抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1的研究进展

本文介绍了1997年3 月以来,国际上3个科研小组最新克隆得到的一种抑癌基因——PTEN/MMAC1/TEP1的研究进展。该基因定位于人第10q23染色体,可在人体多发性晚期癌症组织中发生突变。对其的定位克隆和功能研究有望给细胞分化和肿瘤分子生物学研究注入新的活力。

抑癌基因PTEN抑制乳腺癌ZR-75-1细胞转移作用机制的探讨

目的探讨抑癌基因PTEN抑制乳腺癌细胞ZR-75-1转移的作用机制。方法用脂质体介导法分别将野生型PTEN质粒(wt)、磷酸酶活性缺失的PTEN质粒(G129R)和只具蛋白磷酸酶活性的PTEN质粒(G129E)转染PTEN基因缺失的乳腺癌细胞ZR-75-1。转染细胞以嘌呤霉素筛选后,用PCR和Western-blot分别检测PTEN基因及其蛋白;通过黏附、侵袭实验,比较3种质粒转染细胞和未转染细胞之间的黏附、侵袭能力的差异;用Western-blot法检测各组转染细胞总的黏着斑激酶(FAK)和磷酸化黏着斑激酶(P397-FAK)的表达水平;以免疫组化法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和E-钙连素(E-Cd)的表达,并用RT-PCR检测各组转染细胞的p53 mRNA水平。结果3种质粒均成功转染ZR-75-1细胞,并证实3种转染细胞内均有PTEN基因存在及PTEN蛋白表达;wt、G129R、G129E等3种质粒转染的细胞黏附抑制率分别为65.7%、8.8%和43.5%;侵袭抑制率分别为70.4%、6.9%和63.5%。将wt或G129E转染细胞的黏附抑制率及侵袭抑制率与G129R转染细胞的比较,均有显著性差异(P<0.05);但wt与G129E转染细胞比较,均无显著性差异(P>0.05)。3种转染细胞总FAK水平虽无显著性差异(P>0.05),但wt和G129E转染细胞其P397-FAK和MMP-2水平都显著低于G129R转染细胞(P<0.05)。3种转染细胞间的E-Cd水平未见显著差异。RT-PCR分析显示,wt、G129E和G129R3种转染细胞p53 mRNA水平无显著性差异,但均显著高于未转染细胞。结论野生型PTEN基因所表达的蛋白具脂质和蛋白双特异磷酸酶活性,对乳腺癌细胞ZR-75-1的转移具有抑制作用,其机制与磷酸酶活性有关,其中蛋白磷酸酶活性可能起主要作用。

子宫内膜癌宫腔诊刮的抑癌基因病理学表达及其影响因素分析

目的分析子宫内膜癌宫腔诊刮的抑癌基因病理学表达及其影响因素。方法将接受子宫内膜宫腔诊刮治疗的150例纳入研究对象,85例子宫内膜癌患者作为观察组,65例正常无病变者作为对照组。比较两组受试者抑癌基因p16、PTEN、BRCA-1的mRNA含量和蛋白含量,并分析病理分期和浸润深度对抑癌基因表达的影响。结果观察组患者子宫内膜组织中p16基因、PTEN基因、BRCA-1基因的mRNA含量和蛋白含量均低于对照组(32.85±5.37vs.100±14.85,29.62±3.85 vs.100±16.27,24.51±3.26 vs.100±15.42;29.94±4.28 vs.100±14.19,31.47±4.85vs.100±15.28,25.92±3.08 vs.100±16.41);不同病理分期、浸润深度的患者,抑癌基因表达情况有差异,病理分期越高、浸润程度越深,p16基因、PTEN基因、BRCA-1基因的mRNA含量和蛋白含量越低。结论子宫内膜癌组织中抑癌基因p16、PTEN、BRCA-1表达量显著降低,且表达情况受到病理分期、浸润深度的影响。