目的检测肾癌组织Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1),PDZ结合域的转录共刺激因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白表达,并探讨其与临床病理特征及患者远期生存的关系。方法前瞻性选取安徽医科...目的检测肾癌组织Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1),PDZ结合域的转录共刺激因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白表达,并探讨其与临床病理特征及患者远期生存的关系。方法前瞻性选取安徽医科大学第二附属医院2016年1月~2018年10月收治的132例肾癌患者。根据三年内是否死亡将其分为死亡组(n=20)和生存组(n=108)。采用免疫组织化学二步法检测YAP1,TAZ蛋白表达,用COX回归分析探讨患者死亡的危险因素。结果手术组切缘正常组织YAP1,TAZ蛋白阳性表达率分别为22.41%和17.24%,癌组织YAP1,TAZ蛋白阳性表达率分别为53.45%和48.28%,对应癌组织高于切缘正常组织(χ^(2)=11.864,12.680,P=0.001,0.000)。穿刺活检癌组织YAP1和TAZ蛋白阳性表达率分别为77.14%和62.86%。临床分期、有副肿瘤综合征、有远处转移、伴下腔静脉癌栓、组织学分级与癌组织YAP1蛋白阳性表达率均呈正相关(χ^(2)=8.664~21.321,P=0.000~0.003),与TAZ蛋白阳性表达率也呈正相关(χ^(2)=6.518~25.529,P=0.000~0.001);癌组织YAP1,TAZ蛋白阳性表达与肾癌三年内生存率均呈正相关(χ^(2)=10.273,12.657;P=0.001,0.000);临床分期Ⅲ~Ⅳ期[风险比(hazard ratio,HR)=3.550,P=0.016]、有副肿瘤综合征(HR=4.267,P=0.012)、组织学Ⅲ~Ⅳ级(HR=5.382,P=0.001)、癌组织TAZ蛋白阳性表达(HR=5.760,P=0.007)、伴下腔静脉癌栓(HR=6.508,P=0.005)、有远处转移(HR=7.330,P=0.003)、癌组织YAP1蛋白阳性表达(HR=7.877,P=0.001)均是肾癌三年内死亡的危险因素。结论肾癌组织YAP1和TAZ蛋白阳性表达率高,且与临床分期、组织学分级、副肿瘤综合征、远处转移和下腔静脉癌栓有关,上述病理特征与癌组织YAP1和TAZ蛋白阳性表达均是患者远期生存的影响因素。展开更多
文摘目的检测肾癌组织Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1),PDZ结合域的转录共刺激因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)蛋白表达,并探讨其与临床病理特征及患者远期生存的关系。方法前瞻性选取安徽医科大学第二附属医院2016年1月~2018年10月收治的132例肾癌患者。根据三年内是否死亡将其分为死亡组(n=20)和生存组(n=108)。采用免疫组织化学二步法检测YAP1,TAZ蛋白表达,用COX回归分析探讨患者死亡的危险因素。结果手术组切缘正常组织YAP1,TAZ蛋白阳性表达率分别为22.41%和17.24%,癌组织YAP1,TAZ蛋白阳性表达率分别为53.45%和48.28%,对应癌组织高于切缘正常组织(χ^(2)=11.864,12.680,P=0.001,0.000)。穿刺活检癌组织YAP1和TAZ蛋白阳性表达率分别为77.14%和62.86%。临床分期、有副肿瘤综合征、有远处转移、伴下腔静脉癌栓、组织学分级与癌组织YAP1蛋白阳性表达率均呈正相关(χ^(2)=8.664~21.321,P=0.000~0.003),与TAZ蛋白阳性表达率也呈正相关(χ^(2)=6.518~25.529,P=0.000~0.001);癌组织YAP1,TAZ蛋白阳性表达与肾癌三年内生存率均呈正相关(χ^(2)=10.273,12.657;P=0.001,0.000);临床分期Ⅲ~Ⅳ期[风险比(hazard ratio,HR)=3.550,P=0.016]、有副肿瘤综合征(HR=4.267,P=0.012)、组织学Ⅲ~Ⅳ级(HR=5.382,P=0.001)、癌组织TAZ蛋白阳性表达(HR=5.760,P=0.007)、伴下腔静脉癌栓(HR=6.508,P=0.005)、有远处转移(HR=7.330,P=0.003)、癌组织YAP1蛋白阳性表达(HR=7.877,P=0.001)均是肾癌三年内死亡的危险因素。结论肾癌组织YAP1和TAZ蛋白阳性表达率高,且与临床分期、组织学分级、副肿瘤综合征、远处转移和下腔静脉癌栓有关,上述病理特征与癌组织YAP1和TAZ蛋白阳性表达均是患者远期生存的影响因素。
文摘目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录本1(nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1)通过调节微小核糖核酸(micro RNAs,miR)-125b-5p/胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulinlike growth factor binding protein 5,IGFBP5)轴对血管瘤内皮细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测血管瘤组织(2016年3月~2019年3月收集,n=18)、瘤旁组织样本(2016年3月~2019年3月收集,n=18)以及人脐静脉内皮细胞HUVES,人血管瘤内皮细胞HemECs,HDEC中NEAT1,miR-125b-5p及IGFBP5蛋白表达。构建沉默NEAT1,同时沉默NEAT1和miR-125b-5p的HemECs细胞系,通过细胞活力检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、台盼蓝染色、流式细胞术、划痕愈合实验、Western blot分别观察NEAT1和miR-125b-5p对HemECs细胞增殖、凋亡、迁移及IGFBP5,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达的影响;双荧光素酶报告基因实验检测NEAT1与miR-125b-5p,mi R-125b-5p与IGFBP5的关系。结果 与瘤旁组织比较,血管瘤组织中NEAT1(2.87±0.22 vs 1.00±0.00),IGFBP5蛋白(1.45±0.14 vs 0.27±0.02)表达水平升高,miR-125b-5p(0.24±0.02 vs 1.00±0.00)表达水平降低,差异具有统计学意义(t=35.400~161.220,均P <0.05);与HUVES细胞比较,HemECs,HDEC细胞中NEAT1(2.76±0.24,1.78±0.13 vs 1.00±0.00),IGFBP5蛋白(1.31±0.15,0.78±0.06 vs 0.24±0.02)表达升高,miR-125b-5p表达(0.19±0.02,0.45±0.04 vs 1.00±0.00)降低,差异具有统计学意义(t=17.320~99.204,14.697~33.680,均P<0.05),且HemECs细胞中NEAT1和IGFBP5蛋白表达量最高,miR-125b-5p表达量最低,因此,选取HemECs细胞为研究对象;与si-NC组比较,si-NEAT1组NEAT1(0.32±0.02 vs 1.01±0.12)表达、A值(0.45±0.04 vs 1.13±0.11)、细胞生长率(32.28%±2.79%vs 99.41%±0.22%)、划痕愈合率(20.33%±1.23%vs 49.24%±2.43%)及IGFBP5(0.41±0.04 vs 1.31±0.20),PCNA(0.36±0.04 vs 1.27±0.14),Bcl-2(0.48±0.04 vs 1.39±0.16)和MMP-9(0.21±0.02 vs 1.09±0.10)蛋白表达降低,mi R-125b-5p(1.87±0.15 vs 1.02±0.10)表达、细胞凋亡率(45.58%±3.34%vs 12.36%±1.07%)升高,差异具有统计学意义(t=10.809~58.755,均P <0.05);下调miR-125b-5p减弱了沉默NEAT1对HemECs细胞增殖、迁移的抑制及对细胞凋亡的促进作用(t=9.218~15.010,均P <0.05);NEAT1与miR-125b-5p,miR-125b-5p与IGFBP5存在靶向调控关系。结论 沉默NEAT1通过上调miR-125b-5p来抑制IGFBP5表达,从而抑制HemECs细胞增殖、迁移,并促进细胞凋亡。
