琐琐葡萄多糖对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨琐琐葡萄多糖(VTP)对小鼠免疫功能的影响。方法:经热水提取、乙醇沉淀提取得到VTP,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,应用环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型,通过测定给药后小鼠脾脏及胸腺指数、抗体分泌细胞功能、血清溶血素水平和脾淋巴细胞转化功能,研究VTP对免疫低下小鼠免疫功能的影响。结果:提取得到VTP粗品并测得其中多糖含量为20.68%,RSD为1.93%;与模型组相比,VTP可增加免疫低下模型小鼠脾脏的质量,有效促进小鼠脾淋巴细胞的转化功能,明显改善小鼠抗体分泌细胞的功能,并可使红细胞半数溶血值显著增高。结论:VTP对免疫低下模型小鼠的体液免疫功能和细胞免疫功能具有一定的保护作用。

架式与新梢留量对赤霞珠葡萄酒中单体酚的影响

【目的】研究架式与新梢留量对葡萄酒中单体酚的影响。【方法】以赤霞珠为试材,采用HPLC分析法,研究不同新梢留量、单篱架与"V"形架栽培条件下所酿干红葡萄酒中单体酚的种类及含量。新梢处理设3个水平,分别为每延长1m架面留新梢10、13和16个。【结果】(1)单体酚总量随单位新梢留量的降低而增加(119.08—146.40mg·L-1),且各处理间存在极显著差异;"V"形架栽培下的葡萄酒单体酚总量(133.47mg·L-1)高于单篱架(119.08mg·L-1)。(2)各处理条件下葡萄酒中非类黄酮含量(100.13—123.46mg·L-1)均高于类黄酮含量(17.08—25.25mg·L-1),前者占单体酚总量的81.08%—85.66%,后者占14.34%—18.92%。(3)各处理条件下均可检出待测10种单体酚,类黄酮类物质以儿茶素为主,非类黄酮类物质以没食子酸为主。【结论】降低赤霞珠葡萄单位面积留梢量可提高葡萄酒中单体酚的含量;"V"形架栽培可提高葡萄酒中单体酚的含量。

琐琐葡萄多糖对大鼠体外免疫性肝损伤保护作用的研究

目的研究琐琐葡萄多糖(VVP)在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用热水提取、乙醇沉淀,Sevage法除蛋白、透析分离纯化提取VVP,苯酚硫酸法测定多糖含量。采用BCG整体致敏,LPS离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型,取细胞上清液测定其ALT,AST活性和NO含量。结果琐琐葡萄中多糖含量为8.19%;VVP 5,20,80μg/ml均可程度不同地使BCG+LPS损伤后升高的大鼠肝细胞上清ALT,AST活性和NO含量明显下降,其作用与阳性对照药物甘立欣(Grz)相似。结论VVP在体外对大鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用。

琐琐葡萄三萜类成分在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察琐琐葡萄三萜类成分总三萜(VTT)和齐墩果酸(OA)在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用,为阐明维药琐琐葡萄抗病毒作用的物质基础及其可能的作用机制提供理论依据,也为充分利用新疆葡萄的资源优势开发出安全、价廉、有效的抗病毒民族新药奠定基础。方法:Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠6只,随机分为正常组与模型组,模型组采用卡介苗(BCG)整体致敏,脂多糖(LPS)离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型,模型组肝细胞分别加入DMEM培养液配制的200μg/ml二甲基亚砜溶液(DMSO),5、10、20μg/ml联苯双酯(DDB)溶液,5、20、80μg/mlVTT溶液或OA溶液,测定并比较不同培养时间(3、6、12、24h)各组肝细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和一氧化氮(NO)的含量。结果:正常大鼠肝细胞上清ALT、AST和NO基本未见改变,BCG+LPS损伤后大鼠肝细胞上清ALT、AST和NO在6、12和24h较正常大鼠明显升高(P<0.01),而VTT和OA(5、20、80μg/ml)均可程度不同地使升高的ALT、AST和NO明显下降(P<0.01)。琐琐葡萄三萜类成分VTT和OA的以上作用与阳性对照药物DDB相似。结论:琐琐葡萄三萜类成分VTT和OA在体外对大鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用。

葡萄籽中水溶性钙结合蛋白的分离和鉴定

为了开发植物源葡萄籽补钙制剂，该研究通过亚细胞定位试验表明，葡萄籽的胚乳中含有大量的钙元素。通过电泳分析发现，葡萄籽的水溶性蛋白包括2种主要成分，其中一种是11 S球蛋白（蛋白质B），也是最主要的钙结合蛋白，另一种是表观分子量为670 kDa的蛋白质A。在蛋白质组成相同的情况下，用传统的碱溶酸沉法来分离葡萄籽蛋白会导致大量的钙流失。但用30%～50%硫酸铵沉淀法得到的蛋白质得率是（22.5＆#177;0.02）g/kg，蛋白质中钙质量分数（3.47%）是碱溶酸沉法（1.11%）的3倍。该研究结果为食品工业中矿物结合蛋白质的分离纯化提供参考。

琐琐葡萄总黄酮对小鼠免疫性肝损伤保护作用的研究

目的:应用免疫性肝损伤模型研究琐琐葡萄总黄酮(VTF)对肝脏的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法:昆明种雄性小鼠72只,随机分为正常对照组、免疫性肝损伤模型组(卡介苗+脂多糖组)、联苯双酯(DDB)阳性对照组以及VTF低、中、高剂量组共6组,测定并比较各组小鼠肝脏、脾脏系数,采用连续监测法或比测法测定并比较各组小鼠肝组织匀浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,观察各组肝脏组织病理学变化。结果:VTF各剂量组(50、150、300mg/kg)均可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏系数和脾脏系数(P<0.01),并可显著升高小鼠肝组织中ALT、AST和SOD活性,降低MDA含量(P<0.01),且SOD活性随着VTF剂量的增大而升高(P<0.01);病理组织学检查结果显示VTF各剂量组可不同程度的改善肝组织病理损伤,与生化检查结果相一致。结论:VTF对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。

琐琐葡萄多糖颗粒剂中多糖的含量测定

目的建立测定琐琐葡萄多糖颗粒剂中多糖的含量方法。方法采用苯酚-硫酸法测定。结果葡萄糖的检测浓度在20.00～100.00μg/ml范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.999 8);平均回收率为98.36%,RSD=0.85%(n=3)。结论该方法简便、准确、重现性好,可用于该制剂的质量控制。

蒙自葡萄根际土壤寄生线虫的种类初步鉴定

从2014年10月至2015年2月到蒙自市文澜落龙庄、草坝营房、草坝六村、草坝十七村等葡萄地进行实地调查,采用五点取样法,选取地上部分生长势弱、叶发黄或根部出现变褐萎蔫等症状的植株,采取其根际周围2 kg的土样,共采集28份土样。通过形态鉴定的方法,对蒙自葡萄根际土壤寄生线虫的种类进行初步鉴定,通过实验初步鉴定出葡萄寄生线虫3属4种,分别是燕麦真滑刃线虫(Aphelenchus avenae Bastian,1865)、肾状肾形线虫(Rotylenchulus reniformis Linford et Oliverira,1940)、双宫螺旋线虫[Helicotylenchus dihytera(Cobb,1893)Sher,1961]、假强壮螺旋线虫[Helicotylenchus pseudorobustus(Steiner,1914)Golden,1956]。

新疆琐琐葡萄叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性

采用分光光度法,以芦丁为标准样品,测定琐琐葡萄叶中黄酮类化合物的含量。在考察各影响因素的基础上设计正交试验,得出各种因素对提取效果的影响主次顺序为提取时间>乙醇体积分数>温度>料液比。黄酮类化合物的最佳提取工艺为50%乙醇、提取时间100min、料液比1:50、提取温度70℃,在最佳提取条件下测定黄酮提取液的还原力、抗氧化能力,总黄酮对不同自由基的抑制能力由大到小依次为DPPH自由基>.OH>O-2.。

蔗糖转运蛋白基因VvSUC12和VvSUC27在葡萄胚性和非胚性愈伤组织中的差异表达

本研究通过对霞多丽葡萄花前约10d的花丝进行组培诱导,获得胚性和非胚性两种愈伤组织,分别进行继代、组织结构观察和体细胞胚的诱导验证。为研究两种愈伤组织对培养基中主要碳源蔗糖的利用特点,根据GenBank中的定位于细胞质膜的葡萄蔗糖转运蛋白基因VvSUC12和VvSUC27的序列,设计了这两种蔗糖转运蛋白的PCR引物。以RNAplant试剂法,提取胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的RNA,进行半定量RT-PCR。研究表明,31个循环半定量RT-PCR结果中VvSUC12在胚性愈伤和非胚性愈伤中均有表达,且在非胚性愈伤组织中的表达水平稍高于胚性愈伤组织,表达差异未达到显著水平,VvSUC27的表达水平明显低于VvSUC12,且只在胚性愈伤组织中表达。提高至35个循环的半定量RT-PCR结果显示VvSUC27基因在非胚性愈伤组织中微弱表达,而在胚性愈伤组织中的表达强度较31个循环有所增加,且高于非胚性愈伤。

琐琐葡萄多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制研究

目的观察琐琐葡萄多糖(VTP)对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法昆明种雄性小鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、联苯双酯(DDB)阳性对照组以及VTP低、中、高剂量组共6组。除正常对照组外,其余各组均经尾静脉注射BCG致敏,次日起,除正常对照组和模型组给予蒸馏水外,阳性对照组灌胃给予DDB溶液200mg/kgbw,VTP低、中、高剂量组分别灌胃给予VTP溶液50、150、300mg/kgbw,连续12d。D12,除正常对照组外,其余各组均经尾静脉注射LPS,12h后采血,取肝脏、脾脏,分别测定脏器系数、生化指标、免疫指标,并观察肝脏病理组织学变化。结果VTP可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏系数和脾脏系数;并可显著升高小鼠肝组织中ALT、AST和SOD活性,降低MDA和NO含量;各组小鼠外周血中CD4+、CD8+细胞亚群比例无显著变化,但VTP可在一定程度上调节INF-γ、IL-2、IL-4和IL-10的分泌,恢复Th1/Th2细胞的平衡;病理组织学检查结果显示VTP可改善肝组织病理损伤,与生化检查结果相一致。结论VTP对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与VTP的抗氧化功能及免疫调节功能有关。

琐琐葡萄多糖对阿尔茨海默病细胞模型APP表达的影响

目的:观察琐琐葡萄多糖(polysaccharide from Vitis viniferal,VTP)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞β-淀粉样前体蛋白(beta-amyloid precursor protein,APP)基因表达的影响,探讨VTP在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病机制中的作用。方法:体外培养PC12细胞,分为对照组,AD模型组(20μmol·L-1Aβ25-35作用24 h),VTP低、中、高剂量组质量浓度分别为20,40,80 mg·L-1。VTP作用24 h后,检测细胞活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和细胞超微结构,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测APP mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组细胞活性及SOD活力降低(P<0.01),MDA含量及APP mRNA表达增高(P<0.01),细胞超微结构明显异常;与模型组比较,给药组细胞活性及SOD活力增强(P<0.05),MDA含量及APP mRNA表达下降(P<0.01),减轻神经细胞损伤。结论:VTP对Aβ25-35诱导的氧化损伤有保护作用,通过抗氧化和调节APP mRNA表达,抑制Aβ形成,保护神经细胞,起到防治AD的作用。