在减毒伤寒杆菌CVD908疫苗株中四环素诱导表达恶性疟原虫MSP1-31片段基因

目的 :用含 PL tet O启动子的 p ZE11质粒在减毒伤寒杆菌 CVD90 8疫苗株中表达恶性疟原虫 MSP1- 31片段基因。 方法 :构建受四环素诱导调控的重组质粒 p ZE11/ MSP1- 31,将该重组质粒用电穿孔转化法转化入减毒伤寒杆菌 CVD90 8/ tet R疫苗株中 ,用免疫印迹反应检测 MSP1- 31在 CVD90 8/ tet R株中的四环素诱导表达。结果 :构建了重组的 p ZE11/ MSP1- 31质粒 ,免疫印迹反应显示该 MSP1- 31基因在 CVD90 8/ tet R株中得到有效表达 ,且依赖于四环素的存在。结论 :成功地构建了由四环素诱导的、表达恶性疟原虫 MSP1- 31的减毒伤寒杆菌疫苗株。

伤寒杆菌IVB型菌毛激活PKC信号通路诱导THP-1细胞IL-6表达

目的探讨伤寒杆菌IVB型菌毛激活PKC信号通路诱导THP-1细胞IL-6表达。方法将THP-1细胞分别与有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS-菌共同孵育,分别检测蛋白激酶C(PKC)活性、IL-6产量及IL-6mRNA的表达水平;用PKC抑制剂DECA预处理THP-1细胞,然后再以A21-6菌诱导,测定PKC活性和IL-6产量。结果THP-1细胞经有IVB型菌毛的A21-6菌刺激后,IL-6的产生水平、mRNA的表达水平以及PKC活性均显著高于相应的处理组。PKC活性在一定范围内呈时效关系,刺激10min后即明显升高,并于30min左右达到峰值。PKC抑制剂DECA一定程度上能够抑制IVB型菌毛诱导的THP-1细胞PKC活性和IL-6产生水平。结论IVB型菌毛在伤寒杆菌诱导单核/巨噬细胞产生IL-6过程中是一种重要的刺激因素;PKC参与了该过程的细胞内信号转导。

伤寒沙门菌线性质粒pBSSB1的p17基因的生物学功能分析

H:z66阳性伤寒沙门菌含有一特有的介导鞭毛单向相变换的线性质粒pBSSB1,其上第17号基因(p17)编码一未知功能蛋白(P17)。利用λ-Red系统制备p17基因缺陷变异株,测定变异株和野生株的生长曲线,比较其生长差异,同时通过半固体LB培养基进行动力试验比较其动力差异。利用PCR技术扩增获得p17基因,构建其重组表达载体pET28a(+)-p17,通过镍柱纯化目的蛋白P17-His6,纯化后蛋白作为抗原免疫兔子以制备多克隆抗体。结果显示,制备了p17基因缺陷变异株,变异株的生长明显迟缓于野生株(P<0.05),变异株的动力明显减弱。构建了重组表达载体pET28a(+)-p17,纯化获得了高纯度的目的蛋白P17-His6并制得相应的多克隆抗体。

单核细胞-巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性

目的探讨人类单核细胞巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性。方法采用体外培养的THP1细胞和PMA诱导分化的THP1细胞,测定其内在化和杀伤伤寒沙门氏菌的活性,以及以伤寒沙门氏菌诱导的上述两种细胞产生TNFα和IL12的情况。结果PMA诱导的THP1细胞可分化成巨噬细胞;THP1细胞和PMA诱导分化的THP1细胞的内在化,杀伤伤寒沙门氏菌的能力及其产生细胞因子的能力显箸不同。结论人类巨噬细胞可能是机体抗御伤寒沙门氏菌感染的重要细胞。

Cancer and Infectious Causes

Various kinds of organisms, including viruses, bacteria, trematodes and fungi are known carcinogens that cause cancer. Infectious identification related to cancer may lead to better treatment for both the prevention and targeting of cancer therapy. Although nearly 20% of all cancers are caused by an infection of a microbe, the amount of evidence and information regarding the mechanisms associated with oncogenesis varies dramatically from one organism to the next. This review cannot be exhaustive because we are not aware of all infections worldwide in addition to their potential mechanisms for oncogenesis. More research is required for all of the species mentioned in this review.

伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC和ERK及NF-κB活化的影响

目的:初步探讨伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化的影响。方法:将THP-1细胞分别与有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS-菌共同孵育,底物磷酸激酶测定法检测PKC活性变化,免疫印迹法检测ERK磷酸化水平,荧光素酶报道基因分析法检测NF-κB激活表达。结果:THP-1细胞经有IVB型菌毛的A21-6菌刺激后,PKC活性变化、ERK磷酸化水平和NF-κB激活表达均显著高于相应的处理组;PKC、ERK、NF-κB活化水平分别于刺激10、30、60min后即明显升高;并分别于30、60、120min左右达到峰值。结论:伤寒杆菌IVB型菌毛显著增强了THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化水平,IVB型菌毛在伤寒杆菌诱导单核/巨噬细胞PKC、ERK、NF-κB活化过程中是一种重要的强刺激因素。