姜科姜黄属植物有效成分的研究

研究不同产地姜科姜黄属植物挥发油的化学成分 ,了解不同产地姜科姜黄属植物挥发性成分的差别 ,为控制其药材质量提供理论依据。采用水蒸气蒸馏法提取不同产地姜科姜黄属植物的挥发油 ,用气相色谱 -质谱联用仪对其进行分离测定 ,结合计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定 ,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果发现 ,不同产地姜科姜黄属植物的水蒸气蒸馏提取物得率在0.20%～2.13 %之间 ,分别鉴定出24～40个化学成分。不同品种、不同产地姜科姜黄属植物的挥发油含量和其所含成分有较大差别 ,文献报道的某些有效成分如莪术酮、莪术二酮、莪术醇和表莪术酮在某些供试品中未检测到。实验中10个供试品药材中挥发性成分主要为单萜类及倍半萜类化合物及其衍生物 ,倍半萜类化合物的百分含量 (44.57%～88.65 %)明显高于单萜类化合物的百分含量 (1.63 %～26.69%)。

莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学研究

目的研究莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学.方法采用高效液相色谱法测定姜黄素的血药浓度.色谱柱:Lichrospher-5-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-5%醋酸水(45:55);体积流量:1 mL/min;检测波长:420 nm.结果姜黄素在6.5～104 μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5).平均回收率为98.5%,RSD为2.41%(n=5).采用药动学计算程序处理,姜黄素的药动学参数:ka为0.53/h、ke为0.10/h、t1/2ka为1.32 h、t1/2k为6.89 h、tpeak为3.89 h、Cmax为93.15 ng/mL、AUC为1 369.38 ng/mL.结论本法稳定、简单、可靠,可用于姜黄素的血药浓度分析及其药动学研究.

超临界流体萃取分析蓬莪术挥发性成分

用超临界流体萃取、毛细管气相色谱及气相色谱质谱对蓬莪 术挥发油进行分析。最优化的超临界流体萃取条件为20.0 MPa，55 ℃，0.5 mL乙醇作改 性剂，动态萃取40 min，CO2用量为12 mL，并与索氏萃取、水蒸气蒸馏比较。

蓬莪术挥发油提取技术的研究及其化学成分分析

采用超临界CO2 流体萃取、索氏提取、水蒸汽蒸馏 3种提取技术提取蓬莪术挥发油 ,并用GC MS联用仪分析其化学成分 .实验结果表明 :超临界CO2 流体萃取法在挥发油得率、有效抗肿瘤组分、工艺流程、有机溶剂残留、挥发油外观及香气等诸多方面均明显优于索氏提取法和水蒸汽蒸馏法 。

川产道地药材莪术、郁金新品种“川蓬1号”的选育研究

目的:选育高产、优质、抗性强的蓬莪术新品种。方法:经过三轮系统选育获得高产、优质、抗性强的蓬莪术新品种:初选,通过搜集全国种质资源,从上千个单株中初选优良单株;选系,对预选的优良单株进行跟踪继续筛选研究,对其生物学特性、产量、挥发油含量、抗性着重考察,初选优良株系;品系比较试验,通过优良株系与当地生产用种进行品比试验和区域试验,选择优良品种进行申报。结果:蓬莪术新品种"川蓬1号"和当地主流品种相比较,根茎增产32.9%;块根增产22.7%;根茎及块根的内在品质如挥发油、浸出物的含量等均符合中国药典标准,根茎浸出物及挥发油含量分别高于对照品系15.60%和9.30%。结论:"川蓬1号"遗传性状稳定一致,与对照相比适应性强,稳定性好,产量高,内在品质优,安全性好,适宜在四川金马河流域栽培,可以继续建立高产优质示范基地,并进一步积极推广。

醋制蓬莪术中总姜黄素回流提取工艺的优化

目的优化醋制蓬莪术中总姜黄素回流提取工艺。方法以双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含有量为评价指标,乙醇体积分数、乙醇用量、提取次数、提取时间为影响因素,正交试验结合人工神经网络优化提取工艺。结果最佳条件为加入3倍量95%乙醇提取2次,每次2 h,人工神经网络优化后双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含有量分别为1.12、19.83、30.00μg/mL,均高于正交试验优化后。结论该方法稳定可行,重复性好,可用于回流提取醋制蓬莪术中总姜黄素。

蓬莪术新品种“川蓬2号”的选育研究

目的:采用系统选育的方法,优选蓬莪术新品种。方法:2014年和2015年,分别在四川双流、崇州、温江3个地区开展了蓬莪术新品系的多点试验,对其生物学性状、物候期、农艺性状、产量和药材品质等方面进行综合评价,并选择优良品系进行申报。结果:与对照比较,蓬莪术新品种"川蓬2号"根茎增产21.86%,其浸出物、挥发油含量分别提高16.67%、7.95%,吉马酮含量提高17.72%;块根增产18.52%,其吉马酮含量提高16.82%。2016年8月9日通过审定为抗癌成分吉马酮含量高含型新品种。结论:"川蓬2号"蓬莪术新品种具有良好的丰产性、稳定性和适应性以及内在品质优等特点,适合在四川金马河流域推广种植。

蓬莪术醋制前后总姜黄素的大鼠肠吸收动力学差异比较

目的比较蓬莪术醋制前后总姜黄素的大鼠肠吸收动力学差异。方法建立大鼠在体循环肠灌流模型,设置蓬莪术生品总姜黄素组、醋品总姜黄素组、生品总姜黄素配伍生品挥发油组及醋品总姜黄素配伍醋品挥发油组共4个组别,分别计算总姜黄素中指标性成分双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素的吸收速率常数(K_(a))、吸收半衰期(t_(1/2))、单位时间吸收率(P)。结果蓬莪术醋制后总姜黄素中3个指标性成分的吸收速度和吸收程度均增加,且在小肠的主要吸收部位发生了后移。醋制前后分别配伍挥发油后,总姜黄素3个指标性成分吸收速度降低,但吸收程度无较明显改变。结论蓬莪术醋制后,增加了总姜黄素中指标性成分的吸收,增强了破血消癥药效的发挥,可为进一步阐释蓬莪术醋制科学内涵奠定基础。

星点设计-效应面法优选蓬莪术醋制工艺

目的:优选醋煮莪术的炮制工艺参数,对莪术醋制工艺进行规范化研究。方法:采用星点设计-效应面优化法(CCD-RSM),以姜黄素含量和挥发油含量为评价指标,优选加米醋量、烘制时间、烘制温度等莪术醋煮工艺参数。结果:取莪术饮片适量,加入30%米醋,拌匀闷润2h,煮至醋液收干,置于120℃中干燥30min,取出稍冷即得。结论:星点设计-效应面法优化莪术醋制工艺参数方法可行,建立的数学模型预测性良好。

醋炙蓬莪术和醋炙温莪术CO_2超临界萃取物的化学成分比较研究

目的:比较研究醋炙蓬莪术和醋炙温莪术CO2超临界萃取物的化学成分。方法:采用CO2超临界萃取法提取醋炙蓬莪术和醋炙温莪术的挥发油,用GC-MS法进行化学成分比较研究。结果:醋炙蓬莪术SFE提取物有71个化合物,醋炙温莪术SFE提取物有84个化合物,二者在相同的保留时间有44个相同的化合物,如1,8-桉树脑、樟脑、异龙脑、β-榄香烯、吉马烯-D、吉马烯-B、吉马酮、新莪术二酮、臭樟脑、γ-谷甾醇等。结论:醋炙蓬莪术和醋炙温莪术的挥发油成分有差异,其挥发油的化学成分值得研究。

莪术超微颗粒制备的正交实验研究

目的用自制的机械纳米球磨机对莪术粗粉进行超细化加工,以期得到得到莪术超细干粉体和超细溶液。方法通过正交实验设计,考察了加入乙醇介质、球料比、磨料时间3个因素对莪术超细粉体制备的影响。结果得到了平均粒径为242nm的均匀颗粒。结论选用球料比为30∶1,湿法加工4 h的超微细化效果最好。

莪术中挥发性成分的酶提取及GC-MS分析

采用纤维素酶提取法(CE)和水蒸气蒸馏提取法(DSE)提取莪术药材中的挥发油成分,利用气相色谱-质谱联用技术对其进行化学成分分析,分别鉴定出34种和26种化学成分,用峰面积归一法,通过数据处理系统得出各化学成分,分别占挥发油总成分的67.61%和60.15%,共同组分中,含量最多的是表-莪术酮和β-姜黄酮。

川产莪术植株产量与品质特性的调查研究

[目的]调查川产莪术植株各部位生物学产量,初步研究其资源品质特性,为茎叶资源的开发利用提供科学依据。[方法]在主产区随机采集川产莪术代表性植株,以植株不同部位为试验研究材料,应用《中华人民共和国药典》及文献中的品质检测方法,调研川产莪术植株产量并检测品质特性。[结果]植株每窝二母姜(莪术)干品平均产量为224.44g,其中茎叶光合产物、脂溶性组分、蛋白质积累量分别占植株资源总量的40.61%4、2.05%、38.06%,以叶片的脂溶性组分含量(2.897%)最高;川产莪术植株的灰分含量均符合《中华人民共和国药典》(2010版,二部)莪术、郁金要求。[结论]川产莪术植株茎叶为可利用的优良资源,建议在主产区川产莪术植株枯萎前采收,对茎叶加以回收利用,以提高川产莪术植株的产油率或用作饲料。

不同产地莪术挥发油气相色谱-质谱联用分析

目的:对三种不同产地温莪术、蓬莪术以及广西莪术挥发油的化学成分进行了GC-MS分析比较。方法:采用水蒸气蒸馏法提取三种不同产地的莪术挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术,对其中的化学成分进行分析鉴定。结果:初步鉴定了三种不同产地莪术挥发油中的主要成分,不同产地莪术挥发油成分有一定差异。结论:为莪术药材的质量评价提供依据。

正交试验结合 CCD 响应面法优化绿丝郁金酒炙工艺研究

目的优化绿丝郁金酒炙工艺。方法以HPLC法测定酒郁金中吉马酮和莪术呋喃二烯酮的含量作为评价指标,采用正交试验结合CCD响应面法,对影响绿丝郁金酒炙工艺的3个因素进行筛选和优化。结果绿丝郁金最佳酒炙工艺为:每100 g绿丝郁金饮片,加入10 mL黄酒与6.5 mL水的混合液,拌匀闷润,118℃炒制5 min即得。验证实验结果表明该工艺条件重复性良好,具有合理性和可行性。结论采用正交实验和CCD响应面法优选的绿丝郁金酒炙工艺稳定可行,可用于其炮制工艺的优化。

基于响应曲面法优选绿丝郁金产地趁鲜加工工艺

目的采用单因素试验、响应曲面法优选绿丝郁金产地趁鲜加工工艺。方法以切片前烘制温度、切片前烘制时间、切片方式、切片厚度、切片干燥温度为考察因素,以外观性状和内在质量为考察指标,在单因素试验的基础上,用Box-Behnken响应面试验设计优化绿丝郁金的产地趁鲜加工工艺。结果筛选得到的绿丝郁金产地趁鲜加工最佳工艺为:将净制绿丝郁金鲜品蒸制15min,取出晾冷,切片前烘制温度45℃,切片前烘制时间5h,切片方式横切,切片厚度5mm,切片干燥温度65℃。结论优选的趁鲜加工工艺与传统饮片加工相比具有明显的优越性,其浸出物、挥发油、吉马酮含量分别提高了7.64%、50%、60%,且生产效能和环境兼容性等更强,可用于绿丝郁金产地趁鲜加工。

星点设计-效应面法优化醋莪术挥发油滴丸制备工艺研究

目的:优选蓬莪术挥发油滴丸的制备工艺。方法:采用水蒸气蒸馏法提取醋莪术中的挥发油。以成品的丸重差异系数、外观评分、溶散时限和吉马酮、呋喃二烯含量的总评"归一值"为评价指标,在单因素试验基础上,采用四因素五水平星点试验考察滴距、基质与挥发油质量比、药液温度和冷凝液上部温度对莪术滴丸制备工艺的影响,对试验数据进行多元线性、二项式方程和三项式方程拟合,建立回归模型,通过效应面法确定最佳工艺并进行预测分析和验证试验。结果:醋莪术挥发油滴丸的最佳制备工艺为基质PEG 4000,冷凝液为二甲基硅油,滴距为6cm,基质挥发油(4:1),药液温度85℃,冷凝液上部温度15℃。结论:星点设计-效应面法适用于醋莪术挥发油滴丸的制备工艺优化,建立的数学模型具有良好的预测性,为醋莪术挥发油新制剂的开发提供科学依据。

蓬莪术醋制前后改善斑马鱼急性肝损伤的作用机制研究

目的基于核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad3信号通路探讨醋制前后蓬莪术改善硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导斑马鱼急性肝损伤的作用机制。方法以醋制前后的蓬莪术为研究对象,建立TAA诱导斑马鱼急性肝损伤模型,将醋制前后蓬莪术水煎液分别设置高、中、低剂量(8、4、2 mg/mL)组,以异甘草酸镁为阳性对照药物组,斑马鱼培养水为对照组,给药72 h后观察斑马鱼幼鱼肝脏形态,通过苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;采用试剂盒检测斑马鱼幼鱼中丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;利用qRT-PCR检测斑马鱼幼鱼Nrf2、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、Smad3和Smad7基因表达;Western blotting测定斑马鱼幼鱼Nrf2/HO-1和TGF-β/Smad3信号通路相关蛋白表达。结果醋制前后蓬莪术对TAA导致的肝组织细胞形态损伤具有保护作用。生化结果表明,与模型组比较,醋制前后蓬莪术水煎液组ALT、AST活性及GSH水平均显著升高(P<0.05、0.01、0.001),MDA水平均显著降低(P<0.001)。qRT-PCR结果表明,与模型组比较,醋制前后蓬莪术水煎液组Nrf2、IL-10、Smad7 m RNA表达水平显著升高(P<0.05、0.01、0.001),醋蓬莪术水煎液高剂量组Smad3 m RNA表达水平显著降低(P<0.001);其中,与等剂量蓬莪术组相比,醋蓬莪术高剂量组显著抑制Nrf2、Smad3的m RNA表达(P<0.05、0.001),且醋蓬莪术具有促进IL-10和Smad7 m RNA表达的趋势,但没有显著性差异。Western blotting结果表明,与模型组比较,蓬莪术水煎液高、中剂量组和醋蓬莪术水煎液各剂量组Nrf2蛋白表达水平显著升高(P<0.001),蓬莪术高剂量组和醋蓬莪术各剂量组Smad3蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01、0.001),蓬莪术水煎液高剂量组和醋蓬莪术水煎液高、中剂量组TGF-β蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01、0.001);其中,与等剂量蓬莪术组相比,醋蓬莪术各剂量组Nrf2蛋白表达水平显著升高(P<0.001),且醋蓬莪术具有抑制Smad3和TGF-β蛋白表达的趋势,但没有显著性差异。结论醋制前后的蓬莪术可以不同程度地改善TAA诱发的急性肝损伤,其作用机制可能与调控Nrf2/HO-1和TGF-β/Smad3信号通路有关。

基于pH值动态变化的川产道地药材蓬莪术醋制前后化学成分差异研究

目的测定蓬莪术炮制过程中pH值及7种成分(双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯)量的动态变化,从而对其所含的姜黄素类和挥发油类成分在醋制过程中受水、热、酸等外界因素的作用而发生的化学成分量变化进行研究。方法分别以蒸馏水、9°米醋、9%醋酸水溶液对蓬莪术进行炮制,并对特定时间点的水液pH值进行测定,用SPSS软件对所得数据进行分析;采用HPLC方法同时测定生品组、空白组、醋制组和参照组蓬莪术样品中7种成分的量,并对其量的变化进行分析。结果与空白组相比,醋制组和参照组最终的pH值偏低且无显著差异;与空白组和参照组相比,醋制组中测定的3种姜黄素类成分量均增加[双去甲氧基姜黄素质量分数为(0.002 320±0.000 344)mg/g、去甲氧基姜黄素质量分数为(0.059 65±0.015 64)mg/g、姜黄素质量分数为(0.272 5±0.125 2)mg/g],而测定的挥发油类成分有不同程度地降低。结论在炮制过程中,药用辅料9°米醋中的主要有效成分可能是醋酸;米醋中的醋酸及其他少量有机成分可能通过调节pH值来保护蓬莪术药材中化学成分不被水、热、酸破坏;通过对不同成分保护程度的差异来调节蓬莪术醋制前后毒效成分的减加,不仅体现了9°米醋作为药用辅料的科学性,也为进一步研究蓬莪术醋制"减毒增效"物质基础提供了新思路。

川产道地药材蓬莪术醋制前后挥发油的大鼠肠吸收差异研究

目的对比研究川产道地药材蓬莪术醋制前后挥发油的大鼠肠吸收差异。方法通过建立大鼠在体循环肠灌流模型,设置蓬莪术醋制前挥发油组、醋制后挥发油组、醋制前挥发油+醋制前总姜黄素组及醋制后挥发油+醋制后总姜黄素组共4个组,分别计算挥发油中主要有效成分吉马酮、呋喃二烯的吸收速率常数(Ka)、吸收半衰期(t1/2)、单位时间吸收率(P)。结果醋制后蓬莪术挥发油药效成分吸收速率和程度均小于醋制前,醋制前后分别加入总姜黄素之后,蓬莪术挥发油药效成分吸收速率和程度又进一步降低。结论蓬莪术醋制后,通过延缓挥发油中成分的吸收,使血药浓度平稳,从而达到缓解蓬莪术峻猛药性,满足临床用药安全有效的目的。