电阻抗断层成像指导机械通气呼吸末正压设置的研究进展

目前机械通气设置最佳呼气末正压(PEEP)的策略仍需要进一步临床探索,电阻抗断层成像(EIT)是20世纪末新发展的临床技术,能够实时监测肺通气等,有助于临床应用来探索最佳PEEP的设置。本综述重点总结了近几年发表的使用EIT指导PEEP设定的原理,通过监测呼吸系统顺应性、空间分布、时间分布、局部肺灌注等信息设定PEEP,以及分析了用此方法设定PEEP的效果和/或使用EIT进行个体化PEEP设置的相关基础与临床研究信息。

急性呼吸窘迫综合征治疗:现状与未来

急性呼吸窘迫综合征是由不同的遗传背景、环境因素和宿主因素相互作用的一系列表型,在病因、病理生理学、病理表现、临床特征上都具有显著的异质性,这也为治疗带来了诸多的难点;根据炎症反应程度、病理生理特点、影像学表现和组学差异等表型导向的急性呼吸窘迫综合征个体化、精准化治疗可能是未来的治疗方向。呼吸支持治疗是急性呼吸窘迫综合征治疗中重要的环节,循证医学已经证明肺保护性通气能改善患者预后,但随着急性呼吸窘迫综合征病因愈加多样,病理生理和临床表现越为复杂,对小潮气量通气实施、体外膜氧合、镇静镇痛控制呼吸驱动以及俯卧位通气的指征和实施提出了新的挑战。

不同麻醉方法对大鼠重症胰腺炎肺微循环的影响

目的:对比水合氯醛注射麻醉与异氟烷吸入麻醉方法对重症急性胰腺炎急性肺损伤(SAP-ALI)大鼠肺组织损伤严重程度及微循环的影响,指导SAP-ALI动物模型的建立。方法:30只雄性Wistar大鼠,随机分为3组,分别应用水合氯醛注射麻醉(注射组,n=12)和异氟烷吸入麻醉(吸入组,n=12)的方法建立大鼠SAP-ALI模型,余6只作为对照(对照组),观察大鼠24h死亡率和腹腔内组织大体病理改变,应用ELISA检测血淀粉酶的浓度,应用Moor血流血氧检测仪及激光共聚焦血流血氧检测仪检测大鼠活体肺组织血流量变化,观察肺组织及胰腺组织病理变化,比较组间差异。结果:两种麻醉方法均能成功建立大鼠SAP-ALI模型,但与吸入组相比,注射组大鼠死亡率更高,肺微循环血流量更低(P<0.05),肺组织病理表现更重(P<0.05)。结论:应用异氟烷吸入麻醉建立大鼠SAP-ALI造模可提高实验结果的准确性。

GPR120基因通过调控NLRP3炎症小体激活保护脓毒症肺损伤的机制研究

目的通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症模型验证G蛋白偶联受体120(G-protein coupled receptor120,GPR120)基因对NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎症小体及肺损伤的影响,并探索其调控分子机制。方法通过C57BL/6小鼠构建体内脓毒症模型,通过GPR120基因激动剂TUG891进行干预,验证GPR120基因对脓毒症小鼠肺损伤的保护作用;然后进行转录组测序,筛选差异信号通路,并在动物模型中验证NLRP3炎症小体及调控蛋白的差异表达。通过慢病毒转染构建GPR120基因过表达/低表达的Raw264.7单核巨噬细胞株,观察GPR120基因对NLRP3炎症小体的调控作用。结果与脓毒症组相比,LPS+TUG891组小鼠肺组织中包括cAMP通路基因在内的77个基因表达显著上调,37个基因表达下降。LPS组的GPR120水平较正常对照组显著降低,同时cAMP/PKA信号通路关键蛋白CREB及PKA表达减少,NLRP3、Caspase-1及IL-1β等炎症小体激活相关蛋白水平升高(P<0.01),予以TUG891处理后,组织内GPR120表达回升,cAMP/PKA信号通路重新被激活(P<0.01),NLRP3炎症小体蛋白活化程度下降(P<0.05)。体外实验中,LPS诱导的脓毒症可引起细胞增殖活性下降,GPR120基因在脓毒症巨噬细胞中表达减低(P<0.001),通过干预GPR120基因表达,证实GPR120基因可负性调控NLRP3炎症小体的活化程度及细胞炎症反应(P<0.01)。结论脓毒症中GPR120基因的激活可通过抑制NLRP3炎症小体的活化,减轻脓毒症的炎症反应及肺损伤。

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨清胰汤对重症急性胰腺炎肺泡上皮细胞损伤的修复机制

目的:探究Wnt/β-catenin信号通路在重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤发病机制中的作用及清胰汤(QYD)的干预机制。方法:将40只大鼠分为假手术(Sham)组、Sham+QYD组、SAP组和SAP+QYD组。采用经胆胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型,造模48 h后取胰腺和肺组织,苏木素-伊红(HE)染色检测组织病理损伤,真空干燥法检测肺湿/干重比值(W/D),ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-6水平,TUNEL试剂盒和蛋白免疫印迹法(WB)检测肺组织凋亡情况。免疫荧光法检测CyclinD1、β-catenin与SFTPC双染情况。WB法检测肺组织中Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白和下游细胞周期蛋白的表达。结果:与Sham组相比,SAP组大鼠HE切片显示胰腺和肺部病变严重,IL-6含量明显升高,SFTPC表达减少,提示肺泡上皮细胞严重损伤。与SAP大鼠相比,清胰汤治疗后大鼠胰腺和肺组织病理评分、W/D等各项指标均有不同程度改善,IL-6含量减少,凋亡蛋白Bcl-2、Bax及Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白和下游细胞周期蛋白表达明显上调,免疫荧光双染结果显示清胰汤治疗组出现更多的双染细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:清胰汤通过激活Wnt/β-catenin信号通路减少肺泡上皮细胞凋亡,进而在促进急性胰腺炎相关肺损伤修复中发挥关键作用。

NLRP3-细胞焦亡在实验性脓毒症肺损伤中的作用

NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)介导的肺实质细胞与免疫细胞焦亡在脓毒症肺损伤的发生机制中发挥关键作用。NF-κB、JAK2/STAT3和MAPK信号通路参与了NLRP3介导的细胞焦亡。靶向NLRP3-细胞焦亡及其相关信号通路,Physalin B、五味子素、促红细胞生成素等药物干预,针刺足三里、肺俞穴等物理疗法,以及麦角内酯等NLRP3特异性抑制剂,均发挥了良好的抗脓毒症肺损伤作用。本文综述NLRP3-细胞焦亡在实验性脓毒症肺损伤中的作用与机制,以及靶向NLRP3-细胞焦亡防治脓毒症肺损伤的实验研究进展,期望以NLRP3-细胞焦亡为切入点,为形成脓毒症肺损伤的防治新策略提供思考。

PD-L1介导淋巴细胞YAP磷酸化在病毒性急性肺损伤中的作用

目的:探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)介导淋巴细胞yes相关蛋白(YAP)磷酸化在病毒性急性肺损伤中的作用。方法:将SPF级C57BL/6J小鼠随机分为对照组、根据小鼠气管内滴注聚肌苷—聚胞苷酸(即Poly I:C)的时间分为4 h、8 h、1 d、3 d、7 d组,在这五组中选取炎症损伤最严重的组作为Poly I:C组;利用PD-1/PD-L1抑制剂BMS-110mg/kg腹腔注射预处理后气管内滴注Poly I:C,作为Poly I:C+BMS-1组。野生型小鼠Poly I:C组和PD-L1敲基因小鼠Poly I:C组处理同Poly I:C组;野生型小鼠对照组和PD-L1敲基因小鼠对照组腹腔注射麻醉后气管内给予等量生理盐水。相应时间点将小鼠安乐死收集标本。采用苏木精—伊红(HE)染色法评估小鼠肺组织损伤程度;通过检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度、总细胞数以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平评估炎症情况;蛋白免疫印迹(western blotting,WB)检测程序性死亡受体1(PD-1)、PD-L1、YAP、p-YAP蛋白表达。结果:与对照组比较,8 h、1 d、3 d、7 d组肺组织病理学损伤评分及BALF总蛋白浓度显著升高,8 h、1 d、3 d组BALF中总细胞数明显增多,4 h、8 h、1 d、3 d组BALF中TNF-α水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05);其中1 d组小鼠肺组织病理学损伤评分、BALF中总蛋白浓度、BALF总细胞数以及BALF中TNF-α水平均高于4 h、8 h、3 d、7 d组。与对照组比较,1 d、3 d、7 d组小鼠肺组织中PD-1和PD-L1蛋白水平均明显升高(P<0.05)。Poly I:C组小鼠肺组织病理损伤评分和BALF中TNF-α水平明显高于对照组,与Poly I:C组相比,Poly I:C+BMS-1组小鼠肺组织病理损伤评分和BALF中TNF-α水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,Poly I:C组和Poly I:C+BMS-1组小鼠淋巴细胞中YAP蛋白表达明显下调,p-YAP蛋白表达显著上调(P<0.05);与Poly I:C组相比,Poly I:C+BMS-1组小鼠淋巴细胞中YAP蛋白表达上升,p-YAP蛋白表达下降(P<0.05)。与对照组相比,Poly I:C组小鼠淋巴细胞中YAP蛋白表达明显下调而p-YAP蛋白表达显著上调,PD-L1基因敲除后Poly I:C组小鼠淋巴细胞中YAP蛋白表达有所上升而p-YAP蛋白表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:病毒性急性肺损伤小鼠肺组织中高表达PD-L1蛋白,PD-L1可能通过激活淋巴细胞的YAP磷酸化加重病毒性急性肺损伤。

清解化攻方对重症急性胰腺炎模型大鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制

目的使用网络药理学探究清解化攻方对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的可能作用机制,并通过动物实验验证。方法检索TCMSP、BATMAN-TCM、ETCM、SwissTargetPrediction数据库获取清解化攻方中各药物入血有效成分的作用靶点,在GeneCard数据库中检索获得SAP-ALI疾病靶点,将药物靶点与疾病靶点取交集获得共同靶点,随后通过STRING数据库及Cytoscape3.7.1软件对共同靶点进行蛋白互作网络分析,借助DAVID数据库行GO、KEGG富集分析,最后动物实验对关键信号通路予以验证。结果共筛选出清解化攻方治疗SAP-ALI有效活性成分28种,作用于42个共同靶点。PPI网络分析显示,STAT3、IL-6、TGFB1可能是核心靶点;GO、KEGG富集分析主要涉及细胞增殖、PI3K/AKT信号通路等。动物实验证实,清解化攻方能够改善SAP-ALI大鼠模型的胰腺、肺组织的病理情况,下调血清中α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,下调肺组织中PI3K/AKT1信号通路相关蛋白及mRNA表达水平。结论清解化攻方可能通过多成分、多靶点,多通路协同治疗SAP-ALI,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化有关。

MSCs通过抑制PI3K/Akt信号通路减轻VAP肺损伤的作用研究

目的呼吸机相关性肺炎(VAP)是机械通气患者最常见的感染性疾病,严重影响重症患者的预后,但其发病机制目前仍未完全清晰。本文针对VAP发生时,间充质干细胞(MSCs)对肺泡上皮细胞的炎症反应的影响进行研究。方法本研究实施于2020年5月至2023年3月。本研究建立VAP大鼠动物模型并提取、鉴定MSCs,取SPF级健康雄性大鼠15只,体质量180~200 g,随机分为空白对照组、VAP组和VAP+MSCs组。空白对照组、VAP组的肺泡上皮细胞单独在培养箱内培养,VAP+MSCs组的肺泡上皮细胞与MSCs在培养箱内共培养,48 h后通过实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)及酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)以及下游炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1α(IL-1α)、γ-干扰素(IFN-γ)]的表达情况。采用独立样本t检验、单因素方差分析。结果qPCR及ELISA检测结果显示空白对照组PI3K、Akt以及下游炎症因子TNF-α、IL-1α、IFN-γ表达水平最低;VAP组PI3K、Akt以及下游炎症因子TNF-α、IL-1α、IFN-γmRNA表达水平最高,高于另外两组;而VAP+MSCs组炎症因子水平虽高于空白对照组,但较VAP组下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在VAP发生过程中MSCs可能通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制肺泡上皮细胞炎症因子表达,从而达到抑制或减轻VAP的作用。

血清CTSB、lncRNA MALAT1水平与脓毒症相关急性肾损伤严重程度的关系及预后预测价值

目的探讨脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)患者血清组织蛋白酶B(CTSB)、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)水平与病情严重程度的关系及其对预后的预测价值。方法选取2021年1月至2023年1月德阳市人民医院收治的80例SA-AKI患者为SA-AKI组,另选取同期80例单纯脓毒症患者为单纯脓毒症组,根据病情严重程度将SA-AKI患者分为1期(22例)、2期(27例)、3期(31例),并根据28 d临床结局分为死亡组(35例)和存活组(45例)。采用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量PCR检测血清CTSB与lncRNA MALAT1水平,多因素Logistic回归分析SA-AKI患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清CTSB、lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者死亡的预测价值。结果与单纯脓毒症组比较,SA-AKI组血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高(P<0.05)。1期、2期、3期SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平依次升高(P<0.05)。80例SA-AKI患者28 d病死率为43.75%。AKI分期3期、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估评分、血乳酸、CTSB、lncRNA MALAT1升高为SA-AKI患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平预测SA-AKI患者死亡的曲线下面积为0.894,大于血清CTSB、lncRNA MALAT1水平单独预测的0.797、0.793(P<0.05)。结论SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高与病情加重和预后不良密切相关,血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者预后的预测价值较高。

急性胰腺炎相关肺损伤的CT表现与肾周间隙受累的相关性

目的回顾性分析急性胰腺炎(AP)相关肺损伤的CT影像学特征,探究AP的严重程度、肺组织损伤程度与肾周间隙受累的相关性。方法收集2018年12月1日~2022年7月31日经南方医科大学第五附属医院临床和实验室检查诊断为AP的402例患者的临床及胸部、上腹部CT影像学资料。根据CT严重指数将AP分为轻症AP(MAP)、重症AP(SAP);根据高分辨率CT形态学将肺损伤程度分为正常肺组织、轻度肺损伤、中度肺损伤和重度肺损伤;根据肾筋膜厚度判别肾周间隙受累情况。结果根据高分辨率CT影像学表现,402例AP患者中急性胰腺炎相关肺损伤发生率为82.34%(331/402),包括轻度肺损伤264例、中度肺损伤34例、重度肺损伤33例。AP相关肺损伤表现:258例表现为胸膜增厚、胸膜下线、支气管血管束增粗;46例表现为小叶间隔增厚;48例表现肺内斑片状实变影或伴胸腔积血、积液。单因素分析显示,年龄、脂肪酶>300 U/L、胰腺CT分级、是否累及肾周与肺损伤程度相关(P<0.05)。逐步多因素无序多分类Logistic回归分析显示:以无肺损伤为对照,年龄为轻度肺损伤的危险因素(OR=1.04,95%CI:1.02~1.06);年龄(OR=1.05,95%CI:1.03~1.08)和累及肾周(OR=6.69,95%CI:2.40~18.66)为中度肺损伤的危险因素,淀粉酶>110 U/L为保护因素(OR=0.24,95%CI:0.06~0.97);年龄(OR=1.04,95%CI:1.01~1.07)和累及肾周(OR=34.86,95%CI:7.03~172.94)为重度肺损伤的危险因素,女性(OR=0.23,95%CI:0.07~0.78)和轻度肺损伤分级(OR=0.09,95%CI:0.01~0.76)为重度肺损伤的保护因素。结论在评估AP肺损伤严重程度及其发展过程中,肾周间隙受累可能比CT严重指数具有更高的临床诊断价值。

血清LncRNA-MALAT1、Ang-2与重症急性胰腺炎患者并发急性胃肠损伤的相关性研究

目的探讨血清长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA-MALAT1)、血管生成素-2(Ang-2)与重症急性胰腺炎(SAP)患者并发急性胃肠损伤(AGI)的相关性。方法选取2021年1月—2023年1月苏州大学附属苏州市第九人民医院重症医学科收治的轻症急性胰腺炎(AP)患者78例为轻症AP组、中度AP患者78例为中度AP组、SAP患者145例为SAP组,根据是否并发AGI将SAP患者分为AGI亚组83例和非AGI亚组62例。采用实时荧光定量PCR检测血清LncRNA-MALAT1水平,酶联免疫吸附法检测血清Ang-2水平;多因素Logistic回归分析SAP患者并发AGI的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平对SAP患者并发AGI的预测价值。结果轻症AP组、中度AP组、SAP组血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平依次升高(F/P=659.197/<0.001、682.682/<0.001);145例SAP患者AGI发生率为57.24%(83/145),AGI亚组SAP患者多器官功能障碍综合征(MODS)比例、急性生理和慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分、ICU停留时间及血清D-乳酸、LncRNA-MALAT1、Ang-2水平高于非AGI亚组(χ^(2)/t/P=19.273/<0.001、5.052/<0.001、5.308/<0.001、4.085/<0.001、6.864/<0.001、6.824/<0.001);多因素Logistic回归结果示,MODS、APACHEⅡ评分高、D-乳酸高、LncRNA-MALAT1高、Ang-2高为SAP患者并发AGI的独立危险因素[OR(95%CI)=4.496(1.335~15.138)、1.331(1.142~1.551)、1.070(1.020~1.123)、1.101(1.055~1.148)、1.571(1.239~1.994)];血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平及二者联合预测SAP患者并发AGI的AUC分别为0.790、0.785、0.895,二者联合的AUC大于血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平单独预测(Z/P=3.143/0.002、3.650/<0.001)。结论血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平升高与SAP患者并发AGI独立相关,血清LncRNA-MALAT1联合Ang-2水平预测SAP患者并发AGI的价值较高。

抗炎通腑方对脓毒症急性肺损伤大鼠mtDNA-STING-NLRP3信号通路的影响

目的探讨抗炎通腑方对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠的影响及作用机制。方法将35只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松(DEX)组、中药(TCM)组和TCM+DEX组,每组7只。分别给予相应药物灌胃、造模。酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及血清中巨噬细胞计数;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测肺组织中干扰素基因刺激因子(STING)、磷酸化干扰素基因刺激因子(P-STING)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白信使核糖核酸(ASC mRNA)和相关蛋白的表达水平。测定肺组织湿/干比(W/D),观察肺组织病理学改变。检测肺组织中巨噬细胞表达情况。结果与正常组比较,各组指标显著升高;与模型组比较,DEX组、TCM组及TCM+DEX组各指标均显著降低。与模型组比较,TCM+DEX组改变最为明显,肺组织损伤改善,W/D值(4.77±0.29 vs.3.78±0.48)及巨噬细胞计数(13.39±2.06 vs.7.09±1.42)均降低(P<0.05),IL-6(152.51±22.27 vs.58.92±13.53)、IL-1β(126.19±10.02 vs.45.69±6.67)、IL-18(59.12±6.31 vs.31.75±4.23)及TNF-α(126.57±8.25 vs.49.59±8.12)水平均降低(P均<0.01),肺组织中线粒体DNA(mtDNA)损伤及释放、P-STING(0.32±0.03 vs.0.16±0.03)、STING mRNA(19.24±2.70 vs.0.32±0.16)、NLRP3 mRNA(20.03±5.06 vs.1.20±0.04)、ASC mRNA(16.96±4.31 vs.3.41±2.52)和相关蛋白的表达均降低(P<0.01)。结论抗炎通腑方可能通过调控mtDNA-STING-NLRP3信号通路减轻脓毒症ALI大鼠的炎症。

骨科创伤患者医院获得性肺炎的危险因素

目的分析骨科创伤患者医院获得性肺炎(HAP)的危险因素,为制定预防控制措施提供依据。方法回顾性调查2011年6月—2015年5月某院骨科病房创伤患者发生HAP的情况,并采用单因素和多因素logistic回归分析其危险因素。结果共调查骨科创伤患者2 578例,发生HAP92例,HAP发病率3.57%。92例HAP患者共检出病原菌107株,主要为肺炎克雷伯菌(22株,占20.56%)、大肠埃希菌(14株,占13.08%)、鲍曼不动杆菌(13株,占12.15%)等。住院日数≥15 d、吸烟史≥3年、卧床≥7 d、伴有基础疾病、合并症、留置导尿管≥7 d、采用手术治疗、采用机械通气、入住ICU、开放性损伤、血糖≥11 mmol/L、血浆清蛋白<30 g/L、血红蛋白浓度<90 g/L和糖皮质激素使用≥4 d等14个因素均是骨科创伤患者发生HAP的危险因素(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,吸烟、卧床、手术治疗、机械通气、使用糖皮质激素和贫血6个因素为骨科创伤患者发生HAP的独立危险因素。结论骨科创伤患者HAP与多种因素有关,其中以手术治疗、机械通气、糖皮质激素使用、长期吸烟、卧床和贫血等6个因素为主。

MCC950对线粒体损伤相关分子模式诱导大鼠肺损伤的保护作用

目的严重创伤诱发的急性呼吸窘迫综合征目前尚无特异性治疗策略,探讨MCC950对线粒体损伤相关分子模式(MTDs)诱导肺损伤的影响,初步分析其作用机制。方法将40只SD大鼠采用随机数字表法分为对照组、MTDs组、MCC950组和MTDs+MCC950组4组,MTDs+MCC950组采用腹腔注射MCC950(20 mg/kg)预处理SD大鼠1 h后,经尾静脉注射MTDs(5%体积肝[5])到大鼠体内;对照组注射等渗盐水;MTDs组腹腔注射等渗盐水,尾静脉注射MTDs;MCC950组腹腔注射MCC950,尾静脉注射等渗盐水,12 h后麻醉,腹主动脉放血处死。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18含量,BCA法检测BALF中蛋白含量,称重以计算肺湿重/体重比值(LWW/BW),采用HE染色后光镜观察组织病理学改变,Smith肺损伤评分评价肺损伤情况,Western blot检测Pro-Caspase-1和Caspase-1蛋白表达。结果与对照组相比,MTDs组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18含量显著增多(P<0.05),MCC950组差异无统计学意义(P>0.05),MTDs+MCC950组中TNF-α含量显著增多(P<0.05),而IL-1β和IL-18差异无统计学意义(P>0.05);与MTDs组相比,MCC950+MTDs组BALF中IL-1β和IL-18含量显著减少(P<0.05)。与对照组相比,MTDs组LWW/BW比值明显增大[(4.19±0.36)mg/g vs(6.32±0.54)mg/g,P<0.05],BALF中蛋白含量明显增多[(0.12±0.03)g/L vs(0.79±0.07)g/L,P<0.05];与MTDs组相比,MCC950组、MCC950+MTDs组LWW/BW比值[(4.35±0.29)mg/g、(4.47±0.46)mg/g]明显降低(P<0.05),BALF中蛋白含量[(0.12±0.06)g/L、(0.15±0.06)g/L]明显减少(P<0.05)。Smith肺损伤评分统计分析表明,与对照组相比,MTDs组肺损伤评分明显增高(1.00±0.00 vs 8.33±0.58,P<0.05);与MTDs组相比,MCC950+MTDs组肺损伤评分明显降低(8.33±0.58 vs 3.67±0.58,P<0.05)。与对照组相比,MTDs组Pro-Caspase-1和Caspase-1蛋白水平明显增高(P<0.05);与MTDs组相比,MCC950+MTDs组Caspase-1蛋白条带灰度降低,蛋白表达水平降低(P<0.05),Pro-caspase 1无明显变化(P>0.05)。结论 MCC950可能通过抑制NLRP3炎性体活化对MTDs诱导的肺损伤发挥保护作用。

呼吸机相关性肺损伤17例回顾性分析

目的 提高对呼吸机相关性肺损伤(VALI)的认识。方法 对1986年～2001年行机械通气(MV)过程中发生VALI的17例患者进行回顾性分析。结果 17例VALI中包括气胸5例,系统性气栓塞4例,急性肺损伤4例,弥漫性肺损伤4例。结论 呼吸机因素和患者本身因素是发生VALI的重要原因;制定更为合理的个体化通气策略及其它措施是提高MV治疗价值的关键。

密闭舱室内非金属材料燃烧释放有毒气体对大鼠肺组织通透性的影响

目的观察密闭舱室内非金属材料燃烧释放有毒气体对大鼠肺毛细血管通透性及肺表面活性物质相关蛋白A的影响。方法建立密闭舱内动物烟雾吸入模型,将36只SD大鼠完全随机分为对照组及烟雾吸入后1、6、24、72h和7d组,观察吸入损伤后不同时相点肺组织的病理改变,肺水含量及肺通透指数的变化,采用RT-PCR法检测大鼠肺组织SP-AmRNA的表达。结果烟雾吸入后大鼠肺组织病理改变与急性肺损伤样的病理改变特征相似,24h为肺组织病理改变最严重期,在此期间动物的肺水含量也较对照组有明显增加(P<0.05);肺泡灌洗液及血清中蛋白含量在烟雾吸入后不同时相点均增高,肺通透性指数在1、6h和24h显著高于对照组(P<0.05);烟雾吸入后各时相点动物肺组织SP-AmRNA表达均降低,其中1、6、24h和72h组与对照组比较差异显著(P<0.01)。结论密闭舱室内非金属材料燃烧释放的毒性气体可引起肺泡毛细血管通透性的改变及肺表面活性物质相关蛋白A的降低,肺血管及间质之间液体交换障碍,导致肺水肿进而引发急性肺损伤。

清胰汤对大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型肺损伤的治疗机理研究

目的:研究清胰汤(QYT)对大鼠急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)肺损伤的治疗机理。方法:Wistar大鼠经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠(1mL/kg,0.1mL/min)诱发AHNP;QYT组在造模后30min灌胃QYT(10mL/kg);善宁组在造模后30min皮下注射善宁(50μg/kg)。每组又分别随机分为36、、12h三组(每组8只),其余12只用于观察24小时死亡率。于不同时间点测定血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)、磷脂酶A2(PLA2)、肿瘤坏死因子(TNFα);测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)、PLA2、TNFα;提取肺泡灌洗液巨噬细胞核蛋白,ELISA法检测核因子(NF-κBP65)表达;对肺、胰腺组织行病理检查。结果:QYT明显降低AHNP大鼠死亡率;减轻肺、胰腺病理损伤;降低血清、肺组织PLA2、TNFα水平;显著降低肺泡巨噬细胞NF-κB活性。结论:清胰汤可通过其多途径多靶点作用,抑制PLA2活性,抑制肺内炎症相关细胞NF-κB活化,下调多种细胞因子表达,减轻肺损害,降低死亡率。

iPSC-MSC来源的外泌体对LPS刺激肺泡巨噬细胞产生炎性因子的影响

目的探讨i PSC-MSC来源的外泌体（exosome,Exo）对LPS刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用。方法采用旋转超滤法提纯i PSC-MSC外泌体,以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383,分别给予Exo（50μg/ml）、LPS（50ng/ml）、LPS（50ng/ml）＋Exo（50μg/ml）培养24h,以不含Exo和LPS培养为对照组,利用酶联免疫标记法（ELISA）检测各组上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白浓度。结果提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡,直径40-100nm,表达Exo标志物CD9和CD63;LPS组上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度（435.38±36.31pg/ml、319.76±39.14pg/ml和408.33±43.44pg/ml）与空白对照组（37.48±8.75pg/ml、33.51±7.88pg/ml和37.73±8.46pg/ml）和Exo组（38.71±9.14pg/ml、32.05±6.81pg/ml和42.84±6.54pg/ml）比较显著上调（P〈0.01）;LPS＋Exo组TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度（369.30±32.74pg/ml、249.23±36.77pg/ml和328.91±46.45pg/ml）与LPS组相比,明显减少（P〈0.05）;空白对照组与Exo组的TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度无显著性差异。结论成功富集Exo;i PSC-MSC来源的Exo可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞表达炎性因子。

SP-A在急性肠损伤大鼠大肠和肺组织中表达的相关性研究

目的:通过动态观测急性肠损伤(Acute intestinal injury,AII)肺和大肠等组织中肺表面活性蛋白A(pulmonary surfactant protein A,SP-A)含量的变化,寻找其表达的规律及各组织的相关性。方法:60只SD大鼠随机分为六组:空白对照组、生理盐水组(normal saline group,NS组)、急性肠损伤12h组(AII12h组)、急性肠损伤24h组(AII24h组)、急性肠损伤36h组(AII36h组)、急性肠损伤48h组(AII48h组)。采用结肠内注入醋酸(Ace-tic acid)法制备AII大鼠模型,NS组注入等量NS,空白对照组不作任何处理。分别于注入醋酸后12、24、36、48 h及注入NS后48 h采集标本,空白对照组亦于48 h后采集标本,采用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测大鼠BALF及各种组织中SP-A的含量。结果:①各组大鼠BALF中SP-A的含量明显高于肺、大肠、皮肤、肝组织,有极显著性差异(P<0.01);肺组织SP-A含量其次,与其他组织比有显著性差异(P<0.05),小肠组织中无SP-A表达。②NS组、空白对照组BALF、肺、大肠、肝中SP-A的含量较AII36h组高,差异有极显著性(P<0.01)。③AII时间延长,AII各组BALF、肺组织、大肠组织中SP-A的含量下降,至AII36h时含量降至最低;随后有回升趋势。④大肠组织与BALF、肺、皮肤、肝组织中SP-A含量的相关性比较,相关系数r分别为0.292,0.378,0.137,0.518。结论:①大鼠SP-A的合成与分泌具有一定特异性;②BALF、肺、大肠、肝组织中SP-A含量的变化与AII的严重程度有一定的相关性;③大鼠大肠组织中SP-A表达的变化与肝、肺组织中SP-A表达的变化一致性较好。