氯化锌对单宁-尿素-甲醛(TUF)共缩聚树脂性能的影响

针对单宁-尿素-甲醛(TUF)树脂出现的热压温度高、热压时间长的问题,采用二价金属盐-氯化锌对TUF树脂进行加速固化。从探究氯化锌加入比例对凝胶时间和胶合强度、降低固化剂用量的作用、在不同热压参数条件下的胶合强度表现、甲醛释放量等各方面的影响去探讨氯化锌加入的改性效果。借助傅里叶红外光谱分析(FT-IR)、差示扫描量热法(DSC)和热重分析(TG)来分析树脂结构变化以及热行为。结果表明,氯化锌的加入显著缩短了TUF树脂的凝胶时间,促进了树脂固化,2%的氯化锌添加使热水强度提升了31.5%,同时甲醛释放量降低了24%,但无法减少固化剂的用量;3%的氯化锌添加使板材耐沸水强度达到0.72 MPa,提升了148%。此外,在热压工艺测试中,2%的氯化锌加入极大地促进了交联固化,在140℃和8 min条件下,2%氯化锌试验组热水强度相对于在180℃和8 min条件下无氯化锌添加对照组提升了28%。FT-IR分析结果表明,氯化锌的加入能与单宁形成配位键,从而加速交联固化。DSC和TG分析从侧面佐证了TUF树脂反应位点增多、促进固化交联的结论。

枣疯病和酸枣丛枝病植原体16S rDNA和tuf基因的序列同源性分析

【目的】枣疯病是枣树上由植原体引起的一种毁灭性病害,遍布于中国华北、西北、华东、华南等25个省(市)的枣区,造成了巨大的经济损失。【方法】经PCR扩增,分别对中国陕西的彬县、阎良、武功、佳县、杨凌,河北沧州和山东德州7个枣区的枣疯病样品和杨凌4个酸枣丛枝病样品植原体16SrDNA基因保守序列和延伸因子tuf基因进行克隆和测序。【结果】获得枣疯病和酸枣丛枝病植原体的16SrDNA基因片段均为1239bp,tuf基因均为851bp。通过序列同源性比较,结果表明中国陕西、河北、山东的枣疯病的病原一致,归属于植原体16SrⅤ-B组。由于枣疯病和酸枣丛枝病的植原体16SrDNA有5个碱基的差异,tuf基因的同源性为99.6%,推测为同一个种的不同寄主生物学型。【结论】首次报道了中国枣疯病和酸枣丛枝病植原体16SrDNA和延伸因子tuf基因的序列,确定了枣疯病和酸枣丛枝病植原体的分类地位,为研究枣疯病植原体的致病分子机理、遗传本质提供理论依据。

小麦蓝矮病植原体延伸因子(EF-Tu)tuf基因序列的同源性分析

目的利用分子生物学方法分析小麦蓝矮病植原体延伸因子tuf基因,从亚组水平上确定小麦蓝矮病植原体的分类地位。方法电镜观察自然发病的小麦蓝矮病病叶;用引物fTufu/rTufu对小麦蓝矮病植原体延伸因子tuf基因进行PCR扩增;核苷酸序列测定及分析。结果经电镜超微结构观察,在韧皮部观察到大量典型植原体。通过PCR扩增得到约850bp的特异片段。感受态转化后,进行测序,结果表明小麦蓝矮病植原体tuf基因片段长842bp,编码280个氨基酸。分析比较15种植原体延伸因子tuf基因的同源性,结果表明小麦蓝矮病植原体与三叶草绿变(KVF)亲缘关系最近,核苷酸同源性为99.9%,氨基酸同源性为100%。结论从亚组水平上确定了小麦蓝矮病植原体的分类地位,为研究小麦蓝矮病植原体的来源及致病分子机理提供理论依据。

以tuf基因为靶标的5种16SrⅠ组植原体环介导恒温扩增技术

【目的】建立一种能够特异性检测和鉴定16SrⅠ组植原体的环介导恒温扩增技术,实现16SrⅠ组植原体的快速检测。【方法】以植原体tuf基因作为靶标,通过序列比对,设计多组具有特异性的LAMP引物组,筛选出一套适用于16SrⅠ组植原体的特异性检测体系。以16SrⅡ组、16SrⅤ组、16SrⅩⅨ组植原体样品按照此检测体系进行反应,来验证其特异性;同时将稀释后的感病组织样品同步进行PCR和LAMP检测,以确定其检测灵敏度。对来自不同省市的6份田间样品以及9份组培样品进行检测,以验证其检测的稳定性。【结果】16SrⅠ-LAMP在恒温63℃条件下40 min内完成扩增,能检测5种分别引起泡桐丛枝、苦楝丛枝、桑树萎缩、莴苣黄化和长春花绿变病的16SrⅠ组植原体,不能检测其他组植原体包括16SrⅡ组的花生丛枝、甘薯丛枝、臭矢菜丛枝、16SrⅤ组的枣疯病、红花槐丛枝、樱桃致死黄化和16SrⅩⅨ组的板栗黄化皱缩植原体。通过在反应液中加入钙黄绿素肉眼判断绿色为阳性结果,褐色为阴性结果,与用荧光定量设备进行判读扩增曲线的结果一致。相比于PCR检测,16SrⅠ-LAMP检测的灵敏度提高了8倍;16SrⅠ-LAMP能够快速检测出来自不同区域的田间泡桐发病样品、感病泡桐组培苗和嫁接传病脱毒苗。【结论】以tuf基因作为靶标,建立能同时检测5种16SrⅠ组植原体的环介导恒温扩增技术,具有高效、特异、操作简便、检测时间短及成本较低等优点,适合于基层和现场检测。

利用16S rDNA序列及tuf-RFLP鉴定蒙古国发酵乳中的乳酸菌

运用16S rDNA序列分析和tuf-RFLP技术对采于蒙古国扎布汗省的25份发酵乳样中分离出的110株乳酸菌进行鉴定。首先将分离的110株乳酸菌的16S rRNA基因进行扩增,测序并构建系统发育树,初步鉴定为41株嗜热链球菌,40株瑞士乳杆菌,11株德氏乳杆菌保加利亚亚种,2株发酵乳杆菌,1株乳明串珠菌,2株肠膜明串肠膜亚种,1株乳酸乳球乳酸亚种和12株属于干酪族的菌株。由于干酪乳杆菌族的16S rDNA序列差异很小,故采用tuf-RFLP技术对这12株进行了进一步的验证,通过分离菌株与模式菌株tuf-RFLP图谱的比较分析,结果表明这12株菌均为干酪乳杆菌。

新疆枣疯病植原体tuf基因的克隆与序列分析

【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害,了解新疆枣疯病植原体的系统发育关系及遗传分化,获取其分子特征信息。【方法】利用植原体tuf基因通用引物fTufu/rTufu对新疆枣疯病病株总DNA进行PCR扩增,对部分扩增片段克隆、测序及相似性分析。【结果】获得新疆枣疯病阿克苏株系(JWB-ASZ)和喀什株系(JWB-KHZ)的tuf基因片段分别为841和814 bp。经同源性比较分析,新疆枣疯病阿克苏株系(JWB-ASZ)与喀什株系(JWB-KHZ)均隶属于16S rⅤ-B亚组枣疯病植原体。其中JWB-KHZ株系与枣疯病植原体河北株系的tuf基因核苷酸及氨基酸同源性最高,分别达到90.2%和81.5%;JWB-ASZ与枣疯病植原体陕西株系的tuf基因核苷酸及氨基酸同源性最高,分别达到94.2%和94.6%,而与16S rⅤ其它亚组的核苷酸及氨基酸同源性均低于70%。枣疯病阿克苏株系与喀什株系的tuf基因核苷酸及氨基酸序列之间存在明显差异,同源性仅为为73.5%和63.5%。【结论】研究报道了新疆枣疯病植原体tuf基因序列,为揭示新疆枣疯病植原体不同株系的分子特征、分子变异和遗传多样性提供了基础。

新型筑路材料TUF在路基填筑中的应用

结合新型筑路材料TUF在阿尔及利亚东西高速公路路基填筑施工中的应用,介绍了选择该材料的原因及其作为路基填料的特点与优越性,并进行了经济效益分析,为TUF材料在其他道路结构层中的应用提供参考。

海南竹柏扁枝植原体基于16S rRNA和tuf基因的分类及系统进化分析

对采自海南省万宁市的表现竹柏扁枝病的竹柏植株总DNA进行植原体16S r RNA基因和tuf基因克隆、测序,分别获得竹柏扁枝植原体16S r RNA基因(1 806 bp,Gen Bank登录号:KJ848639)和tuf基因(845 bp,Gen Bank登录号:KX645669)片段。对竹柏扁枝植原体16S r RNA基因序列进行虚拟RFLP分析,结果表明,竹柏扁枝植原体属于花生丛枝植原体组U亚组(16Sr II-U)成员(相似系数为1.00)。对tuf基因进行序列比对和系统进化分析,结果表明,竹柏扁枝植原体与同属16Sr II组的植原体亲缘关系最近,其次为16Sr I组植原体。本研究从亚组水平上确定了竹柏扁枝植原体的分类地位,并克隆分析了竹柏扁枝植原体的tuf基因,为竹柏扁枝植原体的系统分类和病害防控提供了基础信息。

橡胶丛枝植原体两个株系的tuf基因克隆及序列分析

对采自海南省儋州市表现橡胶丛枝病的橡胶植株总DNA进行植原体tuf基因克隆、测序,分别获得橡胶丛枝植原体两个株系RTSF-DS1A和RTSF-DS1B的tuf基因片段(Gen Bank登录号:KY130429、KY130430)。对RTSF-DS1A和RTSF-DS1B的tuf基因片段进行序列分析和系统进化分析,结果表明,植原体RTSF-DS1A的tuf基因片段(KY130429)大小为842 bp,共编码281个氨基酸,与16Sr I组植原体的tuf基因亲缘关系最近。RTSF-DS1B的tuf基因片段(KY130430)大小为845 bp,共编码282个氨基酸,与16Sr II组植原体的tuf基因亲缘关系最近。本研究克隆并分析了橡胶丛枝植原体两个株系的tuf基因,丰富了植原体的系统分类基因信息,并为橡胶丛枝病防控提供了基础。

TUF教学模式在英语阅读教学中的应用——以牛津初中英语9A Unit 5 Films为例

英语阅读教学中仍存在不少效率低下的问题，陈旧的教学方式阻碍了学生语言能力的发展，严重影响了教育目标的落实。TUF教学模式旨在让学生在理解的基础上投入到英语学习中，改造自身的认知结构，并在学习过程中真正理解所学的内容，教学中可适机应用。

TUF教学模式在初中英语阅读教学中的应用与研究

现阶段，初中英语阅读教学仍然以教师讲授知识为主，通过翻译课文、讲解词汇、解析语法点等来进行课堂教学。这样的教学方式，阻碍了学生语言能力的发展，严重影响了教育目标落实。TUF教学模式以知识的理解、运用和创造为支点，试图在学生的全面理解上，最大限度地提高学生的英语语言综合素质。

tuf A区分黄海绿潮优势种浒苔及其近缘种的适用性评价研究

浒苔(U.prolifera)绿潮在黄海连年引发严重的环境灾害,然而对于浒苔及其近缘种缘管浒苔(U.linza)的鉴定,仍缺少稳定可靠的分子标记。有文献提出tuf A可有效区分二者,本文选择前期鉴定为LPP簇(包含浒苔与缘管浒苔)的17个样本与一个Ulva sp.样本,对tuf A的适用性进行了评价。结果证明,tuf A实际上无法区分浒苔与缘管浒苔,深入分析发现,其错误结论源自对样本的错误鉴定。我们认为,应基于两个近缘种的叶绿体基因组序列变异区,开发可靠的新标记。

tuf基因同源超表达对植物乳杆菌LR-1生理行为的影响

采用同源超表达及电转化技术,构建植物乳杆菌LR-1的tuf基因超表达重组菌株,对重组菌株的生长情况、抗胁迫能力、黏附能力及生物被膜形成能力进行分析,并检测tuf基因超表达对其他基因的转录水平的影响。结果表明:tuf基因超表达对菌株LR-1的生长情况无非常显著的影响,但可以增强其耐热性能、黏附性能及生物被膜形成能力,且对糖酵解途径参与基因、II型群感关键基因及核糖激酶编码基因fba、pgm、gap、luxS和rib的转录水平具有上调作用。以上结果对乳杆菌的基因功能研究具有参考意义,同时为基因工程菌株在发酵菌剂或益生菌剂的开发应用领域提供了理论支持。

两种林木植原体病害的分子鉴定

近年来,林木植原体病害发生日趋严重,对我国林业经济和生态造成了很大损失。2021年-2022年,在山西沙棘主产区的沙棘上和北京冬奥园区的油松上分别出现了典型的植原体病害症状;沙棘叶片皱缩,呈小叶状;油松过度分枝生长且出现球状结构等。本研究通过荧光显微观察,16S rRNA和tuf基因序列分析,并结合虚拟限制性片段长度多态性分析证实了这两种病害均由植原体引起。基于16S rRNA的系统进化分析显示:引起沙棘叶片皱缩的植原体与泡桐丛枝植原体(Paulownia witches’-broom phytoplasma,OP107515.1)的相似性最高(99.92%),引起油松丛枝的植原体与狗尾草丛枝植原体株系(Setaria viridis witches’-broom phytoplasma,FJ263625.1)的相似性最高(99.52%);基于tuf基因的系统发育树显示,二者同属于16SrⅠ组D亚组(16SrⅠ-D)。本研究首次明确了沙棘叶片皱缩病和油松丛枝病相关植原体的分类地位,为这两种植原体病害的准确诊断、快速检测及其防治提供了基础资料。

枣疯病植原体tuf和rp基因的克隆与序列分析

【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害,本研究旨在明确北京及河北地区枣疯病植原体的分类地位,为枣疯病在亚组水平上分类提供一定的参考依据。【方法】利用植原体通用引物fTufu/rTufu和rp(v)F1A/rp(v)R1A对北京和河北地区枣疯病植原体延伸因子tuf基因和核糖体蛋白基因(rp)进行PCR扩增并进行核苷酸序列测定及相似性分析。【结果】获得北京地区JWB-XFSZ株系、JWB-XFDO株系以及河北地区JWB-TXSZ株系的tuf基因片段均为824 bp;北京地区JWB-XFSZ株系的rp基因片段为1196 bp。经序列相似性比较表明:tuf基因与16SrV组的葡萄黄叶病(Flavescence dorée)相似性最高,为92.84%,而与已经公布的其它地区(陕西杨凌)的枣疯病植原体tuf基因相似性较低,为57.29%;关于rp基因,北京地区枣疯病JWB-XFSZ株系与16SrV组的枣疯病泰山株系(JWB-Taishan)以及大麻丛枝病植原体(HFWB)相似性最高,均为99.83%,与16SrV组的成员相似性均在96%以上。【结论】北京与河北地区枣疯病植原体具有较高的相似性,而在tuf基因水平上,与陕西地区枣疯病植原体具有较大的差异;本研究中北京与河北两地区枣疯病植原体归属于16SrV组。

甜樱桃绿变植原体的分子检测及鉴定

为明确甜樱桃绿变植原体的分类地位,通过对表现绿变症状的甜樱桃感病植株总DNA进行16S rRNA基因、rp基因和tuf基因的PCR扩增、克隆及序列分析。结果表明,甜樱桃绿变植原体16SrRNA基因片段大小为1248 bp,与枣疯植原体(AB052876)聚为一簇,且相似系数为1.00,应同属于16SrⅤ-B亚组。基于rp基因系统进化分析表明,甜樱桃绿变植原体与枣疯植原体JWB(AY197681)聚为一簇,属于rpV-C亚组。基于tuf基因系统进化分析显示,甜樱桃绿变植原体与枣疯植原体JWB-XFDO(GU968759)等聚为一簇,属于16SrⅤ组。明确了甜樱桃绿变植原体的分类,为泰安地区病害检测、诊断以及科学防控提供依据。

生产废水零排放在余热发电系统的应用

随着环保排放要求越来越严格,目前所使用的传统水质稳定药剂处理技术已不能满足企业生产需求。因此新型的TUF超滤+双段CTRO环保水处理技术逐渐被应用在生产中,其具有节水减排、零排污的优点,可减少循环水处理费用,提高节水减排效果,确保冷却系统运行最优,发电系统热能利用效果最佳。

淡水中麦可藻的分离纯化与鉴定

麦可属(Mychonastes)在淡水中分布广,物种多样性丰富,在生产生物柴油以及净化水质等方面具有潜在的重要价值.但是该类群个体微小,形态简单,需要利用形态以及分子数据对其进行鉴定.从山西省晋中市潇河流域以及运城市新绛县三泉水库采集分离到3株球状绿藻XH-5、XH-13、SQ-9,通过观察其显微结构,分析3个分子标记(18S rRNA、rbc L、tuf A)的系统发育树.结果表明,XH-5、XH-13、SQ-9的18S rRNA序列与麦可属的序列聚为一支,并且3株藻的rbc L和tuf A序列与同球麦可藻(Mychonastes homosphaera)聚为一支,形态上与同球麦可藻的形态相似,基于此,将3株藻鉴定为同球麦可藻.该研究结果可以丰富麦可属在我国的物种多样性和分布状况,促进麦可藻资源的开发与利用.

泡桐丛枝植原体16S rDNA和延伸因子基因序列分析

对采自陕西、山西、甘肃、河南、河北、山东各省的泡桐丛枝病材料,利用巢式扩增,均得到16S rDNA基因片段约1.2kb;扩增得到植原体延伸因子(EF-Tu)tuf基因,长度约为850bp.。通过将16S rDNA基因片段和延伸因子(EF-Tu)tuf基因序列与已知植原体16Sr各组成员进行同源性比较,确定我国大陆泡桐主栽区陕西、山西、甘肃、河南、河北、山东各省与已经报道的台湾省泡桐丛枝植原体基本一致,均为同一个种,没有株系的分化,全部归属于植原体16SrI-D组,从而确定了其分类地位。

苦豆子丛枝病植原体的分子检测与鉴定

【目的】对苦豆子丛枝病植原体做出分子检测与鉴定。【方法】通过PCR扩增技术,分别利用植原体16S rRNA基因,16S-23S rRNA间区及tuf基因序列的通用引物对表现丛枝病症状的苦豆子总DNA进行扩增,得到约1.2、0.3和0.8 kb特异片段。将所得片段分别进行克隆、测序及序列同源性分析。【结果】苦豆子丛枝病植原体(SAWB)上述3序列与榆树黄化组B亚组(16SrV-B)的枣疯病植原体(JWB)相应序列的同源性最高。【结论】苦豆子丛枝病植原体为16Sr V-B亚组成员。