微生物法测定威替米星原料药和注射液的效价

目的:建立测定威替米星效价的方法并用于其原料药及注射液的质量控制。方法:以短小芽孢杆菌作为试验菌种,采用二剂量法测定威替米星的效价,并对其原料药及2种规格的注射液各3批样品进行了测定。结果:按生物检定统计法进行可靠性测验,结果显示效价测定结果可信限率均小于5%。结论:本法可以用于威替米星原料药及注射液的效价测定。

反相离子对高效液相色谱法测定威替米星及其有关物质的含量

目的:建立一种用于分析新的氨基糖苷类抗生素———威替米星的反相离子对高效液相色谱法。方法:直接采用紫外检测器检测威替米星及其有关物质。在AgilentXDBC8柱上威替米星和有关物质达到完全分离,柱温为30°C,流动相为乙腈∶缓冲液(20mmol·L-1庚烷磺酸钠,30mmol·L-1三乙胺,加磷酸调pH至2.5)(25∶75)。结果:方法评价结果显示本法具有良好的线性和重现性。威替米星的最低检测限为0.1μg。结论:本研究建立的方法可以用于测定原料药和注射液中威替米星的含量和有关物质检查。

基因芯片技术研究威替米星及庆大霉素对HK-2细胞毒作用的机制

目的:研究威替米星和庆大霉素对体外培养的人肾小管上皮细胞系(HK-2)毒性作用的分子机制。方法:利用基因芯片技术检测3.2 mg.mL-1威替米星和庆大霉素作用于HK-2细胞48 h后基因表达的变化。结果:威替米星诱导HK-2细胞87个基因发生显著的上调,10个基因发生明显的下调。庆大霉素则引起62个基因表达显著上调,18个基因明显下调。差异表达的基因的功能涉及细胞生长增殖调控、凋亡、细胞周期、应激反应、转运及代谢酶等方面。结论:威替米星和庆大霉素改变细胞凋亡、应激反应及转运等相关基因表达可能参与其细胞毒性作用过程。

气相色谱法测定威替米星原料中的有机残留溶剂含量

目的:建立气相色谱法测定威替米星原料药中有机残留溶剂的含量。方法:采用气相色谱法,色谱柱为HP5(5%苯基甲基硅酮)毛细管柱(30m×320μm×0.25μm),载气为氮气,以程序升温方式使乙醇、二氯甲烷、乙二醇二甲醚和二甲基甲酰胺达到了完全分离,检测器为氢火焰离子化检测器。结果:在该法采用的色谱条件下,测定4种溶剂线性关系、精密度、准确度、灵敏度均达到了预定的分析要求,在威替米星原料药中检出了乙醇。结论:本法能快速准确的对涉及的4种有机溶剂进行检测,可用于威替米星原料药质量控制中的有机残留溶剂检查。

荧光衍生化高效液相色谱法测定大鼠血浆中威替米星的含量

目的:建立一种高效液相色谱法(HPLC)用于测定血浆中的威替米星含量。方法:样品处理采用乙腈蛋白沉淀法,并以奈替米星作为内标,将威替米星与氯甲酸芴甲酯(FMOC Cl)衍生化后在反相C18柱上达到分离,以荧光检测器检测反应生成的衍生物。试验中对不同衍生化条件进行了考察。流动相为乙腈水(95∶5),荧光检测激发波长263nm,发射波长315nm。结果:威替米星线性范围是0.02～45mg·L-1,定量限为0.02mg·L-1。血浆中的相对平均回收率为99.84%。结论:本法重现性好,灵敏度高,可以用于治疗药物监控和药动学研究中测定血浆中威替米星的含量。

微生物法考察威替米星注射液的生物学稳定性

目的:对威替米星注射液的生物学稳定性进行研究。方法:将威替米星注射液置于不同条件下考察其稳定性,采用微生物法和无菌检查法对放置样品的效价稳定性及是否长菌进行检测。结果:本品经高温试验(60.0±s2.0)℃10d,光照试验(4500lx)10d,加速试验[相对湿度(75±5)%,(40.0±2.0)℃]6mo,长期试验[相对湿度(60±5)%,(25.0±2.0)℃]12mo,其效价均未有明显变化,无菌检查亦符合规定。结论:本品在各放置条件下稳定性良好。

反相离子对高效液相色谱法测定威替米星的稳定性

目的:对威替米星原料药的稳定性进行研究。方法:将威替米星原料药置于不同条件下考察其稳定性,采用反相离子对高效液相色谱法对稳定性放置样品的含量及有关物质进行检测。结果:本品经高温试验[(60.0±s2.0)℃]10d,高湿度试验[相对湿度(75±5)%]10d,加速试验[相对湿度(75±5)%,(40.0±2.0)℃]6mo,长期试验[相对湿度(60±5)%,(25.0±2.0)℃]12mo,原料药的颜色外观略有变化,有关物质及含量均无明显变化,在合格范围之内。但高湿条件下5,10d样品,原料药吸湿严重,含量有所下降。结论:本品在长期放置条件下稳定性良好,但有引湿性,应置于密闭容器、干燥环境中保存。