蛇毒型神经生长因子在脑缺血再灌注损伤后神经重塑过程中对Doublecortin的影响

目的探讨经侧脑室给予蛇毒型神经生长因子(viper venom nerve growth factor,vNGF)对脑缺血再灌注损伤后大鼠神经重塑的影响。方法雄性Wistar大鼠90只随机分成5组:vNGF-25u组、vNGF-50u组、vNGF-100u组、缺血再灌注(I/R)组和假手术(S)组,每组18只。造模后每日根据Longa评分评价大鼠神经功能情况。于2、7、14d分批处死大鼠取脑组织提取总RNA,用荧光定量PCR检测Doublecortin(DCX)mRNA的表达。结果 (1)大鼠的神经功能评分随着时间延长而降低;同一时间下,vNGF各组评分低于I/R对照组,vNGF各组评分随着给药浓度增高而降低;(2)随着时间延长,DCX mRNA在各组的表达从2d开始逐渐增加,在7d达最高峰,14d时有所下降。术后同一时间,DCX mRNA在蛇毒组的表达高于在I/R对照组,并且DCX mRNA在vNGF-50U组的表达为蛇毒组中最高。结论 vNGF可通过增强DCX迁移效应促进神经重塑和恢复神经功能缺损。

蛇毒型神经生长因子对脑缺血再灌注损伤后大鼠脑组织细胞外信号调节激酶和核因子-κB表达的影响

目的 观察蛇毒型神经生长因子（vNGF）对脑缺血再灌注损伤后大鼠神经重塑的影响.方法 雄性Wistar大鼠90只随机分成5组：vNGF-25u组、vNGF-50u组、vNGF-100u组、缺血再灌注（I/R）组和假手术（S）组,每组18只.第2、7、14天分批处死大鼠取脑组织提取总RNA,用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞外信号调节激酶（ERK）mRNA和核因子（NF）-κB mRNA的表达.结果 （1）随着时间的延长,NF-κB mRNA的表达逐渐增加 同一时间,NF-κB mRNA在vNGF各组的表达高于I/R对照组 NF-κB mRNA的表达随着vNGF浓度的升高而增加.（2）随着时间的延长,ERK mRNA在各组的表达逐渐降低 术后同一时间,在I/R对照组的表达最高,vNGF各组次之.结论 脑缺血再灌注损伤后经侧脑室给予vNGF,可以通过正性调节NF-κB转导通路和负性调节ERK通路,从而促进神经再生和恢复神经缺损功能.

ERK通路参与蛇毒型神经生长因子诱导的中枢神经保护作用

目的观察经侧脑室给予蛇毒型神经生长因子（vNGF）对脑缺血再灌注损伤后细胞外信号调节激酶（extracellular signal—regulated kinase，ERK）表达的影响，探讨外源性vNGF通过影响ERK的表达减轻神经元损伤的可能机理。方法取健康清洁级雄性Wistar大鼠，按随机分组原则分为2d组（n=30）、7d组（n=30）、14d组（n=30）。每个时间点再分为五个亚组vNGF25U、vNGF50U、vNGF100U、生理盐水对照组、以及假手术组，每个亚组6只大鼠。生理盐水对照组和vNGF各亚组大鼠采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注损伤模型，术后各时间点vNGF亚组采用改良的侧脑室置管术法给予相应剂量蛇毒型神经生长因子，生理盐水对照组给予等渗盐水。采用免疫组织化学法测定术后第2d、第7d以及第14d缺血皮质周围和海马CA3／DG区ERK阳性细胞数。结果（1）与对照组相比，经侧脑室给予蛇毒型神经生长因子各组大鼠神经功能明显改善，显示了外源性补充蛇毒型神经生长因子的明显正性干预作用。（2）ERK免疫组织化学结果显示：经侧脑室给予vNGF各亚组ERK阳性细胞在缺血皮质周围和海马CA3／DG区第2d表达为高峰，第7d明显下降，第14d恢复基线水平。与相应时间点对照组相比，呈明显下降趋势。结论局灶性脑缺血再灌注后磷酸化ERK表达增加，NGF可能通过抑制ERK途径而发挥神经保护作用。