QCR2调控p53泛素化对SiHa细胞株的周期阻滞作用

目的研究泛醇-细胞色素C还原酶亚基2(QCR2)对宫颈癌SiHa细胞株周期阻滞的影响,并探讨相关机制。方法取对数期SiHa细胞,脂质体转染法将QCR2 siRNA、control siRNA转染至SiHa细胞,设为QCR2 siRNA组、control siRNA组,未经处理细胞设空白组。采用qRT-PCR、Western blot检测QCR2、p53 mRNA与蛋白相对表达量;碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期。取QCR2 siRNA组细胞,以终浓度50 nmol/L泛素-蛋白酶体抑制剂PS341干预,设为QCR2 siRNA+PS341组,另取QCR2 siRNA组细胞以等量生理盐水(NS)干预,设为QCR2 siRNA+NS组。Western blot检测p53蛋白相对表达量;免疫共沉淀实验检测p53泛素化水平。结果荧光显微镜下观察,QCR2 siRNA组、control siRNA组转染效率均大于80%;与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组QCR2 mRNA与蛋白相对表达量均降低(P<0.05),G_(0)/G_(1)占比升高(P<0.05),S、G_(2)/M占比降低(P<0.05);p53 mRNA相对表达量组间比较,差异无统计学意义;与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组p53蛋白相对表达量升高(P<0.05);与空白组、QCR2 siRNA+PS341组比较,QCR2 siRNA组、QCR2 siRNA+NS组p53蛋白相对表达量升高(P<0.05);与空白组、control siRNA组比较,QCR2 siRNA组p53泛素化程度降低(P<0.05)。结论沉默QCR2可将SiHa细胞阻滞在G_(0)/G_(1)期,其机制可能与抑制p53泛素化,提高其蛋白表达有关。