翼核果化学成分的研究

从广西产鼠李科植物翼核果(Ventilago leiocarpa Benth.)根中分得三个蒽醌成分和两个萘醌成分,根据理化性质和光谱数据,分别鉴定为大黄素-甲醚(1)、大黄素(2)、1,2,4,8-四羟基-3-甲基蒽醌(3)、翼核果醌-I(ventiloquinone-I,4)和一个新的萘醌化合物,命名为翼核果素(ventilagolin,5)。

翼核果素对肝癌HepG2细胞凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响

目的:研究翼核果素对人肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法:以不同浓度的翼核果素作用于体外培养的Hep G2细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,HE、吖啶橙染色观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率和周期,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白F-actin形态学变化。结果:翼核果素可明显抑制人肝癌Hep G2细胞的增殖且呈剂量依赖性,作用于Hep G2细胞24 h的IC50值为124.77μmol·L^(-1)。显微镜可见细胞核变形、染色体聚集等典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,60、90μmol·L^(-1)翼核果素给药组细胞凋亡的百分率显著高于对照组,G2/M期细胞比例显著高于对照组,细胞骨架蛋白F-actin呈现解聚断裂状态。结论:翼核果素可抑制Hep G2细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与细胞周期阻滞、细胞骨架蛋白F-actin解聚有关。

翼核果素对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制探讨

目的:观察翼核果素对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其机制。方法:通过皮下注射肝癌HepG2细胞的方法构建荷肝癌BALB/C裸鼠模型,将50只荷肝癌裸鼠随机分为5组,每组10只,分别为模型组、氟尿嘧啶(20 mg/kg)组、翼核果素低、中、高剂量(1 mg/kg、2 mg/kg、4 mg/kg)组,隔天腹腔注射给药1次,模型组给予同体积的生理盐水,两周后处死裸鼠,剥离瘤块称重并计算抑瘤率。采用illumina HiseqTM测序平台对翼核果素(100μmol/L)Test组和Normal组的HepG2细胞进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq),并对结果进行基因差异表达、基因功能和信号通路富集分析。根据RNA-seq结果,采用qPCR检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)、肿瘤坏死因子(TNF)、Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)、白介素-1(IL-1)、p53等基因的表达水平。结果:与模型组比较,翼核果素高剂量组瘤块重量显著减轻(P<0.01),抑瘤率显著升高。RNA-seq结果显示,翼核果素处理HepG2细胞后共有3052个基因的表达发生显著变化,其中1037个基因上调,1979个基因下调(P<0.05),这些差异基因主要富集在MicroRNAs、MAPK signaling pathway、Spliceosome、p53 signaling pathway、TNF signaling pathway、mTOR signaling pathway等通路,影响肝癌细胞的增殖、免疫、周期、凋亡及代谢等功能。qPCR检测发现,100μmol/L翼核果素能够显著提高JNK、IL-1和p53的表达,降低TNF和FADD的表达。结论:翼核果素对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤生长具有一定的抑制作用,其机制可能与翼核果素调节肝癌细胞增殖、免疫、周期、凋亡及代谢等功能有关,其中MAPK、p53和TNF信号通路可能起关键性调控作用。

瑶药翼核果中翼核果素和翼核果醌-Ⅰ的含量测定及抗氧化活性研究

目的建立翼核果中的翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量测定方法,对翼核果素及翼核果醌-Ⅰ抗氧化活性进行初步评价。方法采用HPLC对翼核果药材中的翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量进行测定,并进行方法学考察;通过测定翼核果素及翼核果醌-Ⅰ对DPPH自由基的清除能力,以半数清除浓度(IC50)值作为评价清除DPPH自由基能力的指标。结果翼核果药材中翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量分别为0.56%,0.10%。2种成分清除DPPH自由基的IC50值分别为1.13,1.63 mg·mL^(-1)。结论 2种成分的定量分析方法分离度良好,重复性好,抗氧化方法简便、快捷,为翼核果的深入研究提供了实验依据。