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The Nucleocytoplasmic Transport of Viral Proteins 被引量:2
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作者 Alan C. ZHENG 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2010年第2期79-85,共7页
Molecules can enter the nucleus by passive diffusion or active transport mechanisms, depending on their size. Small molecules up to size of 50-60 kDa or less than 10 nm in diameter can diffuse passively through the nu... Molecules can enter the nucleus by passive diffusion or active transport mechanisms, depending on their size. Small molecules up to size of 50-60 kDa or less than 10 nm in diameter can diffuse passively through the nuclear pore complex (NPC), while most proteins are transported by energy driven transport mechanisms. Active transport of viral proteins is mediated by nuclear localization signals (NLS), which were first identified in Simian Virus 40 large T antigen and had subsequently been identified in a large number of viral proteins. Usually they contain short stretches of lysine or arginine residues. These signals are recognized by the importin super-family (importin α and β) proteins that mediate the transport across the nuclear envelope through Ran-GTP. In contrast, only one class of the leucine-rich nuclear export signal (NES) on viral proteins is known at present. Chromosome region maintenance 1 (CRM1) protein mediates nuclear export of hundreds of viral proteins through the recognition of the leucine-rich NES. 展开更多
关键词 毒性蛋白 主动运输 病毒蛋白 核质 定位信号 被动扩散 核孔复合物 蛋白质
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Advances of Studies on the Viral Proteins of PRRSV
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作者 Cao Zongxi Shi Zhihai +2 位作者 Lin Zhemin Jiao Peirong Zhang Guihong 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2014年第2期80-82,90,共4页
Porcine reproductive and respiratory syndrome( PRRS) is one of viral diseases with severe reproductive obstacle of pregnant sows and respiratory tract symptoms and higher mortality of piglets as characteristics,which ... Porcine reproductive and respiratory syndrome( PRRS) is one of viral diseases with severe reproductive obstacle of pregnant sows and respiratory tract symptoms and higher mortality of piglets as characteristics,which is caused by porcine reproductive and respiratory syndrome virus( PRRSV). PRRS has brought great threats to swine industry in the world. The advances of studies on the viral proteins of PRRSV were reviewed from the genome,non-structural proteins and structural proteins of PRRSV. 展开更多
关键词 PRRSV viral genome Non-structural proteins Structural proteins
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ZIKV viral proteins and their roles in virus-host interactions 被引量:1
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作者 Moujian Guo Lixia Hui +2 位作者 Yiwen Nie Boris Tefsen Ying Wu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期709-719,共11页
The re-emergence of Zika virus(ZIKV) and its associated neonatal microcephaly and Guillain-Barré syndrome have led the World Health Organization to declare a global health emergency. Until today, many related stu... The re-emergence of Zika virus(ZIKV) and its associated neonatal microcephaly and Guillain-Barré syndrome have led the World Health Organization to declare a global health emergency. Until today, many related studies have successively reported the role of various viral proteins of ZIKVin the process of ZIKVinfection and pathogenicity. These studies have provided significant insights for the treatment and prevention of ZIKV infection. Here we review the current research advances in the functional characterization of the interactions between each ZIKV viral protein and its host factors. 展开更多
关键词 ZIKV viral protein host-virus interactions immune response PATHOGENICITY
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An improved method for identifying SUMOylation sites of viral proteins
4
作者 Yan Liu Zhongyuan Tan +6 位作者 Bo Shu Yuan Zhang Caishang Zheng Xianliang Ke Xi Chen Hanzhong Wang Zhenhua Zheng 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2017年第6期537-540,共4页
Dear Editor,In recent years,post-translational modifications(PTMs)by small ubiquitin-related modifiers(SUMOs)have emerged as an important regulatory mechanism for both cellular and viral processes(Ribet and Cossart,20... Dear Editor,In recent years,post-translational modifications(PTMs)by small ubiquitin-related modifiers(SUMOs)have emerged as an important regulatory mechanism for both cellular and viral processes(Ribet and Cossart,2010).Identifying the SUMOylation sites of the target protein 展开更多
关键词 An improved method for identifying SUMOylation sites of viral proteins FIGURE
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A new approach for B-cell epitope prediction in viral proteins 被引量:25
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作者 吴玉章 朱锡华 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1995年第9期761-767,共7页
Prediction of epitopes in viral proteins is helpful for the design of immunogenicpeptides, new generation of vaccines and diagnostic reagents. Unfortunately, there are atleast two constraints on the interpretation of ... Prediction of epitopes in viral proteins is helpful for the design of immunogenicpeptides, new generation of vaccines and diagnostic reagents. Unfortunately, there are atleast two constraints on the interpretation of the earlier predictive methods. In the firstplace, the earlier plots were based on experimental findings in general proteins, and 展开更多
关键词 EPITOPE PREDICTION viral protein ANTIGENICITY value.
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Suppression of Breast Cancer Proliferation and Induction of Apoptosis via AKT and ERK1/2 Signal Transduction Pathways by Synthetic Polypeptide Derived from Viral Macrophage Inflammatory Protein Ⅱ 被引量:4
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作者 杨清玲 陈昌杰 +2 位作者 杨志峰 高艳军 唐洁 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2011年第4期497-503,共7页
SDF-1α,a ligand for the chemokine receptor CXCR4,is well known for mediating the migration of breast cancer cells.In a previous study we demonstrated that a synthetic 21-mer peptide antagonist of CXCR4(NT21MP) deri... SDF-1α,a ligand for the chemokine receptor CXCR4,is well known for mediating the migration of breast cancer cells.In a previous study we demonstrated that a synthetic 21-mer peptide antagonist of CXCR4(NT21MP) derived from the viral macrophage inflammatory protein Ⅱ could antagonize tumor growth in vivo by inhibiting cellular proliferation and inducing apoptosis in breast cancer cells.However,the role of SDF-1α in the signaling pathways underlying the proliferation of human breast cancer cells and associated signaling pathways and inhibiting signal pathways of NT21MP remained unclear.The present study investigated the mechanism of NT21MP on anti-tumor in breast cancer in vitro.The effect of NT21MP on the viability of cells was determined by the MTT assay.Annexin V-FITC and PI staining was performed to detect early stage apoptosisin SKBR3 cells treated with SDF-1α and AMD3100 or NT21MP.Western blotting techniques were used to assay the composition of phosphoproteomics and total proteins present in the SKBR3 breast cancer cells.RT-PCR and Western blotting technique were used to detect the effect of NT21MP and AMD3100 on Bcl-2 and Bax expression.The results indicated that SDF-1α prevented apoptosis and promoted the proliferation of SKBR3 human breast cancer cells.As compared with untreated SKBR3 cells,Treatment with SDF-1α significantly increased cell viability,and NT21MP abolished the protective effects of SDF-1α dose-dependently(P0.05).There was a significant decrease in the percentage of apoptotic cells after SDF-1α treatment as compared with control group(2.7%±0.2% vs.5.7%±0.4%,P0.05).But pretreatment of SKBR3 cells with NT21MP significantly attenuated the antiapoptotic effects of SDF-1α as compared with SKBR3 cells without NT21MP pretreatment.The proliferative and anti-apoptotic effects of SDF-1α in SKBR3 cells were associated with an increase in AKT and ERK1/2 phosphorylation as well as a decrease in Bax expression and an increase in Bcl-2 expression.These changes in intracellular processes were blocked by NT21MP in a dose-dependent manner(P0.05).In conclusion,NT21MP efficiently inhibits SDF-1α-induced proliferation and antiapoptosis in SKBR3 cells by reducing the levels of phosphorylated AKT and ERK1/2,as well as decreasing the ratio of expression of Bcl-2 relative to Bax. 展开更多
关键词 viral macrophage inflammatory protein CXCR4 PROLIFERATION APOPTOSIS AKT
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Roles of HIV-1 auxiliary proteins in viral pathogenesis and host-pathogen interactions 被引量:5
7
作者 Lin LI Hai Shan LI +2 位作者 C. David PAUZA Michael BUKRINSKY Richard Y ZHAO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第11期923-934,共12页
Active host-pathogen interactions take place during infection of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1). Outcomes of these interactions determine the efficiency of viral infection and subsequent disease progressi... Active host-pathogen interactions take place during infection of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1). Outcomes of these interactions determine the efficiency of viral infection and subsequent disease progression. HIV- infected cells respond to viral invasion with various defensive strategies such as innate, cellular and humoral immune antiviral mechanisms. On the other hand, the virus has also developed various offensive tactics to suppress these host cellular responses. Among many of the viral offensive strategies, HIV-1 viral auxiliary proteins (Tat, Rev, Nef, Vif, Vpr and Vpu) play important roles in the host-pathogen interaction and thus have significant impacts on the outcome of HIV infection. One of the best examples is the interaction of Vif with a host cytidine deaminase APOBEC3G. Although specific roles of other auxiliary proteins are not as well described as Vif-APOBEC3G interaction, it is the goal of this brief review to summarize some of the preliminary findings with the hope to stimulate further discussion and investiga- tion in this exhilarating area of research. 展开更多
关键词 爱滋病病毒-1 辅助蛋白 病毒感染 中国 病原体
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Phylogeography,Transmission,and Viral Proteins of Nipah Virus 被引量:7
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作者 Bangyao Sun Lijia Jia +2 位作者 Bilin Liang Quanjiao Chen Di Liu 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2018年第5期385-393,共9页
Nipah virus (NiV), a zoonotic paramyxovirus belonging to the genus Henipavirus, is classified as a Biosafety Level-4 pathogen based on its high pathogenicity in humans and the lack of available vaccines or therapeutic... Nipah virus (NiV), a zoonotic paramyxovirus belonging to the genus Henipavirus, is classified as a Biosafety Level-4 pathogen based on its high pathogenicity in humans and the lack of available vaccines or therapeutics. Since its initial emergence in 1998 in Malaysia, this virus has become a great threat to domestic animals and humans. Sporadic outbreaks and person-to-person transmission over the past two decades have resulted in hundreds of human fatalities. Epidemiological surveys have shown that NiV is distributed in Asia, Africa, and the South Pacific Ocean, and is transmitted by its natural reservoir, Pteropid bats. Numerous efforts have been made to analyze viral protein function and structure to develop feasible strategies for drug design. Increasing surveillance and preventative measures for the viral infectious disease are urgently needed. 展开更多
关键词 Nipah VIRUS viral TRANSMISSION GEOGRAPHICAL distribution protein structure
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牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的真核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 刘丹 黄小洁 +5 位作者 吴华伟 孙淼 陈延飞 秦义娴 侯力丹 薛麒 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期51-56,共6页
为建立检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白,将纯化后的E2蛋白作为包被抗原,用方阵滴定方法对影响ELISA的各个因素进行优化,并进行特异性、敏感性和重... 为建立检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白,将纯化后的E2蛋白作为包被抗原,用方阵滴定方法对影响ELISA的各个因素进行优化,并进行特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,在昆虫细胞中表达了BVDV E2蛋白,Western blot证实目的蛋白可与BVDV阳性血清发生特异性反应。ELISA优化结果显示,E2蛋白最佳包被浓度为0.5μg/mL,最佳封闭液为1%明胶,最佳血清稀释度为1∶400,最佳血清作用方式为37℃作用30 min,酶标抗体的最佳作用方式为1∶2000稀释、37℃作用30 min,最佳底物作用时间为室温20 min,阳性临界值为OD 450≥0.423。与血清中和试验法进行比较,总符合率为97.8%,板内和板间重复性试验的变异系数均小于10%。该方法与牛常见病毒阳性血清均无交叉反应。说明建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性和重复性良好,可用于大批量样本的临床检测和流行病学研究。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 间接ELISA 抗体检测
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猪细小病毒病研究进展
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作者 刘运超 陈玉梅 +3 位作者 杨苏珍 魏蔷 郝慧芳 柴书军 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期107-110,共4页
猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎... 猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎和公猪的精液质量下降。临床采用接种疫苗的方式进行防控,起到了一定的效果。论文对病毒的基因组和蛋白特征、流行病学和疫苗研究进行综述,以期为PPV的基础研究和疫苗开发提供参考。 展开更多
关键词 猪细小病毒 VLP组装 病毒抗原表位 VP2蛋白
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Intracellular Transport of HIV-1 Matrix Protein Associated with Viral RNA
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作者 Anatoliy I. Gozhenko Valentina A. Divocha +2 位作者 Galina K. Vorkunova Alissa G. Bukrinskaya Sergey I. Lupandin 《World Journal of AIDS》 2013年第1期33-35,共3页
HIV-1 matrix protein (MA) is a multifunctional structural protein localized on N terminus of Gag precursor p55. MA participates in HIV-1 assembly as membranotropic part of Gag precursor as well as an individual protei... HIV-1 matrix protein (MA) is a multifunctional structural protein localized on N terminus of Gag precursor p55. MA participates in HIV-1 assembly as membranotropic part of Gag precursor as well as an individual protein spliced from Gag early in infection. MA is found in the nuclei of infected cells and in plasma membrane, the site of virus assembly, in association with viral genome RNA. MA mutated variant M4 which contains two changed amino acids in N-terminal regions is also associated with viral RNA, but it is localized in the nuclear and cytoskeleton fractions but not in the plasma membrane suggesting that the mutant is deprived of membranotropic signal and “sticks” in the nuclei an d cytoskeleton, its previous location sites. These data allow suggesting that MA involved into transmission of viral RNA is transported to plasma membrane by cytoskeleton. 展开更多
关键词 HIV-1 Matrix protein GAG PRECURSOR P55 CYTOSKELETON viral RNA Transport of viral Complex Plasma Membranes Cell Fractionatiomn
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非洲猪瘟病毒增殖过程中主要蛋白研究进展
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作者 赵旭阳 樊帅 +7 位作者 靳家鑫 张帅 路闻龙 朱潇静 王芮 张改平 孙爱军 庄国庆 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期228-236,共9页
非洲猪瘟病毒(ASFV)感染猪引起的非洲猪瘟(ASF),是一种急性、烈性、高度接触性传染病,给世界养猪业带来巨大经济损失。ASFV编码超过150种蛋白,广泛参与病毒的进入、复制和形态发生等过程。ASFV主要通过网格蛋白介导的胞吞作用进入宿主细... 非洲猪瘟病毒(ASFV)感染猪引起的非洲猪瘟(ASF),是一种急性、烈性、高度接触性传染病,给世界养猪业带来巨大经济损失。ASFV编码超过150种蛋白,广泛参与病毒的进入、复制和形态发生等过程。ASFV主要通过网格蛋白介导的胞吞作用进入宿主细胞,在细胞质中核周微管组织中心(MTOC)处的“病毒工厂”中完成复制和装配,并通过微管转运至细胞膜,以“出芽”的方式释放到细胞外。本文重点分析了参与病毒进入、复制、组装和释放过程的关键蛋白功能,初步探讨其潜在研究价值,为进一步的ASF疫苗和药物靶点研发提供支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 非洲猪瘟病毒 增殖过程 病毒蛋白 疫苗
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病毒性脑炎患儿脑脊液IP-10、MCP-1检测的临床意义
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作者 张娜 李静 +2 位作者 闫晓静 张岚 刘伟霄 《检验医学》 CAS 2024年第5期454-457,共4页
目的探讨病毒性脑炎患儿脑脊液干扰素诱导蛋白-10(IP-10)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)检测的临床意义。方法选取2019年7月—2020年12月邢台市人民医院病毒性脑炎患儿60例(病毒性脑炎组),其中轻症26例、重症34例,以排除颅内感染的发热患... 目的探讨病毒性脑炎患儿脑脊液干扰素诱导蛋白-10(IP-10)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)检测的临床意义。方法选取2019年7月—2020年12月邢台市人民医院病毒性脑炎患儿60例(病毒性脑炎组),其中轻症26例、重症34例,以排除颅内感染的发热患儿40例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测脑脊液IP-10、MCP-1和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用Pearson相关分析评估IP-10、MCP-1水平与TNF-α水平的相关性。结果病毒性脑炎组脑脊液IP-10、MCP-1和TNF-α水平均显著高于对照组(P<0.001)。重症组脑脊液IP-10、MCP-1和TNF-α水平均显著高于轻症组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,病毒性脑炎组脑脊液IP-10、MCP-1水平与TNF-α水平均呈正相关(r值分别为0.742、0.696,P<0.05)。结论IP-10和MCP-1与儿童病毒性脑炎的病情严重程度有关,可作为病情监测指标。 展开更多
关键词 干扰素诱导蛋白-10 单核细胞趋化蛋白-1 病毒性脑炎 儿童
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黄芪多糖通过减轻免疫炎症抑制病毒性肝炎小鼠肝损伤
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作者 陈辰 胡丽霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期556-563,共8页
目的:观察黄芪多糖对病毒性肝炎小鼠肝损伤的影响,并探讨其是否能通过调控核苷酸结合寡聚化结构域1(NOD1)/受体相互作用蛋白2(RIP2)/核转录因子-κB(NF-κB)通路介导的免疫炎症发挥肝保护作用。方法:将60只雌性C3H/HeJ小鼠,采用随机数... 目的:观察黄芪多糖对病毒性肝炎小鼠肝损伤的影响,并探讨其是否能通过调控核苷酸结合寡聚化结构域1(NOD1)/受体相互作用蛋白2(RIP2)/核转录因子-κB(NF-κB)通路介导的免疫炎症发挥肝保护作用。方法:将60只雌性C3H/HeJ小鼠,采用随机数字表法分为建模组(50只)和正常组(10只)。建模组采用3型鼠肝炎病毒(MHV-3)腹腔注射建立病毒性肝炎小鼠模型,并于确定建模成功后将存活小鼠采用随机数字表法分为胸腺肽组(10μg)、黄芪多糖低、中、高剂量组(腹腔注射100、200、400 mg/kg黄芪多糖冻干溶于1 ml/100 g体质量的生理盐水)、模型组。模型组和正常组予以等量生理盐水腹腔注射,各组均每天给药1次,连续1个月。结果:经肝组织苏木素-伊红(HE)染色和病毒空斑数检测证实建模成功;与正常组比较,模型组小鼠肝脏指数,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-8水平,肝组织病毒空斑数,肝组织NOD1、RIP2、NF-κB p65表达与p-NF-κB p65水平均升高(P<0.05),肝组织呈严重病理改变;与模型组小鼠比较,胸腺肽组和黄芪多糖各剂量组肝脏指数,血清ALT、AST、TBIL、TNF-α、IL-1β、IL-8水平,肝组织病毒空斑数,肝组织NOD1、RIP2、NF-κB p65表达与p-NF-κB p65水平均下降(P<0.05),肝组织病理改变均减轻,且黄芪多糖的作用呈剂量依赖性,胸腺肽组与黄芪多糖中剂量组比较上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芪多糖可改善病毒性肝炎小鼠的肝功能,减轻炎症反应和肝组织病理改变,降低病毒水平,推测与抑制NOD1/RIP2/NF-κB通路,下调NOD1、RIP2、NF-κB p65 mRNA与蛋白表达,抑制NF-κB p65磷酸化有关,且高剂量的黄芪多糖效果最佳,并优于胸腺肽-α1。 展开更多
关键词 黄芪多糖 核苷酸结合寡聚化结构域1 受体相互作用蛋白2 核转录因子-ΚB 免疫炎症 病毒性肝炎 肝损伤
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SYNPO2蛋白在狂犬病病毒复制过程中的功能初探
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作者 王姝捷 谢鑫 +4 位作者 张曦 陈明 雷桃红 邓俊杰 许运斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期154-160,共7页
目的探明SYNPO2蛋白对狂犬病病毒复制的影响。方法通过免疫印迹分析病毒感染后SYNPO2蛋白的差异表达情况;构建SYNPO2基因真核表达载体和shRNA干扰载体,转染SK-N-SH细胞后进行病毒感染,免疫印迹分析过表达或干扰SYNPO2对病毒蛋白表达的影... 目的探明SYNPO2蛋白对狂犬病病毒复制的影响。方法通过免疫印迹分析病毒感染后SYNPO2蛋白的差异表达情况;构建SYNPO2基因真核表达载体和shRNA干扰载体,转染SK-N-SH细胞后进行病毒感染,免疫印迹分析过表达或干扰SYNPO2对病毒蛋白表达的影响,荧光定量PCR分析过表达或干扰SYNPO2对病毒基因组复制和转录水平的影响,病毒滴度测定分析过表达或干扰SYNPO2对感染性病毒粒子释放能力的影响;SYNPO2真核表达载体转染SK-N-SH细胞后进行病毒感染,或与构建成功的病毒M基因真核表达载体共转染SK-N-SH细胞,间接免疫荧光实验结合激光共聚焦拍照技术分析SYNPO2与M蛋白在病毒感染或真核表达细胞中的亚细胞定位情况。结果狂犬病病毒感染可诱导SYNPO2蛋白的下调表达;SYNPO2过表达可促进病毒M蛋白表达,但未影响病毒基因组的复制、转录及感染性病毒粒子释放的能力;干扰SYNPO2则在未影响病毒基因组复制和转录的情况下显著抑制了病毒M蛋白的表达和感染性病毒粒子的释放;进一步经共定位分析发现SYNPO2与病毒M蛋白存在明显共定位现象。结论确定了SYNPO2蛋白对狂犬病病毒复制起着正向调控作用,为挖掘狂犬病治疗潜在的药物靶标奠定基础数据。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 病毒复制 SYNPO2蛋白 病毒M蛋白
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BVDV非结构蛋白NS4B的结构分析及其蛋白表达与鉴定
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作者 柳凯月 董亚尊 +6 位作者 吴双双 马一瑄 刘鸿雁 王北艳 于立权 宋佰芬 马金柱 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第1期69-76,共8页
NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基... NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基酸组成、疏水性和空间结构。根据Genebank上公布的BVDVns4b基因序列设计引物,利用PCR方法获得ns4b基因片段,连接到p3×Flag-CMV10表达载体上,构建重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,经双酶切与测序鉴定正确后,将p3×FlagCMV10-ns4b转染到HEK-293T细胞中,利用Western blot检测NS4B蛋白的表达。结果表明BVDV NS4B蛋白分子量为38.4 kDa,不存在信号肽,有49个磷酸化位点和6个糖基化位点,是一种主要由α-螺旋和无规则卷曲结构组成的疏水性稳定蛋白。成功构建了重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,并且p3×Flag-CMV10-ns4b在HEK-293T细胞中成功表达,为今后研究NS4B蛋白在BVDV感染宿主细胞及其免疫逃逸机制奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 ns4b基因 载体构建 蛋白表达
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草鱼miR-1260对鱼淋巴囊肿病毒中国株复制的调控作用
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作者 马嘉霖 战盈瑾 +3 位作者 周杰 黄鉴涛 闫秀英 简纪常 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期25-33,共9页
【目的】鉴定草鱼(Ctenopharyngodon idella)miR-1260(cid-miR-1260),分析cid-miR-1260在鱼淋巴囊肿病毒中国株(Lymphocystis disease virus China,LCDV-cn)感染草鱼卵巢细胞系(Grass carp ovary cells,GCO)过程中的时序表达特性,揭示ci... 【目的】鉴定草鱼(Ctenopharyngodon idella)miR-1260(cid-miR-1260),分析cid-miR-1260在鱼淋巴囊肿病毒中国株(Lymphocystis disease virus China,LCDV-cn)感染草鱼卵巢细胞系(Grass carp ovary cells,GCO)过程中的时序表达特性,揭示cid-miR-1260对其靶基因znf574和LCDV-cn复制的调控作用。【方法】制备LCDV-cn感染的GCO细胞,通过茎环RT-PCR和测序鉴定cid-miR-1260;采用定量PCR检测cid-miR-1260在LCDV-cn感染GCO过程中的时序表达;应用生物信息学方法预测cid-miR-1260的靶基因,并用双荧光素酶报告基因系统验证靶基因;通过转染cid-miR-1260 mimic和cid-miR-1260 inhibitor使cid-miR-1260过表达和抑制表达,并用定量PCR检测cid-miR-1260、靶基因znf574、LCDV-cn mcp基因的表达;应用Reed-Muench法测定LCDV-cn在GCO细胞中的滴度。【结果】cid-miR-1260与其他已知miR-1260仅有一个碱基差异,且cid-miR-1260在LCDV-cn感染GCO过程中呈先上升后下降的表达变化,72 h时表达量最高(P<0.05);生物信息学分析表明,znf574为cid-miR-1260的靶基因;重组质粒pmirGLO-znf574-WT与cid-miR-1260 mimic共转染后,荧光素酶活性显著降低(P<0.05),证实znf574为cid-miR-1260的靶基因;cid-miR-1260过表达后,靶基因znf574的表达显著下降(P<0.05),LCDV-cn mcp的表达和LCDV-cn在GCO细胞中的滴度显著上升(P<0.05);抑制cid-miR-1260表达后,靶基因znf574的表达量显著上升(P<0.05),LCDV-cn mcp的表达量和LCDV-cn在GCO细胞中的滴度显著下降(P<0.05)。【结论】LCDV-cn感染GCO细胞后,cid-miR-1260的表达显著上调;在LCDV-cn感染中,cid-miR-1260对其靶基因znf574的表达起负调控作用,且cid-miR-1260表达与LCDV-cn的复制呈正相关,起促LCDV-cn感染作用,而锌指蛋白ZNF574具有抗LCDV-cn作用。本研究为淋巴囊肿病的防治提供新的依据和思路。 展开更多
关键词 鱼淋巴囊肿病毒中国株 草鱼卵巢细胞系 cid-miR-1260 锌指蛋白基因znf574 病毒复制
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血清淀粉样蛋白A在病毒性肺炎的严重程度及预后中的应用价值
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作者 熊雪芳 钟莹 孙德彬 《温州医科大学学报》 CAS 2024年第3期199-204,共6页
目的:探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)在病毒性肺炎的严重程度分级及重症组患者预后评估中的临床应用价值。方法:选取2022年12至2023年6月丽水市中心医院收治的250例病毒性肺炎住院患者,将患者分为非重症和重症两组,比较两组之间SAA、CRP、降... 目的:探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)在病毒性肺炎的严重程度分级及重症组患者预后评估中的临床应用价值。方法:选取2022年12至2023年6月丽水市中心医院收治的250例病毒性肺炎住院患者,将患者分为非重症和重症两组,比较两组之间SAA、CRP、降钙素原(PCT)水平,以及白细胞总数、中性粒细胞比例的差异,利用ROC曲线评估各项指标在识别重症患者中的价值。根据生存结局将重症患者分为生存组与非生存组,比较两组之间五项指标水平的差异,利用ROC曲线评估有差异的指标在重症患者中的预后价值。结果:重症组患者SAA、CRP、PCT水平,以及白细胞总数、中性粒细胞比例均显著高于非重症组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析发现SAA的AUC为0.869,截断值为226.05 mg/L,敏感度和特异度分别为94.1%、63.7%,对重症病毒性肺炎患者的识别效能最优。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥88.5岁、SAA≥226.05 mg/L、中心粒细胞比例≥88.75%是重症病毒性肺炎发生的危险因素。非生存组患者SAA、PCT水平显著高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析发现SAA的AUC为0.576,截断值为639.35 mg/L,敏感度和特异度分别为82.1%、43.7%。结论:SAA水平在鉴别病毒性肺炎非重症与重症的效能较CRP、PCT、白细胞总数、中性粒细胞比例更优,可作为一种辅助评估病毒性肺炎严重程度的敏感指标,在评估重症患者的预后中也有一定的应用价值。 展开更多
关键词 血清淀粉样蛋白A 病毒性肺炎 C-反应蛋白 降钙素原
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细胞外基质蛋白ABI3BP抗水疱性口炎病毒初步作用研究
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作者 孟祥博 陈美桦 +5 位作者 许诺 李天琪 李帅臣 周孙欣 陈欢 张彤 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2024年第1期1-8,I0001,共9页
目的探讨细胞外基质蛋白ABI3BP对水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)基因组复制和先天免疫信号通路的影响。方法在人皮肤成纤维细胞BJ-5ta中转染小干扰RNA(siRNA)敲低ABI3BP基因,建立ABI3BP基因缺失的VSV-GFP病毒感染细胞... 目的探讨细胞外基质蛋白ABI3BP对水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)基因组复制和先天免疫信号通路的影响。方法在人皮肤成纤维细胞BJ-5ta中转染小干扰RNA(siRNA)敲低ABI3BP基因,建立ABI3BP基因缺失的VSV-GFP病毒感染细胞模型。通过鬼笔环肽细胞免疫荧光实验,检测敲低ABI3BP后细胞内肌动蛋白(F-actin)形态结构的变化。在ABI3BP基因缺失的VSV-GFP病毒感染细胞模型上,利用RT-qPCR方法检测细胞中病毒mRNA水平的变化。利用免疫印迹法(Western blotting)检测IRF3和TBK1磷酸化水平的变化。结果成功建立敲减ABI3BP基因的VSV-GFP感染的细胞模型。鬼笔环肽细胞免疫荧光染色表明,敲减ABI3BP基因后,细胞内F-actin的表达发生结构重排。采用不同剂量的病毒感染细胞,与对照组相比,ABI3BP敲低细胞中基因拷贝数分别增加2.5~3.5倍(P<0.01)和2.2~4倍(P<0.01),VSV-GFP病毒蛋白表达水平显著上调;在ABI3BP基因敲低的细胞模型上,VSV-GFP病毒感染导致Ⅰ型干扰素免疫通路关键免疫分子p-IRF3和p-TBK1蛋白磷酸化水平明显下调。结论本研究表明细胞外基质蛋白ABI3BP对维持细胞内F-actin纤维网状结构具有重要作用。ABI3BP缺失促进RNA病毒的复制,ABI3BP是I型干扰素通路激活的重要调控分子。 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白 肌动蛋白 水疱性口炎病毒 病毒复制
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高迁移率族蛋白B1在临床相关疾病中的作用研究进展
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作者 曾雨竹(综述) 吴一凡 +3 位作者 孟林红 伍行 丁文文(审校) 屈小芹 《现代医药卫生》 2024年第10期1759-1762,1767,共5页
高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是由巨噬细胞释放的一种具有晚期促炎作用的核蛋白。近年来,HMGB1作为一种新型炎症因子,国内外学者均对其进行了广泛研究,发现其在许多疾病中均充当炎症介质,发挥细胞因子活性,从而参与机体损伤。该文主要对HMGB... 高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是由巨噬细胞释放的一种具有晚期促炎作用的核蛋白。近年来,HMGB1作为一种新型炎症因子,国内外学者均对其进行了广泛研究,发现其在许多疾病中均充当炎症介质,发挥细胞因子活性,从而参与机体损伤。该文主要对HMGB1在心血管系统、肾脏、肝脏及胰腺等相关疾病中的损伤作用,以及其可能的机制进行了综述,以便为临床诊断和研究相关疾病提供依据。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 高血压 病毒性肝炎 急性胰腺炎 综述
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