含有尿嘧啶DNA糖苷酶基因表达载体的构建

采用自行设计的带酶切位点的上下游引物，用PCR技术，从大肠杆菌ATCC23743的DNA中，获得了含有编码尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG）基因的PCR产物，以该PCR产物构建了重组克隆质粒PGEM／UNG，DNA序列分析结果确证其中含有完整的UNG基因．利用该重组质粒，进一步构建了重组表达质料pBV／UNG．

采用十二烷基硫酸钠抑制PCR产物中残留尿苷酶

目的 :研究抑制PCR产物中残留尿苷酶 (uracilDNAglycosylase ,UDG)活性的试剂。 方法 :采用DNA EIA技术检测在全dU DNA扩增物中含有稳定剂和不含稳定剂的样品 ,置室温 2 4h和 37℃ 4 8h的DNA杂交百分率。结果 :(1)在PCR产物中加入稳定剂A液和B液置室温 2 4h ,取 5 μl直接杂交 ,其杂交百分率为 6 1.4 70 %和6 8.996 % ,对照组为 99.2 83%。 (2 )在 30 μlPCR产物中加入稳定剂后 ,并加 1×PCR缓冲液稀释至 70 μl,置 37℃4 8h取 10 μl样品杂交 ,5 μl和 2 .5 μlA液组杂交百分率为 71.0 92 %和 6 7.6 91% ,对照组为 6 8.0 2 0 %和 6 3.90 6 %。5 μl和 2 .5 μlB液组杂交百分率为 91.333%和 80 .30 7% ,对照组为 6 3.90 6 %和 6 8.0 2 0 %。 结论 :B液可抑制PCR产物残留UDG活性 ,对保护全dU

疱疹病毒尿嘧啶DNA糖基化酶基因及其编码蛋白的研究进展

概述了疱疹病毒尿嘧啶DNA糖基化酶基因的特点、编码蛋白的基本功能和分布定位及与其他蛋白的相互作用的研究进展并进行了展望,以期为该基因的深入研究提供参考。认为,疱疹病毒尿嘧啶DNA糖基化酶基因属于早期基因,其编码的蛋白通过与其他蛋白相互作用共同完成DNA的修复与合成。