甘遂炮制前后HPLC指纹图谱及主要成分含量变化研究

目的建立甘遂炮制前后(生甘遂、醋甘遂)的HPLC指纹图谱,并对大戟二烯醇进行定量分析,为甘遂质量控制及炮制提供参考。方法采用HPLC法建立生甘遂和醋甘遂的HPLC指纹图谱。通过相似度评价对甘遂炮制前后指纹图谱进行分析,并对大戟二烯醇进行含量测定。结果建立了甘遂炮制前后的HPLC指纹图谱,生甘遂和醋甘遂分别确定了14个和12个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均大于0.950。大戟二烯醇在生甘遂和醋甘遂中的质量分数分别为0.249%和0.222%。甘遂HPLC指纹图谱在炮制前后发生了显著变化,共有峰减少3个,新增加1个,大戟二烯醇的含量显著降低。结论建立的HPLC指纹图谱对甘遂及其炮制品的质量控制及整体性评价具有重要意义,能够为甘遂的炮制及药理研究提供参考。

阿胶在《伤寒杂病论》中的应用

《伤寒杂病论》中含有阿胶的方剂有黄土汤、薯蓣丸、白头翁加甘草阿胶汤、炙甘草汤、大黄甘遂汤、黄连阿胶汤、猪苓汤、鳖甲煎丸、芎归胶艾汤、胶姜汤、温经汤等11首,每方中阿胶功效并不完全相同,阿胶不仅能止血养血,还可发挥多重作用。黄土汤主治心腹内崩,方中阿胶止心腹内崩,同时补虚,兼止腰腹痛;薯蓣丸主治劳极,方中阿胶可缓解腰腹痛、四肢酸痛,且可预防出血;白头翁加甘草阿胶汤治疗产后下利虚极,方中阿胶补虚止血;炙甘草汤治疗心血不足所致心悸,方中阿胶补虚、止惊悸、养心健脾;大黄甘遂汤治疗水瘀互结证,方中阿胶补虚止血;黄连阿胶汤治疗心肾不交证,方中阿胶补虚极,止痛止血;猪苓汤利水,方中阿胶补虚、止血、育阴以助利水;鳖甲煎丸主治癥瘕,方中阿胶主治洒洒如疟状、腹痛;芎归胶艾汤治疗冲任不固证,方中阿胶止血、止痛、补虚并用;胶姜汤主治妇人陷经,方中阿胶补虚止血;温经汤主治虚寒血瘀证,方中阿胶既可止血,又兼止痛、补虚。

煨甘遂炮制的历史沿革及质量标准研究进展

目的研究煨甘遂炮制的历史沿革及质量标准研究进展。方法通过查阅有关煨甘遂文献,从历史沿革、质量标准研究两个方面对煨甘遂炮制的研究进展进行分析。结果总结了煨甘遂的历史沿革及质量标准,优化了薄层鉴别实验方法。结论整理了煨甘遂历史沿革,总结分析了煨甘遂的质量标准,为进一步系统研究煨甘遂的质量标准提供参考。

甘遂醋炙前后对脾淋巴细胞活力和腹腔巨噬细胞释放NO的量效关系比较研究

目的比较甘遂醋炙前后对脾淋巴细胞活力和腹腔巨噬细胞释放NO的量效关系,初步探讨甘遂醋炙减毒机制。方法采用MTT法分析脾淋巴细胞活力和Griess法分析大鼠腹腔巨噬细胞NO释放情况,比较甘遂生品、清炒品、醋润品和醋炙品的致炎毒性及量效关系比较。结果在9.5～4750 mg·L-1浓度范围内,甘遂生品组与阴性对照组比较,能够促进脾淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞NO的释放(P<0.01),药物作用呈现一定的量效关系;甘遂清炒组、醋润组和醋炙组与甘遂生品组比较,均能抑制脾淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞NO释放(P<0.05),其抑制顺序为醋炙品>醋润品>清炒品,且抑制作用呈现一定的量效关系。结论在9.5～4 750 mg·L-1浓度范围内,甘遂清炒品、醋润品和醋炙品均能降低甘遂的致炎毒性,且降低毒性作用呈现一定的量效关系,并提示在甘遂醋炙过程中加热和醋润两个炮制程序能够起到降低甘遂致炎毒性的协同作用,从而为探讨甘遂醋炙减毒机制提供了一定的依据。

甘遂不同炮制品中二萜类成分的变化研究

目的比较甘遂炮制前后各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯B和甘遂萜酯A含有量的变化,以期揭示上述成分与甘遂醋炙减毒作用的关联性。方法采用HPLC法测定甘遂各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯A、甘遂萜酯B,以X TerreRP C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)为固定相;流动相为甲醇(A)-水(B)二元梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长235 nm,柱温38℃。结果假白榄烷型二萜类成分甘遂萜酯A和甘遂萜酯B经炮制后均有所降低,其质量分数高低顺序为生品>清炒品>醋润品>醋炙品。结论甘遂醋炙前后甘遂萜酯A与甘遂萜酯B的含有量变化与甘遂醋炙减毒有一定的关联性。

甘草与大戟、甘遂、芫花的反药组合对大鼠离体回肠运动的影响

目的从离体回肠运动的角度,探讨中药"十八反"中甘草与大戟、甘遂、芫花存在配伍禁忌的科学依据。方法制作大鼠离体回肠模型,以回肠收缩张力为指标,观察不同浓度的甘草与大戟、甘遂、芫花的单煎液、合并液、合煎液对大鼠离体回肠运动的影响。结果甘草单煎液呈现抑制回肠收缩作用,而大戟、甘遂、芫花各单煎液则表现为不同程度促进回肠收缩作用;甘草分别与大戟、甘遂、芫花合并给药后,可减弱后者促进回肠收缩的作用;各合煎液促进回肠收缩的作用均弱于其单煎液,其中甘草-甘遂合煎液的作用弱于其合并液,而甘草-大戟合煎液与甘草-芫花合煎液强于其合并液。结论甘草与大戟、甘遂、芫花合用后能显著抑制后者促进回肠收缩作用,从该角度探讨和揭示了甘草与具有峻下逐水功效的各药物存在配伍禁忌的作用特点与机制。

甘遂中大戟二烯醇HPLC定量方法的测量不确定度评定

目的:探讨甘遂中大戟二烯醇的HPLC定量分析方法的测量不确定度的评定方法。方法:通过分析测量过程,确定并简化不确定度来源;利用HPLC法测定甘遂中大戟二烯醇的方法验证数据及样品代表性试验数据,通过统计学方法,量化不确定度分量;计算合成不确定度和扩展不确定度。结果与结论:用HPLC法测定甘遂中大戟二烯醇的扩展不确定度为12%。本文采用的评定方法可为HPLC法含量测定结果的测量不确定度评估提供参考。

大枣缓解甘遂毒性部位致炎作用的效应

目的:对大枣各分离部位拮抗甘遂致炎毒性的效应进行评价,初步确定大枣中具有解毒作用的有效部位。方法:体外培养小鼠脾淋巴细胞和大鼠腹腔巨噬细胞,分别以MTT法分析脾淋巴细胞增殖和Griess法分析大鼠腹腔巨噬细胞NO释放情况。首先观察甘遂各提取部位对脾细胞和巨噬细胞的影响,以确定毒性部位;再以确定的甘遂毒性部位评价大枣不同提取部位对该毒性部位的拮抗作用。在整体动物水平上,采用组织病理切片,观察大枣有效部位对甘遂提取物致小鼠胃肠急性损伤的影响。结果:甘遂致炎的毒性以RK-3(二萜)部位最为明显;大枣提取部位B(小分子糖和氨基酸)、D(黄酮苷)、E(三萜)对甘遂毒性部位RK-3的致炎毒性具有明显的拮抗作用;大枣有效部位对甘遂提取物致小鼠胃肠急性损伤有保护作用。结论:以细胞模型对甘遂致炎的毒性部位进行分析,进而确定了大枣拮抗甘遂致炎毒性部位的活性部位,为进一步进行大枣的减毒活性成分及作用机制研究提供了实验基础。

海藻、大戟、甘遂和芫花分别与不同剂量的甘草配伍对小鼠肠功能的影响

目的探讨海藻、大戟、甘遂和芫花分别与不同剂量的甘草配伍对肠功能的影响。方法采用均匀设计进行分组。小鼠分别ig给予海藻甘草、大戟甘草、甘遂甘草或芫花甘草合煎液1次,分别于给药后20,60,30和20min后,再ig给予5%印度墨汁混悬液0.2ml。给予墨汁20min后处死小鼠,测定小肠推进率(IPR)。结果大戟甘草合煎液组小鼠在总给药剂量0～30g·kg-1范围内且总给药剂量一定时,随甘草剂量的增加小鼠IRP降低(R=0.7853,P<0.05)。芫花甘草合煎液组总给药剂量低于5g·kg-1时,小鼠IRP未见明显变化;总给药剂量>5g·kg-1且一定时,小鼠IRP随甘草呈剂量依赖性增加(R=0.8414,P<0.05)。海藻甘草合煎液和甘遂甘草合煎液组海藻和甘遂与甘草配伍比例的变化对IRP无明显影响。结论在一定的总给药剂量范围内,大戟甘草合煎液对小鼠肠功能的影响与配伍比例密切相关,甘草剂量增加时小鼠肠功能减弱。芫花甘草合煎液对小鼠肠功能的影响也与配伍比例密切联系,甘草剂量增加时肠功能增强。

不同炮制方法对甘遂急性毒性影响的研究

目的考察不同炮制方法对甘遂的急性毒性影响。方法采用测定小鼠半数致死量的方法对甘遂生品及其各炮制品急性毒性进行研究。结果石油醚部位是甘遂的毒性部位,生品的半数致死量为36.4 g/kg;醋炙品的半数致死量为65.3 g/kg;清炒品的半数致死量为53.9 g/kg;清炒拌醋品的半数致死量为59.8 g/kg;生拌醋品的半数致死量为43.8 g/kg。结论甘遂经醋炙后毒性显著降低,加热是使甘遂炮制减毒的主要影响因素。

基于均匀设计法评价甘遂与甘草反药组合对小鼠肠功能的影响

目的研究甘遂与甘草不同配比及剂量的变化对小鼠肠功能的影响。方法采用均匀设计法,按2因素7水平以小鼠肠推进率和肠质量为指标,观察合并液和合煎液对肠功能的影响。结果对肠推进率的影响:合并液促进肠推进率,存在协同作用,总剂量低于5g/kg时,甘遂醇提物与甘草合并后各组对小鼠肠推进率未见增加;大于5g/kg各组对小鼠肠推进率的影响呈现增加趋势,随着甘遂或甘草配比增加,肠推进率作用逐渐减弱。对肠质量的影响:总给药剂量在0～30g/kg范围内,合并液与合煎液肠质量随甘遂剂量增加而增加,但未见交互作用。结论合并液1∶1对小鼠肠推进功能的影响与剂量有密切关系,合煎液对肠道平滑肌无明显影响,该与临床上甘遂以粉末入药可能存在一定的相关性。该研究为甘遂-甘草反药组合的毒效表征奠定了一定的研究基础。

生甘遂及其炮制品中2种三萜成分的含量研究

目的应用反相高效液相色谱法比较生甘遂和醋甘遂中大戟二烯醇及表大戟二烯醇的含量差异。方法样品以乙酸乙酯为提取溶剂,超声处理后,蒸干,加甲醇溶解,以HPLC法分析。采用Agilent C8色谱柱分离,柱温:30℃;以乙腈-水(95∶5)为流动相,流速:1.0mL.min-1;检测波长:210nm。结果考察了44份甘遂及其炮制品中的大戟二烯醇和表大戟二烯醇的含量情况。结论生甘遂及其炮制品醋甘遂中的三萜成分以大戟二烯醇及表大戟二烯醇为主,甘遂及醋甘遂中大戟二烯醇(Ⅰ)和表大戟二烯醇(Ⅱ)的含量消长变化有一定规律,二者之比(Ⅰ/Ⅱ)约为3∶1,可以只测定大戟二烯醇的含量来控制甘遂及其炮制品的质量。

醋炙对甘遂3种三萜类成分的影响及肠上皮细胞的毒性

目的研究甘遂醋炙前后3种三萜类成分(大戟二烯醇、kansenone、11-oxo-kansenonol)含有量变化及其对肠上皮细胞的毒性。方法采用HPLC法分别在210、255、270 nm测定甘遂和醋甘遂饮片中该3种成分的量。采用MTT法检测3种成分对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6细胞增殖的影响。结果醋炙后大戟二烯醇、kansenone、11-oxokansenonol含有量均降低,降低率分别为13.43%、15.15%、14.79%。对IEC-6细胞的IC50分别为71.41、15.27和14.53μmol/L。结论甘遂醋炙后3种三萜类成分含有量的降低与醋炙减毒有一定的相关性。

甘遂醇提物对家兔离体回肠平滑肌张力的影响

目的通过研究甘遂60%醇提取物对家兔离体回肠平滑肌张力的影响,以筛选出其中兴奋离体回肠平滑肌的有效成分。方法通过RM6240生理信号采集系统记录甘遂60%醇提取物对家兔离体回肠平滑肌张力的影响,观察其对离体回肠平滑肌的收缩效应。结果甘遂60%醇提物与正常组比较,能够显著提高家兔离体回肠平滑肌的平均舒张谷张力、平均收缩峰张力以及平均张力的变化率(P<0.05),并且对阿托品所致家兔离体回肠平滑肌张力的降低有一定的拮抗作用(P<0.05)。结论甘遂60%醇提物对家兔离体回肠平滑肌张力有一定的兴奋作用。

甘遂甘草反药组合宜忌条件的实验研究回顾与评析

利用中国知网、万方、维普、Pub Med数据库,系统检索1949年以来关于"十八反"中甘遂甘草反药组合同用的研究文献,检索文章的过程中剔除综述及临床研究类文章,选取实验研究方面的文章,总结归纳甘遂甘草反药组合配伍使用的适宜和禁忌条件。结果发现甘遂与甘草反药组合配伍的药效和毒性受配伍剂量、配伍比例、入药方式、炮制品种、给药途径、给药时间等多方面影响。初步认为低剂量(接近临床用量)及甘遂与甘草1∶15或1∶10配伍属于配伍的适宜条件。而禁忌条件是高剂量(临床用量的数十倍)及甘遂与甘草1∶1或1∶2配伍。现有的文献显示生甘遂与炙甘草配伍,两药入汤剂先分煎后合并,口服以及短时间给药为配伍适宜条件;而醋甘遂与炙甘草、醋甘遂与生甘草、生甘遂与生甘草配伍,腹腔注射以及长时间给药为配伍禁忌条件。笔者认为甘遂甘草能否同用不能一概而论,而是受到不同条件的限制。在今后的科学研究中,应增加多条件交叉、多层次深入的研究,丰富和完善甘遂甘草配伍的宜忌条件,进而对临床应用提供可参考的指导意见。

醋甘遂与炙甘草免煎颗粒配伍对CYP2E1、CYP3A4基因和蛋白表达的影响

目的:通过检测大鼠肝功能指标和肝组织CYP2E1、CYP3A4的基因、蛋白表达,初步观察醋甘遂与炙甘草配伍对肝脏的损伤以及对肝药酶2个亚型的诱导作用。方法:将大鼠按体质量随机分为正常组、炙甘草组(免煎颗粒剂)、醋甘遂组(研末)、炙甘草-醋甘遂组、甘遂半夏汤组。其中正常组给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应药液灌胃,连续给药14天。实验结束时,腹主动脉取血分离血清和血浆检测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;取肝组织一部分用福尔马林固定观察肝组织病理形态,一部分液氮冻存,采用RT-PCR和western-blot技术检测肝组织中CYP2E1、CYP3A4的基因、蛋白表达情况。结果:与正常组相比,各给药组ALT含量各组变化不明显,无统计学差异(P>0.05),AST含量甘遂组以及醋甘遂-炙甘草配伍组、甘遂半夏汤组较正常组降低,其中甘遂半夏汤组降低显著,有统计学差异(P<0.05),LDH含量各给药组均较正常组显著降低,有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,炙甘草组、醋甘遂组、醋甘遂-炙甘草组和甘遂半夏汤组CYP2E1基金和蛋白表达均有所升高,CYP3A4的基因和蛋白表达则有所下降,二者均具有统计学差异(P<0.01),其中以醋甘遂-炙甘草组升高或降低最为明显;与醋甘遂-炙甘草组比较,甘遂半夏汤组下调CYP2E1基金和蛋白表达,上调CYP3A4的基因和蛋白表达。结论:本实验从分子机制上证实了醋甘遂和炙甘草配伍有增毒效应,以复方的形式使用则能降低毒性,但在生化指标方面未表现出明显增毒作用,可能还存在其他配伍机制有待进一步研究,且需要配合病理状态的研究以确定是否有增效作用。

有毒中药甘遂醋炙工艺研究

目的优选醋甘遂最佳炮制工艺。方法以毒效部位特征峰峰面积之和及外观性状为指标,采用L9(34)正交试验,对加醋量、炒制温度、炒制时间三因素进行考察。结果优选的最佳醋炙工艺为加醋量30%,230℃炒制30min。结论该研究可为醋甘遂的炮制和饮片的质量控制提供科学依据。

不同产地甘遂和醋甘遂饮片的性状和显微鉴别比较

[目的]探索甘遂和醋甘遂饮片的快速鉴定方法。[方法]采用性状及显微鉴别的方法对不同产地甘遂和醋甘遂的饮片性状与粉末显微特征进行了比较。[结果]山西产甘遂多为细长圆柱状,且纤维性较强,陕西产多为粗短连珠状;山西产甘遂乳汁管和纤维较多,厚壁细胞壁微木化,而淀粉粒明显少于陕西产甘遂;醋甘遂饮片较生甘遂颜色深,可见焦斑;醋甘遂粉末中的木栓细胞、导管及纤维的颜色深于生品。[结论]该研究对于鉴别区分不同产地的甘遂和醋甘遂饮片具有一定的价值。

甘遂辅助治疗重症急性胰腺炎的临床观察

目的:观察中药甘遂在治疗重症急性胰腺炎(SAP)中的疗效,探讨其作用机制以及应用甘遂治疗SAP的中医学理论根据。方法:将43例患者随机分为2组,对照组予常规治疗方案,甘遂组在对照组治疗的基础上加用甘遂治疗,观察2组临床症状、实验室指标。结果:腹痛缓解时间,肠鸣音、血淀粉酶、尿淀粉酶、血白细胞计数恢复时间甘遂组与对照组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);治疗第7天2组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)浓度分别比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);2组急性呼吸窘迫综合征、胰腺及胰周脓肿、胰腺假性囊肿发生率比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01),2组休克、肾功能衰竭、胰性脑病发生率比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:应用甘遂治疗SAP有确切疗效。

生甘遂与制甘遂中的二萜类成分甘遂大戟萜酯D的含量研究

目的:建立甘遂中甘遂大戟萜酯D的含量测定方法,并比较生甘遂和醋甘遂中甘遂大戟萜酯D的含量差异。方法:样品以甲醇为提取溶剂,超声处理后,以HPLC法分析。采用菲罗门lunarC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离,柱温40℃,以乙腈-水(70:30)为流动相,流速1.0mL·min-1;检测波长235nm。结果:甘遂大戟萜酯D线性范围分别为0.216～8.64μg(r=0.9999),平均加样回收率为103.5%(n=9);44批次甘遂中,甘遂大戟萜酯D的含量为0.008%～0.036%。结论:该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于甘遂大戟萜酯D的定量分析。