人参皂苷和三七皂苷五种成分神经保护作用的均匀设计-高通量筛选研究

目的:通过对人参皂苷和三七皂苷多成分多水平均匀设计配伍的神经保护作用筛选研究,评价中药有效成分的均匀设计- 高通量筛选技术.方法:选取人参皂苷Re,Rb1,Rg1,Rg3 和三七皂苷R1 等五种皂苷单体6 个水平(1×10-4~1×10-9 mol·L-1)进行均匀设计配伍组合,通过神经细胞血清剥夺损伤模型进行药效高通量筛选;得到的最佳组合样品,再通过小鼠脑缺血再灌注损伤模型(避暗法、断头耐缺氧实验)及血清和脑、心肌组织老化相关酶测定,进行药效学评价.结果:在细胞实验中筛选得到的最佳3 个组合样品(A11,A12,P5),药效(细胞存活率＞90%)高于1×10-4 mol·L-1 浓度的五种皂苷单体及维生素E(细胞存活率最高78%);可明显改善小鼠脑缺血再灌注损伤所致的记忆障碍,增强耐缺氧能力,提高组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,降低一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,维持谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)及乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)含量稳定(P<0.01~0.05).结论:均匀设计配伍与中药复方配伍有相似之处,高通量筛选出的五种皂苷3 个最佳配伍组合样品对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,均匀设计- 高通量筛选适用于中药及其复方有效成分大规模药效筛选.

丹参水溶性有效成分对血管内皮细胞损伤保护作用的均匀设计-高通量筛选研究

目的：通过丹参七种水溶性有效成分多水平均匀设计配伍的血管内皮细胞保护作用筛选研究,评价中药有效成分的均匀设计-高通量筛选技术（uniform design-high throughput screening,UD-HTS）的应用.方法：选取原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸、丹参素钠、迷迭香酸、丹酚酸A、丹酚酸B七种丹参水溶性单体有效成分七个水平（1×10-4～1×10-10 mol·L-1）进行均匀设计配伍组合,通过H2O2诱导的氧化应激损伤血管内皮细胞模型、血管内皮细胞营养剥夺模型评价各种有效成分配伍组合对药效的影响.结果：经过初筛和复筛,初步得到了2个最佳配伍组合样品（A2、B4）,其细胞存活率分别为（70±4）％,（76±3）％.不同的细胞损伤模型筛选出不同的最优配比.结论：均匀设计配伍与中药复方配伍有相似之处,均匀设计-高通量筛选技术是适用于传统多因素多水平组合特点的大规模药效筛选研究新方法.

应用均匀设计-高通量筛选技术评价丹参有效单体成分抗氧化及海马神经细胞保护作用的最佳配伍

目的:通过均匀设计-高通量筛选(uniform design-high throughput screening,UD-HTS)技术,对丹参多种有效单体成分进行多因素多水平配伍组合样品抗氧化及海马神经细胞保护作用的筛选。方法:具有生物活性的丹参多种有效单体(脂溶性7种和水溶性7种)。按照均匀设计方案,得到各单体之间不同浓度配比的组合样品,通过抗2,2-二苯基-1-苦肼基自由基(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl,DPPH)氧化法和细胞学实验检测各组合样品药物活性。结果:通过初筛和复筛,得到A13、PA两个抗氧化及海马神经细胞保护作用最佳配伍组合样品。结论:均匀设计-高通量筛选技术可快速筛选出药效较好的组合样品,适合多因素多水平配比的大规模药物筛选。

中药丹参及复方丹参片17种有效成分抗氧化作用的均匀设计-高通量筛选研究

目的:在前期研究的基础上,以丹参及复方制剂复方丹参片有效成分组合活性评价为切人点,通过已经建立的多种抗氧化微孔板实验方法,探讨多因素、多水平均匀设计-高通量筛选(uniform design-high throughput screening,UD-HTS)中药研究的新模式。方法:通过SpcctraMax M5连续光谱酶标测试仪选择具有药理活性的丹参有效成分11种(其中脂溶性成分4种,水溶性成分7种)及复方丹参片有效成分6种,通过均匀设计,进行各种成分及不同浓度之间相互配伍组合,以抗2,2-二苯基-1-苦肼基自由基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)氧化活性、邻二氮菲-Fe^(2+)氧化法、还原能力测定及抗脂质过氧化法,评价各种有效成分组合对药效的影响。结果:经过初筛和复筛,初步得到了丹参最佳水溶性配伍、水溶性+脂溶性配伍及优化组合配伍的组合样品。结论:丹参各有效成分不同浓度均匀设计配伍,结合抗氧化高通量筛选技术可适用于传统多因素、多水平组合特点的大规模药效筛选研究的新方法。

均匀设计-高通量筛选技术在中药丹参多成分配比研究中的应用

目的以丹参有效成分组合活性评价为切入点,建立一种多因素多水平的均匀设计-高通量筛选(UD-HTS)中药研究新的模式。方法选择具有药理活性的丹参有效成分11种(其中脂溶性成分4种,水溶性成分7种),通过均匀设计,进行各种成分及不同浓度之间相互作用的组合,以DPPH氧化法评价各种有效成分组合对药效的影响。结果经过初筛和复筛,初步得到了丹参最佳水溶性配伍、水溶性+脂溶性配伍及优化组合配伍的组合样品。结论均匀设计-高通量筛选技术是适用于传统多因素多水平组合特点的大规模药效筛选研究新方法。