橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接

该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,从6种商用酶中筛选出最适蛋白酶为木瓜蛋白酶,以底物浓度、酶底比、酶解时间、温度进行单因素试验,选取影响酶解反应的3个因素(酶底比>温度>时间)进行响应面法优化得出最佳工艺条件为底物质量浓度50 g/L、酶底比为3.3%(质量分数)、温度20℃、时间88 min。对最优条件下的粗肽液进行SephadexG-25和SephadexG-15分离纯化得到6个具有良好活性的抗氧化肽,分别为WLSF、TSVLR、LVYLVR、AGGKPFQ、YYPFKGFA、AFNVDERLAR。TSVLR显示出最高的DPPH自由基清除活性81.07%和羟自由基清除能力42.48%。分子对接研究表明,纯化的肽通过疏水效应和氢键与抗氧化相关的关键蛋白SOD有效结合。结果表明,橄榄仁可作为天然食物来源制取功能性食品的一个新的探究方向。

HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力

目的:建立弱酸处理后细胞表面HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力,并评估其实用性。方法:采用不同pH的柠檬酸缓冲液处理高表达HLA-B*1301的C1R细胞不同时间,中和pH后用含β2m蛋白、布雷非德菌素A的培养液重悬细胞,加入多肽(多肽组)或不加多肽(空白对照)37℃孵育,加入抗HLA抗体后采用流式细胞术检测,以多肽组与空白对照组荧光强度的比值作为衡量HLA分子重构水平强弱的指标,进而代表多肽与HLA-B*1301分子的结合力。结果:pH3.0的缓冲液处理1 min的条件下,HLA-多肽复合物变性解离,细胞表面只保留HLA重链分子,添加具有结合力的多肽可显著提升HLA分子重构水平,可以此评价多肽与HLA-B*1301的结合力。结论:HLA分子重构法检测多肽与HLA-B*1301的结合力操作简便,结果可靠,也可为研究其他低频HLA分子抗原递呈模式提供参考。

青刺果抗氧化肽的分离纯化、结构鉴定及其分子对接解析

采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分析其理化特性,并进一步利用红外光谱、分子对接技术解析其二级结构特征及与Keap1蛋白的对接位点。研究结果表明,分离得到的4个组分中F-1组分具有更好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率达到27.67%。选择活性更高,且分子质量小于1 kDa的肽组分,测定得到的3条肽(TALDVPPPR、TLSDAGVGGL和DLINGGKDA)的DPPH自由基清除率,其IC 50值分别为0.43、0.83、0.51 mg/mL,其中TALDVPPPR的抗氧化活性相对较高。二级结构分析结果表明,3条抗氧化肽均由α-螺旋、β-折叠和β-转角构成,其中TALDVPPPR的α-螺旋含量相对较低,使其更易与自由基结合。分子对接结果显示,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA以氢键和疏水作用与Keap1蛋白紧密结合,释放Nrf2进入细胞核,并激活一系列具有抗氧化和细胞保护作用的蛋白质表达,即激活Keap 1-Nrf2/ARE通路而发挥抗氧化作用。因此,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA可作为新型抗氧化剂,研究旨在为青刺果功能性肽的开发利用提供理论参考。

基于分子模拟技术筛选牛乳清蛋白源抗氧化肽

传统抗氧化肽的筛选往往需要经过酶解、纯化、分离、鉴定及体外试验验证,时间和物力花费较大。本研究以生物信息学为理论基础,利用计算机虚拟消化、相关活性预测与评价、药物代谢动力学及分子模拟技术对牛乳清蛋白源抗氧化肽进行依次筛选,对其可能发生的Keap1-Nrf2-ARE抗氧化途径进行分析、解释,分析其分子反应过程中构象的稳定性。应用PeptideRanker程序对生物活性进行预测评分,筛选得到137条评分大于0.4的肽段,同时采用ToxinPred、Innovagen、Expasy-compute及Pepdraw程序进一步分析肽段的理化性质,并通过药物代谢动力学ADMET、TOPKAT分析对肽段进行筛选,得到14条无毒、无致敏性、无致突变性、无致癌性及水溶性良好的多肽,然后将其与Keap1受体进行分子对接。将分子对接评分前4位的多肽与Keap1的最优结合复合物进行构象作用机制分析,最终通过复合物构象分子间作用力评价CDEF序列最具抗氧化活性的潜力,并将CDEF-Keap1受体复合物进行分子动力学模拟,结果显示动力学模拟过程中构象变化较稳定,因此CDEF抗氧化肽可在人体中较好地发挥抗氧化活性。与传统酶解方法相比,本方法可快速、高效筛选抗氧化肽,为天然食品源抗氧化肽的快速筛选提供了新思路。

奥曲肽修饰的壳聚糖纳米递送分子信标成像肺癌研究

目的 探究通过奥曲肽(OCT)修饰的壳聚糖(CS)miR-155分子信标(miR-155-MB)纳米(CS-miR-155-MB-OCT)识别miR-155并成像肺癌细胞用于肺癌早期诊断。方法 通过尾静脉注射A549肺癌细胞建立肺移植瘤裸鼠模型;通过鼻腔滴入Cre腺病毒,分别在滴入腺病毒后的4、6、8、12周处死小鼠建立LSL K-ras G12D转基因小鼠肺部的非典型增生、腺瘤、原位癌、肺腺癌的不同病变时期肺腺癌模型;取肺组织行HE染色观察。免疫组化染色检测肺移植瘤组织及不同病变时期转基因小鼠肺组织生长抑素受体2(SSTR2)的表达;实时荧光定量PCR检测不同病变时期转基因小鼠肺组织miR-155的表达。在肺移植瘤裸鼠模型中,尾静脉注射CS-miR-155-MB或CS-miR-155-MB-OCT;转基因小鼠模型中,尾静脉注射CS-miR-155-MB-OCT;活体成像仪检测肺移植瘤裸鼠及转基因小鼠不同病变时期肺部荧光信号;制作肺组织冰冻切片,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)检测荧光信号来源。结果 HE染色显示成功构建了肺移植瘤裸鼠模型及转基因小鼠肺部的非典型增生、腺瘤、原位癌、肺腺癌的不同病变时期肺癌模型。肺移植瘤及不同病变时期病变组织均表达SSTR2。转基因小鼠模型中,随着疾病进展,miR-155表达逐渐升高(P<0.05)。在肺移植瘤裸鼠模型中,CS-miR-155-MB-OCT组肺部荧光信号强于CS-miR-155-MB组(P<0.05);转基因小鼠模型中,随着肺癌的进展,荧光信号逐渐增强(P<0.05);将肺组织再次成像后发现荧光信号来自肺部,CLSM发现荧光信号来自肿瘤细胞及部分正常肺泡上皮细胞。结论 CS-miR-155-MB-OCT能够根据产生的荧光强度变化动态反映肺癌的发生发展,从而为肺癌的早期诊断提供新技术。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术以及网络药理学分析山西陈醋的小分子肽类成分及潜在作用机制

目的:明确山西陈醋中的小分子肽类化学成分,并进一步探讨其针对心血管等疾病的潜在作用机制。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术结合GNPS分子网络技术分析山西陈醋中的小分子肽类成分。运用Genecards、Drugbank 5.0、DAVID等数据库对小分子肽类化合物靶点及通路进行分析,并通过Cytoscape软件构建“成分-靶点-信号通路-疾病”网络。使用Autodock Dock 1.5.6和PyMol 2.5.5进行山西陈醋核心靶点与关键成分的分子对接。结果:共鉴定出41个小分子肽类化合物,其中包括27个环二肽、10个直链二肽和4个三肽类化合物。其发挥心血管和肥胖等保健作用的“成分-靶点-信号通路-疾病”网络包含14个活性成分和109个药物靶点。通路富集分析得到59条信号通路。分子对接结果表明Cyclo(Leu-Pro)、Val-Val、Pro-Phe、Cyclo(His-Pro)等成分可能与核心靶点F2、MAPK1,MMP9、VCAM1等具有较好的结合能力,初步验证了网络药理学预测结果的准确性。结论:山西陈醋可能通过多成分、多靶点、多通路协同发挥预防调节心血管疾病和肥胖等疾病的保健作用。

超声辅助酶法制备富锌低分子牡蛎肽的工艺研究

以香港牡蛎为原料,通过酶解法制备富锌牡蛎酶解产物并对其相对分子量图谱和氨基酸组成进行分析。经过蛋白酶筛选、超声预处理后应用单因素试验、正交试验以及时间曲线优化酶解工艺,提高酶解产物的水解度和生物锌释放量。采用超声功率500 W、超声时间10 min进行预处理,选择动物蛋白酶进行酶解。最佳酶解工艺为加酶量1.6%、酶解时间4 h、酶解温度50℃、料液比1∶4、pH 6.5,得到牡蛎酶解产物水解度为49.581%。酶解产物的锌含量(以干基计)为680.831 mg/kg。牡蛎肽相对分子量小于1000 Da的组分达到81.87%,富含酸性氨基酸谷氨酸和天冬氨酸。香港牡蛎酶解产物中含有丰富的小分子肽,氨基酸组成较完善,锌含量较高,可为后续富锌产品的开发奠定基础。

新型乳腺癌靶向小分子多肽性能初探

目的本研究经固相合成法设计并合成一种新的多肽分子(AR),探讨其乳腺癌靶向性及生物安全性。方法以多种乳腺细胞为模型,通过共聚焦和流式试验探究该荧光多肽分子探针的细胞摄取特异性并检测其对细胞周期的影响;通过CCK8法探讨其细胞毒性,明确其生物安全性。结果共聚焦荧光成像和流式细胞分析结果显示MCF-7细胞的荧光强度明显高于正常乳腺上皮细胞MCF-10A以及其它类型乳腺癌细胞,验证了该探针具有良好的MCF-7细胞靶向特异性;CCK8结果显示,不同浓度AR-FITC处理后的MCF-7细胞存活率仍高于80%,表明该多肽探针具有较低的细胞毒性;细胞周期试验结果显示实验组和对照组MCF-7细胞的S期细胞分别为(12.45±0.75)%、(15.35±0.35)%,该细胞占比差异无统计学意义(P>0.05),表明AR对MCF-7细胞周期没有明显的影响。结论该新型多肽分子具有良好的肿瘤细胞靶向性及生物安全性,是一种较有潜力的乳腺癌靶向分子探针。

基于外源氨基酸超分子组装改良罗非鱼皮胶原蛋白肽热滞活性的初步研究

为了提高罗非鱼皮胶原蛋白肽作为绿色抗冻剂的实用性,通过酶促超分子组装的方式对其热滞活性进行改良。通过不同蛋白酶的作用将脯氨酸和甘氨酸分别进行超分子组装,测定组装后的游离氨基酸含量和相对分子量,并测定其过氧化氢酶残余活力和热滞活性。结果显示,胶原蛋白风味蛋白酶酶解产物(GF)中各处理组的游离氨基酸含量均增加,其中通过胰蛋白酶与木瓜蛋白酶作用的组装产物在分子量为0.1~5 kDa范围比重增加,过氧化氢酶活性降低,热滞活性增加;而碱性蛋白酶酶解产物(GA)在添加木瓜蛋白酶和胰蛋白酶组装后产物的游离氨基酸含量降低,相对分子量在0.1~5 kDa范围比重增加,各处理组过氧化氢酶活性均增加,热滞活性增加。研究结果得知GF、GA在胰蛋白酶及木瓜蛋白酶作用下与脯氨酸和甘氨酸发生超分子组装,提高了罗非鱼皮胶原蛋白肽热滞活性。

小麦抗氧化肽对人胚肾细胞氧化应激损伤的抑制作用及分子机制

通过2,2-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(AAPH)诱导建立人胚肾细胞(HEK293)氧化应激损伤模型,评价5种小麦蛋白源肽Leu-Tyr(LY)、Pro-Tyr(PY)、Tyr-Gln(YQ)、Ala-Pro-Ser-Tyr(APSY)和Arg-Gly-Gly-Tyr(RGGY)的抗氧化活性,然后利用量子化学计算和分子对接技术预测5种小麦蛋白源肽与2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)结合的最优构型和结合作用,探讨小麦蛋白源肽发挥活性的分子机制。细胞试验结果表明:5种小麦蛋白源肽作用后,细胞死亡率显著下降到3.68%以下(P<0.05),并且能显著减少AAPH诱导的活性氧自由基(ROS)生成(P<0.05),使ROS含量趋于正常水平;5种小麦蛋白源肽均呈现出较好的总抗氧化能力和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力(P<0.05),RGGY的总抗氧化能力最强,活性值为(1.46±0.08)mmol/L Trolox,其次是APSY、YQ、PY和LY;YQ的DPPH自由基清除能力最强,清除率为61.34%±2.24%,其次是APSY、RGGY、PY和LY。分子对接结果表明,5种小麦蛋白源肽的CDOCKER交互能量(−CIE)评分分别为13.3049、13.3973、13.4121、16.7685、16.2683,均可以有效地与ABTS相互作用,主要通过与ABTS分子之间形成较强的氢键和疏水作用力来发挥抗氧化活性。

猪源抗菌肽分子改造与应用进展

抗菌肽(AMPs)是动植物、微生物中普遍存在的一种小肽类物质,多数具有广谱抗菌活性,已逐渐发展为替代抗生素的有力候选者之一。猪源AMPs是第一批从哺乳动物中分离得到的AMPs,已发现有30多种,主要包括Cathelicidins家族和防御素(defensins)家族。这些猪源AMPs抗菌机制与抗生素不尽相同,其可以与细菌细胞膜相互作用破坏膜的完整性,最终导致细菌细胞内容物泄漏并杀死细菌,因此不易产生耐药性。但天然猪源AMPs还存在稳定性差、细胞毒性高及规模生产成本高等问题,目前的研究在于先后开发了氨基酸替换、序列截断、杂合、结构优化和/或脂肪酸修饰等方法,以期获得兼具高效和低毒的短序列AMPs。本文根据猪源AMPs的来源家族进行分类,并对其二级结构、抑菌机制及现阶段的改造和应用状况进行了综述。

新型胃泌素释放肽受体靶向PET分子探针应用于肿瘤显像的研究进展

胃泌素释放肽受体(GRPR)是一种属于铃蟾肽受体家族的G蛋白偶联受体,主要分布于整个胃肠道和中枢神经系统,通过与其配体胃泌素释放肽结合发挥生物学作用。近年研究发现,GRPR在许多恶性肿瘤中过度表达并参与恶性肿瘤的发生发展,如乳腺癌、前列腺癌、肺癌、胰腺癌和多形性胶质母细胞瘤等。正电子发射计算机断层扫描(PET)是一种通过检测放射性标记物质在人体内部的分布和浓度来提供图像的医学成像技术,能够提供更全面、准确的诊断信息。已有研究表明靶向GRPR的PET显像在多种恶性肿瘤的诊断、治疗监测和预后评估等方面发挥重大作用,因此,开发特异性强、亲和性高的GRPR探针对肿瘤的诊断与治疗意义重大。本文针对已报道的新型GRPR靶向PET分子探针的种类及肿瘤显像的应用展开综述,以期为GRPR靶向PET分子探针的研发及临床转化提供新思路和新方向。

菌解小分子鱼肽肥对毛竹鞭笋生长及竹林土壤生态的影响

毛竹林经营过程中为提高鞭笋产量而重施化肥造成竹林生态退化和竹笋品质降低,引进菌解小分子鱼肽肥,通过研究不同肥料配施方式对毛竹鞭笋产量及竹林土壤生态因子的影响,探明菌解小分子鱼肽肥对毛竹生理生态的作用机制。以相同经营现状的毛竹笋用林为研究对象,设置4个肥料配施处理(CK为750 kg·hm^(-2)复合肥、T1为375 kg·hm^(-2)复合肥、T2为“375 kg·hm^(-2)复合肥+150 kg·hm^(-2)菌解小分子鱼肽肥”、T3为“375 kg·hm^(-2)复合肥+300 kg·hm^(-2)菌解小分子鱼肽肥”)进行施肥,于鞭笋笋期统计鞭笋产量,测定土壤养分元素质量分数、土壤酶活性、叶片叶绿素以及叶片养分元素质量分数等指标,分析各指标在不同施肥处理之间的差异显著性和不同指标之间的相关性。结果表明:与750 kg·hm^(-2)复合肥处理相比,“375 kg·hm^(-2)复合肥+150 kg·hm^(-2)菌解小分子鱼肽肥”和“375 kg·hm^(-2)复合肥+300 kg·hm^(-2)菌解小分子鱼肽肥”处理时的鞭笋产量分别提高39.39%、29.09%。比较于750 kg·hm^(-2)复合肥处理和375 kg·hm^(-2)复合肥处理,“375 kg·hm^(-2)复合肥+150 kg·hm^(-2)菌解小分子鱼肽肥”处理显著提高了土壤p H以及有机碳、全氮、全钾、水解性氮、速效钾等土壤养分元素质量分数,显著提升了土壤脲酶、蔗糖酶、酸性磷酸酶活性,同时增加了叶片叶绿素以及碳、氮、钾等元素质量分数。相关性分析结果表明:鞭笋产量与土壤p H、有机碳、全氮、水解性氮、全钾、速效钾质量分数、蔗糖酶活性以及竹叶叶绿素、有机碳、氮、钾质量分数呈极显著正相关。菌解小分子鱼肽肥和复合肥合理配施可通过提高土壤肥力和土壤酶活性,促进毛竹养分元素吸收,从而提高鞭笋产量,减少化肥施用量。

小分子活性肽的降压作用

原发性高血压的发病涉及多种机制,现有降压药物并不能完全覆盖所有降压靶点。小分子活性肽广泛存在于动植物及人体内,其降压作用已在体内外试验中得到广泛证实。该文介绍小分子活性肽降低血压作用的研究进展。

RPS6亚基肽段抑制S180肿瘤细胞的分子机制

为探究核糖体蛋白RPS6亚基肽段对S180肿瘤细胞基因表达的影响及抑制肿瘤细胞的关键分子和信号通路,以S180荷瘤小鼠为模型,用RPS6亚基肽段处理S180荷瘤小鼠,对S180肿瘤细胞进行Illumina测序获得差异表达的基因,并对这些差异基因进行GO和KEGG分析。基因表达结果显示,RPS6亚基肽段会导致mt-Cytb、mt-Nd1、Rpl13基因表达降低,阻碍S180肿瘤细胞的氧化磷酸化过程。GO分析结果显示,RPS6亚基肽段抑制肿瘤细胞关键门类集中于质膜和质膜外侧组成成分的变化及免疫反应调节和免疫细胞的激活。差异基因结果显示,RPS6亚基肽段通过增强PRL/PRLR信号,上调Uchl1基因表达,诱导肿瘤细胞周期停滞。KEGG通路富集分析结果显示,穿孔素(PRF1)和颗粒酶B(GZMB)表达诱导细胞凋亡,同时自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)介导的细胞毒性与NF-κB信号通路信号增强,IFN-γ和TNF-α表达上调共同参与RPS6亚基肽段作用下的S180肿瘤细胞凋亡,抑制S180肿瘤细胞增殖。RPS6亚基肽段导致S180肿瘤细胞细胞周期停滞,并诱导自然杀伤细胞介导的细胞毒性及NF-κB信号通路的上调导致S180肿瘤细胞凋亡,为RPS6亚基肽段在抗肿瘤研究的应用提供一定的理论依据。

“一锅法”光控开环聚合原位调控聚类肽分子量及分子量分布

设计和合成了光敏性休眠引发剂2-硝基-4,5-二甲氧基苄基环己胺基甲酸酯,用于氮-丁基-氮-羧酸内酸酐(^(Bu)N-NCA)的可控开环聚合。该光敏性引发剂在紫外光(360 nm)下释放环己胺引发剂。通过改变紫外光的照射时长可控制环己胺引发剂的释放量,从而调控聚类肽的分子量。随着照射时长从1 h增至4 h,聚类肽的数均分子量从9.6×10^(3)降至4.6×10^(3)。通过调控紫外光的照射间隔控制环己胺引发剂的释放速率。先释放的引发剂先引发单体,后释放的引发剂后引发单体,形成链长不均一的聚合物。通过光控实现了“一锅法”原位调控聚类肽的分子量及分子量分布,为聚类肽分子量分布宽度及分布形状更精准的调控提供了可能,也为研究聚类肽分子量分布和性能间的关系奠定了基础。

靶向程序性细胞死亡蛋白配体-1多肽类放射性核素标记分子探针研究进展

程序性细胞死亡蛋白配体-1(PD-L1)是一个重要的免疫检查点分子,在调节机体免疫反应方面发挥重要作用。临床研究表明,肿瘤组织中PD-L1的表达水平与免疫检查点抑制剂疗效密切相关。由于肿瘤的时空异质性,临床上常用的免疫组织化学方法不能全面准确地反映患者体内PD-L1的表达水平,而核医学分子影像技术可在分子水平上无创、实时、动态、可视化监测机体内PD-L1的表达水平。本文主要针对靶向PD-L1多肽类放射性分子探针的研究进行综述,为寻找新型免疫成像的多肽类分子探针及免疫治疗适宜患者的筛选和疗效评估等提供指导。

多肽组学联合分子对接筛选玉足海参抗血栓肽

基于多肽组学联合分子对接技术筛选玉足海参来源的具有抗血栓作用的活性肽。采用LC-MS/MS技术表征玉足海参酶解液全肽谱,通过简易分离纯化建立小规模的候选肽库,同时借助生物信息学软件对多肽库进行理化性质分析,评估抗血栓活性筛选方法的可行性;利用Discovery Studio软件以重组水蛭素片段(HIRV2)与凝血酶的结合模式,进行分子对接筛选潜在抗血栓肽序列,以部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间及凝血酶抑制率4项指标评估人工合成肽的抗血栓活性。结果表明,玉足海参酶解液含有1 795条肽序列。选取相对分子质量为1~3 kDa的116条肽序列建立候选肽库,分子对接筛选出6种潜在的抗血栓活性肽(CDOCKER ENERGY均高于HIRV2)。其中SCp-1和SCp-2分别与凝血酶的10个氨基酸残基位点紧密结合,表明它们是潜在的抗血栓活性肽。体外活性表明,SCp-1和SCp-2均呈剂量依赖趋势的内源性抗凝活性以及共同通路的抗凝活性(P<0.05),二者相较下SCp-1在内源性通路抗凝能力较强,SCp-2则在共同通路表现出更好的抗凝活性。综上,通过多肽组学联合分子对接成功从玉足海参酶解产物中筛选获得2种新型食源性抗血栓肽。

不同分子量核桃肽在小鼠体内分布的初步探究

目的制备相对分子质量(M_(r))不同的核桃肽,并初步探究核桃肽经Cy7标记后在小鼠体内分布情况。方法利用不同酶降解核桃粕制备核桃肽,GPC色谱法测定核桃肽M_(r),利用Cy7标记的核桃肽进行小鼠活体成像,观察其在小鼠体内的分布情况。结果不同酶酶解得到的样品M_(r)占比不同,样品Ⅰ小分子量成分占比高,收率高,通过Cy7标记不同样品在小鼠体内呈现不同的荧光强度,Cy7-样品Ⅰ在脑部显现荧光信号,Cy7-样品Ⅱ和Cy7-样品Ⅲ仅在接受注射的尾部显现强荧光信号。结论不同酶制备的核桃肽在小鼠体内呈现不同的分布,样品Ⅰ中可能含有增强脑部荧光的肽段。

基于网络药理学及分子对接探讨猪胶原血管紧张素转换酶抑制肽的降压机制

该文通过网络药理学及分子对接研究了猪胶原蛋白源血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽改善高血压的作用机制。使用生物信息学工具,分析和预测生物活性肽的性质;利用数据库平台筛选出RL(Arg-Leu)的潜在靶点和改善高血压的相关靶点,将两者取交集获得活性肽RL改善高血压的潜在靶点;构建共同靶点间的蛋白互作网络,并对共同靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;通过分子对接,研究目标肽与高血压关键靶点的结合机制。结果表明,硅法筛选出的猪胶原蛋白活性肽RL可通过调节多种生物学过程在不同的细胞成分中发挥多种分子功能,通过PI3K-Akt信号通路、白细胞介素-17信号通路、T细胞受体信号通路、MAPK信号通路、Wnt信号通路以及血小板活化通路等发挥降血压的作用,与关键靶点ACE(6p0z)的相互作用最稳定,通过氢键与靶点蛋白结合,主要与Asp-153、Gln-150、Glu-143等多种氨基酸残基结合,从而影响靶点在各个通路中的作用,是辅助治疗高血压的最佳核心靶点。