏阴性细菌、酵母和霉菌没有抑制作用.

不同钾肥对虎奶菇菌核产量与氨基酸含量的影响

运用灰色系统理论,探讨了不同K肥相同含K量添加培养料栽培虎奶菇菌对产量与不同种类氨基酸总量的影响。结果表明,以硝酸钾为K肥对虎奶菇菌核产量与氨基酸含量影响的关联度最大,其次为氯化钾处理,硫酸钾处理关联度最小,这与栽培试验结果相一致。

菌核侧耳β-葡萄糖苷酶研究

实验以菌核侧耳为材料,在不同的液体培养时间内,对其菌丝和发酵液中的β-葡萄糖苷酶活力进行比较。结果表明:酶的活力随发酵时间的增加呈先升高后下降再逐渐稳定的趋势;菌丝的生长速度与酶的活力变化有一定的相关性。

虎奶菇菌核多糖的溶液粘度及构象研究

用刚果红实验和圆二色光谱观察了不同条件下SHNP分子在溶液中的形貌特征,研究了不同溶液体系中虎奶菇菌核多糖SHNP的比浓粘度和粒度变化情况,以判断其分子的溶液构象。研究表明:温度、pH、变性剂、金属离子等外界条件均不同程度的影响SHNP溶液的比浓粘度;在pH为12时,SHNP聚集体的有效直径呈现最大化;刚果红实验和圆二色光谱分析表明,SHNP不具有三股螺旋结构,以无规线团链构象存在,pH、变性剂均可改变其构象。

不同含水量对虎奶菇菌核蛋白质营养价值的影响

测定了5种不同含水量对虎奶菇菌核蛋白质营养价值的影响,结果表明,以65%的含水量的培养料栽培虎奶菇菌核的蛋白质氨基酸评分、化学评分、必需氨基酸指数和生物价分别为21·82,18·6,79·03和74·44,均居5种含水量处理的第1位;营养指数和氨基酸比值系数分别为10·0和19·8,均居第2位.这些结果说明以65%的含水量栽培虎奶菇菌核蛋白质营养价值较高.

虎奶菇菌核和子实体微量元素及氨基酸分析

虎奶菇子实体和菌核微量元素及氨基酸差异分析结果表明 ,子实体氨基酸总量为14.7972 % ,其中必需氨基酸占氨基酸总量的 4 9.2 1% ;而菌核的氨基酸总量为 11.6736% ,必需氨基酸占氨基酸总量的 54.0 8%。子实体中微量元素K、P、Na、Ca、Mg、Mn、Fe、Cu、Zn的含量比菌核分别高 12 0 .50 %、95.19%、10 4 .54%、90 .62 %、55.77%、4 5.4 0 %、19.2 6%、2 2 2 .96%和 112 .81%。

不同氮源对虎奶菇菌核蛋白质营养价值的影响

分析了不同氮源培养料对虎奶菇菌核蛋白质营养价值的影响。试验结果表明,在4种参试氮源中,以尿素为氮源栽培的虎奶菇,其菌核蛋白质的化学评分、氨基酸评分、必需氨基酸指数、生物价、营养指数、氨基酸比值系数分均最高,分别为22.8、27.3、73.3、68.2、11.1和18.8。

虎奶菇栽培模式研究

经研究发现 ,虎奶菇菌种宜采用麦粒培养基 ,接种量以 1.6%为宜 ,菌种菌龄以 30d为宜 ;培养料以棉籽壳为宜 (生物学效率 4 2 .90 % ) ,培养料装量以每袋 2 2 5g为宜 ,培养料最佳C/N为 2 5～ 30 :1;

菌核侧耳子实体分化过程中的解剖学研究

通过对菌核侧耳子实体分化过程及不同阶段形态解剖特征的观察,发现菌核侧耳子实体分化可分为瘤状原基、棒状体、典型子实体3个阶段。瘤状原基、棒状体横切片可分为皮层、内层2层;菌褶为等式子实层类型,菌髓中菌丝排列方式属于混淆至不规则型;菌肉菌丝可分为生殖菌丝、联络菌丝和骨架菌丝3种类型,其生殖菌丝中单菌丝细胞间的锁状联合明显,菌丝间的锁状联合只在菌盖中出现。孢子印白色,孢子表面光滑,为柱状椭圆形。

利用稻草栽培虎奶菇

在我国水稻主产区,稻草秸秆以焚烧和丢弃为主,既污染了环境又浪费了宝贵的可再生资源,为实现稻草的资源化利用、降低虎奶菇(Pleurotus tuber-regium)生产成本,用稻草按不同比例代替常规培养料中的棉籽壳栽培虎奶菇。结果表明:随着稻草替代量增加,虎奶菇的出菇周期缩短,但产量有所降低。用30%稻草、20%棉籽壳、18%麸皮、15%玉米芯、15%木屑、1%蔗糖、1%轻质碳酸钙为培养料栽培虎奶菇,和常规培养料栽培相比,出菇周期缩短6d,产量无显著差异,每袋利润提高0.26元。

不同N源对虎奶菇菌核产量与各类氨基酸含量的影响

运用灰色系统理论,探讨了不同氮源对虎奶菇菌核产量及其各类氨基酸总量的影响,并进行灰色关联的综合评判。结果表明:以麦皮为氮源的处理对虎奶菇菌核产量和品质的关联度最大,影响也最明显,添加不同氮源的处理对虎奶菇菌核及各类氨基酸含量的关联度大小顺序为:麦皮处理>牛粪处理>硫酸铵处理>尿素处理。

虎奶菇菌核和子实体脂肪酸组成分析

采用气相色谱法分析了虎奶菇的脂肪酸组成。其主要脂肪酸成分软脂酸 (C16∶0 )和亚油酸 (C18∶2 )在菌核和子实体中分别占 19.1%、18%和 68.4 %、62 .1% ,其中多不饱和脂肪酸亚油酸占优势 。

虎奶菇生物学特性研究

研究了影响好氧菌虎奶菇菌核生长发育的因子。结果表明 ,虎奶菇菌丝生长最适温度为 32℃ ,菌核生长适温为 2 3～ 2 8℃ ;培养料消毒前较适宜pH为 7.5～ 8;适宜料水比为 1:2 .2 ;较适宜碳源为玉米淀粉和淀粉 ;较适宜氮源为麦麸和牛粪。

比色法测定菌核侧耳中三萜类成分的含量

目的对菌核侧耳中的三萜类成分进行含量测定。方法采用比色法,测定了菌核侧耳菌丝体和子实体三萜类化合物的含量,还优选了其显色条件,5%香草醛-冰醋酸最佳用量为0.2 m l,高氯酸最佳用量为1 m l。结果菌核侧耳子实体总三萜含量为1.16%,菌丝体为1.31%,RSD为1.05%。结论该方法简便、迅速可靠。

菌核侧耳担孢子收集及萌发条件

以东华虎奶-1号(Pleurotus tuber-regium)子实体为材料,采用了弹射、贴壁、菌褶冲洗等方法收集担孢子,结果表明,菌褶冲洗法是菌核侧耳担孢子收集的最佳方法。孢子萌发条件的研究结果表明,菌核侧耳孢子萌发对温度和湿度的要求较高,最适温度为30℃;无机盐离子和光照、黑暗交替处理都能促进孢子的萌发。

不同碳源对虎奶菇菌核蛋白质营养价值的影响

测定了四种碳源对虎奶菇菌核蛋白质营养价值的影响。结果表明 ,以玉米淀粉为碳源 ,虎奶菇菌核蛋白质的化学评分、必需氨基酸指数、生物价和营养指数分别为 11.6 3、6 9.80、6 4.4 0和 9.98,均居四种参试碳源的第一位 ;氨基酸评分和氨基酸比值系数分分别为 14 .5 5和12 .4 5 ,均居四种参试碳源的第二位。这些结果证实 ,以玉米淀粉为碳源 ,虎奶菇菌核蛋白质营养价值高 。