新的Virginiamycin诱导因子的分离和结构的测点

链霉菌属所具有的特点之一是在它们的细胞分化期能分泌多种次级代谢物，如抗生素、酶抑制剂、免疫佐剂和有生理活性的物质，而它们中最有趣的发现是存在一种能调节次级代谢和细胞分化的单分子物质，即称之为自动调节因子（或诱导因子）。其中研究最早的是Ａ－因子，它能在极低浓度下使原先失去产抗生素和长气生菌丝的突变株恢复产链霉素和长气生菌丝的能力。除此之外，还有Ｇｒａｆｅ因子、Ｂ－因子，ＩＭ－２因子等。近来由Ｙａｒｎａｄａ等人从Ｓ，ｖｉｒｇｉｎｉａｅ分离得到能诱导Ｖｉｒｇｉｎｉａｍｙｃｉｎ产生的一系列因子，即ｙｉｒｇｉｎｉａｅｂｕｔａｎｏｌｉｄｅＡ，Ｂ，Ｖ，Ｄ和Ｅ（简称ＶＢ－Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ），而ＶＢ－Ａ２从另一株链霉茵Ｓ．ａｎｔｉｂｌｏｔｉｃｕｓ中分离获得。本研究的目的则是从Ｓ．ａｎｔｉｂｌｏｔｉｃｕｓ中寻找同样诱导ｙｉｒｇｉｎｌａｍｙｃｉｎ的新诱导因子，实验结果证实，在Ｓ．ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｕｓＮＴ－１８菌株的发酵液中存在除ＶＢ类因子以外的ｙｉｒｇｉｎｉａｍｙｃｉｎ诱导因子，它们所具有的１０元环结构使之完全不同于ＶＢ类所含有５元环结构，但诱导效应一致，它们已被命名为ＮＦＸ－１，２，３和４，但只有ＮＦＸ－２和ＮＦＸ－４的?

动物组织中粘杆菌素、杆菌肽及维吉尼霉素残留量的液相色谱-串联质谱检测

建立了动物组织（肌肉、肝脏、肾脏）中粘杆菌素、杆菌肽和维吉尼霉素等多肽类抗生素残留量的检测方法。样品经甲醇-0.1%甲酸提取,Oasis HLB固相萃取柱净化后,利用液相色谱-串联质谱进行定性、定量分析。3种多肽类抗生素的检出限分别为粘杆菌素25μg/kg,杆菌肽50μg/kg,维吉尼霉素20μg/kg;平均回收率分别为粘杆菌素89%～98%,杆菌肽90%～99%,维吉尼霉素92%～100%;相对标准偏差为1.91%～9.81%。方法具有快速简便、准确度和灵敏度高、重复性好等特点,适于动物组织中多肽类抗生素的测定。方法的技术指标满足国内外对多肽类抗生素残留量检测的要求。

乳酸菌和酵母菌复合制剂对肉仔鸡生长性能、屠宰性能和肠道健康的影响

本试验旨在研究乳酸菌和酵母菌复合制剂(LS)及其与维吉尼亚霉素(VM)联用对爱拔益加(AA)肉仔鸡生长性能、屠宰性能和肠道健康的影响。选取1日龄健康AA肉鸡公雏400只,据体重相近原则分为4组,每组5个重复,每重复20只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加30 mg/kg VM(VM组)、15 mg/kg VM+1 000 mg/kg LS(VM+LS组)和1 000 mg/kg LS(LS组)的试验饲粮。试验期42 d。结果表明:1)VM、VM+LS和LS组的42日龄肉仔鸡体重显著高于对照组(P<0.05);VM+LS和LS组的22~42和1~42日龄肉仔鸡平均日增重和料重比显著优于对照组(P<0.05)。2)VM+LS组的42日龄胸肌率和全净膛率显著高于对照组(P<0.05)。3)与对照组相比,LS组21日龄空肠黏膜形态显著改善(P<0.05),十二指肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度值显著提高(P<0.05);VM+LS和LS组42日龄十二指肠和空肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度值显著提高(P<0.05)。4)VM+LS和LS组的42日龄盲肠大肠杆菌数量和大肠杆菌/乳酸杆菌值显著低于对照组(P<0.05)。综上,LS及其与VM联合使用均能改善肠道健康,促进肉仔鸡生长。

抗生素对肉鸡生长、屠宰性能和肉品质的影响

试验研究饲粮中添加维吉尼亚霉素、恩拉霉素或黄霉素对肉鸡生长性能、屠宰性能及肌肉品质的影响。试验采用完全随机设计,将216只1日龄AA肉仔鸡随机分为6个处理,每个处理6个重复,每重复6只鸡（公、母各半）。基础饲粮为无抗生素对照组,其余处理在基础饲粮中分别添加维吉尼亚霉素（5、10、20mg/kg）、恩拉霉素（1-21日龄5mg/kg,22-42日龄3mg/kg）或黄霉素（5mg/kg）。与无抗生素对照组相比,添加维吉尼亚霉素和恩拉霉素显著提高11-21日龄平均日增重（ADG）及22-42日龄平均日采食量（ADFI）和ADG（P〈0.10）。添加黄霉素可显著提高22-42日龄ADG（P〈0.10）。黄霉素组胸肌滴水损失显著降于维吉尼亚霉素组（P〈0.10）。维吉尼亚霉素、恩拉霉素对屠宰性能和肌肉品质均无显著影响（P〉0.10）。结果表明：饲粮中添加维吉尼亚霉素、黄霉素和恩拉霉素均可改善肉仔鸡的生长性能,对其屠宰性能均无影响;维吉尼亚霉素和恩拉霉素对肉鸡肌肉品质无显著影响,而黄霉素可降低鸡胸肌滴水损失。

高效液相色谱法测定鸡组织中维吉尼亚霉素M1的残留

鸡组织样品经甲醇- 0.2 mol/L NH4H2PO4溶液提取,正己烷洗涤,C18固相萃取柱净化后,采用高效液相色谱法测定了鸡组织中维吉尼亚霉素M1的残留量.色谱条件为二极管矩阵检测器检测;波长为245 nm;色谱柱为ODS-3C18柱(4.6 mm×250.0 mm,5.0 μm);流动相为乙腈∶水=37.5∶62.5(体积比).该方法对肌肉、肝脏和肾脏等不同鸡组织中3种维吉尼亚霉素M1浓度进行回收测定.结果表明:该方法回收率达74.5%～91.1%;批内、批间变异系数均在10%以内;最低检测限为10 ng/g.

液相色谱-串联质谱法检测畜禽产品中维吉尼亚霉素M1和S1残留

建立了畜禽产品中维吉尼亚霉素M1和S1药物残留检测的液相色谱-串联质谱分析方法。样品以甲醇-乙腈溶液(1∶1,v/v)提取,上清液经0.01 mol/L磷酸二氢铵溶液稀释后,Oasis HLB固相萃取小柱净化,Luna C18色谱柱分离,以乙腈和含0.1%(体积分数)甲酸的5 mmol/L乙酸铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式电离(ESI+),多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。该方法对两物质线性范围均为0.15～10.0μg/L,相关系数r2均大于0.999;定量下限均为0.25μg/kg。在不同基质中,0.25、0.50、2.5μg/kg 3个添加水平的平均回收率范围为71.2%～98.4%,精密度范围为3.6%～15.4%。该方法具有快速简便、灵敏度高、准确性强等特点,适用于畜禽产品中维吉尼亚霉素的检测。

液相色谱串联质谱法快速测定牛奶与鸡蛋中的维吉霉素M_1残留量

建立了牛奶和鸡蛋样品中维吉霉素M1残留的液质联用确证方法。用乙腈萃取样品中的维吉霉素M1残留，水稀释后，正己烷脱脂，以YMC—Pack Pro C18色谱柱为分离柱，在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱仪进行测定。方法的线性范围为2．5～25μg/L，定量下限为50μg／kg。在50、100、200μg/kg 3个浓度水平进行加标回收实验，回收率为72％～99％，相对标准偏差为2．7％～6．1％。该方法简便、快速、准确，各项技术指标满足国内外法规的要求，可用于牛奶和鸡蛋样品中维吉霉素M1残留的快速确证检测。

高效液相色谱法测定饲料中的维吉尼亚霉素M_1含量

研究并建立了饲料中维吉尼亚霉素M1含量的高效液相色谱测定方法。样品用甲醇提取,用水稀释,经C18固相萃取柱净化,在235nm波长下用二极管矩阵检测器检测。色谱柱:AgilentZORBAXSBC18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈∶水=40∶60(体积比)。维吉尼亚霉素M1质量分数在1.0～20.0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,回收率为91.5%～94.6%,变异系数为1.7%～3.6%。

日粮中添加维基尼亚霉素对肉牛瘤胃微生物数量的影响

选用4头体重为559.4±30.1kg,健康且装有瘤胃瘘管的4岁龄杂交肉牛,进行重复交叉试验设计,处理组添加维吉尼亚霉素,旨在观察日粮中添加维基尼亚霉素对瘤胃微生物数量的影响。在每个正试验期第28天的饲喂前8:00和饲喂后12:00、16:00采集瘤胃液进行亨氏滚管法培养计数。试验发现日粮中添加维基尼亚霉素能有效抑制调节瘤胃微生物中淀粉降解菌数量和蛋白降解菌数量(P<0.01),但对纤维降解菌、总细菌和原虫的数量影响不显著。维吉尼亚霉素在不同采样时间点抑制调节瘤胃微生物数量的统计结果显示,维吉尼亚霉素在8:00时,能有效抑制调节淀粉降解菌数量(P<0.05),在12:00时,能有效抑制淀粉降解菌数量和蛋白降解菌数量(P<0.05)。维吉尼亚霉素在不同时间点对纤维降解菌、总细菌和原虫的数量影响不显著。但对照组和处理组中,原虫数量和总细菌数量随时间均呈现出"高-低-高"的趋势。结果表明,向日粮中添加维吉尼亚霉素能有效调节高精料条件下占主导地位的淀粉降解菌和蛋白降解菌的数量,从而缓解瘤胃酸中毒。

高效液相色谱法测定猪组织中维吉尼亚霉素M_1的残留

建立了猪组织中维吉尼亚霉素M1残留的高效液相色谱测定方法。样品用甲醇-0.2mol/LNH4H2PO4溶液提取,正己烷洗涤,经C18固相萃取柱净化后做HPLC分析。选用二极管矩阵检测器,波长245nm;色谱柱为ODS 3C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(37.5∶62.5,V/V)。维吉尼亚霉素M1标准曲线线性范围在0.1～2.0μg/mL。对不同组织的3种加药浓度进行回收率测定,回收率在72%～85%,变异系数在10%以内。最低检测限为10ng/g。

液相色谱三级四极杆质谱法快速测定动物组织中维吉霉素M_1残留量

建立了鸡肉、鸡肝、鸡肾、猪肾和牛肾样品中维吉霉素M1残留的液质联用确证方法。用乙腈萃取样品中维吉霉素M1残留,然后用水稀释和正己烷脱脂后,进样分析。采用YMC-PackProC18色谱柱进行分离,在正离子模式下采用电喷雾电离串联质谱仪进行测定。方法的定量限分别为:鸡肉25μg/kg、鸡肝100μg/kg、鸡肾100μg/kg、猪肾150μg/kg、牛肾100μg/kg。方法的回收率为:鸡肉86.8%-108%,鸡肝81.8%-109%,鸡肾85.5%-102%,猪肾82.7%-102%,牛肾80.7%-103%;室内相对标准偏差为:鸡肉4.3%-6.7%,鸡肝3.3%-7.3%,鸡肾2.8%-4.6%,猪肾1.9%-4.1%,牛肾3.4%-6.9%。该方法简便、快速、准确,各项技术指标满足国内外法规的要求,可用于动物组织样品中维吉霉素M1残留量的快速确证检测。

HPLC-MS/MS法测定水产品中硫酸粘菌素、杆菌肽及维吉尼霉素M_1的残留量

建立了水产品中硫酸粘菌素(CS)、杆菌肽(BTC)及维吉尼霉素M1(VBGMM1)3种多肽类抗生素残留量检测的HPLC-MS/MS法。样品经水溶液[V(甲醇)∶V(0.1%甲酸水溶液)=2∶5]提取,4%三氯乙酸乙腈除蛋白,乙腈饱和正己烷除脂,过OASIS HLB(60 mg)小柱净化后,利用HPLC-MS/MS法,以选择反应监测模式检测,外标法进行定量分析。CS和BTC在0.01～10.00 mg.L-1质量浓度范围内线性良好,VGMM1在0.002～2.000 mg.L-1质量浓度范围内线性良好,R2均大于0.995;3种多肽类抗生素的检出限分别为CS 10μg.kg-1、BTC 10μg.kg-1、VGMM12μg.kg-1,定量限分别为20μg.kg-1、20μg.kg-1和4μg.kg-1;选择3个不同浓度水平做加标回收,平均回收率在72.3%～103.9%,相对标准偏差为1.10%～10.92%。该方法具有操作简便、准确性高、灵敏度高和重现性好等优点,可为检测水产品中这3种药物的残留提供相关技术支持。

动物源性食品中多肽类抗生素残留检测技术研究进展

多肽类抗生素作为抗菌药物,常用于畜禽疾病的防治,但往往因使用不当会在动物体内产生残留,对人体健康造成严重危害。综述了近年来动物源性食品中多肽类抗生素残留量检测技术的研究进展情况。

日粮添加维吉尼亚霉素对肉牛瘤胃发酵及粪便pH的影响

选取4头带有永久性瘤胃瘘管的肉牛,采用3×3拉丁方试验设计,研究了给精粗比例为60∶40的日粮添加维吉尼亚霉素和碳酸氢钠对瘤胃发酵及粪便pH的影响。试验处理分别为:维吉尼亚霉素组(30 mg/kg精料)、碳酸氢钠组(20 g/kg精料)和对照组。结果显示,维吉尼亚霉素组、碳酸氢钠组和对照组的瘤胃液pH分别为6.44、6.46和6.38(0.05<P<0.10);维吉尼亚霉素组的氨氮浓度显著高于碳酸氢钠组和对照组(P<0.05);与对照组相比,日粮添加维吉尼亚霉素有提高瘤胃液中总挥发酸和乙酸浓度的趋势,并导致丁酸浓度和乙酸丙酸比例显著提高(P<0.05),碳酸氢钠对挥发酸没有显著影响;与对照组相比,日粮添加维吉尼亚霉素和碳酸氢钠均显著提高了粪便pH,但维吉尼亚霉素的作用效果更显著(P<0.01);与对照组相比,日粮添加维吉尼亚霉素和碳酸氢钠有提高血清葡萄糖浓度的趋势。

日粮中添加维基尼亚霉素对肉牛瘤胃发酵参数及微生物数量的影响

试验旨在研究日粮中添加维吉尼亚霉素对瘤胃发酵参数及瘤胃微生物的影响,为阐述维吉尼亚霉素通过调节瘤胃微生物数量进而改变瘤胃发酵参数奠定基础。试验选用4头装有瘤胃瘘管的肉牛(559.4 kg±30.1 kg)进行重复交叉试验设计,维吉尼亚霉素添加量为30 mg/kg精料(干物质基础)。结果发现,维吉尼亚霉素对淀粉降解菌和蛋白降解菌有抑制作用(P<0.01);维吉尼亚霉素能提高瘤胃pH(P<0.05)和瘤胃氨氮的利用程度(P<0.01);维吉尼亚霉素对L-乳酸产生有抑制作用,但差异不显著(P=0.304)。维吉尼亚霉素对总挥发性脂肪酸的影响不大(P=0.864)。因此,认为维吉尼亚霉素通过对淀粉降解菌和蛋白降解菌的选择性抑制,使得L-乳酸含量出现差别,进而改变瘤胃pH。

柽柳内生链霉菌CLR304抗MRSA次级代谢产物304A的研究

目的 从沙生植物柽柳来源的内生链霉菌CLR304发酵液中分离鉴定具有强抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）活性的次级代谢产物。方法 基于16S rRNA基因序列,对菌株CLR304进行初步分类鉴定;采用液体发酵、溶剂萃取、正相硅胶层析、薄层层析以及高效液相制备分离纯化CLR304的活性次级代谢产物304A;根据紫外光谱、高分辨质谱和核磁共振波谱及文献比对,鉴定化合物304A的平面结构;采用琼脂稀释法测定化合物的抗菌活性。结果 菌株CLR304为链霉菌,从其发酵液中分离获得抗MRSA次级代谢产物304A,证明为维吉尼霉素M_1。抑菌活性实验显示其对葡萄球菌、屎肠球菌的敏感株和耐药株均具有较强活性（MIC=1~4μg/ml）。结论 首次从柽柳中获得产生维吉尼霉素M_1的内生链霉菌,表明沙生植物柽柳蕴含药用放线菌资源。

应用虚拟筛选方法寻找链阳霉素A乙酰转移酶抑制剂(英文)

维吉尼亚霉素乙酰转移酶D(VatD)通过灭活链阳霉素A而在链阳霉素耐药性的产生中起重要作用。本研究采用虚拟筛选技术寻找VatD的抑制剂,此VatD抑制剂可以和链阳霉素联合使用,从而提供新的治疗耐药菌感染的方法。作者首次应用基于结构的虚拟筛选方法(分子对接)从含300000化合物的商业化数据库中筛选对抗VatD底物结合位点的化合物,从200个评分最高的化合物中选取26个测定对VatD酶活性的抑制作用。将构建的质粒pRSETB/vatD转染宿主细胞E.coli(TrxB)用于过表达,纯化的VatD对维吉尼亚霉素M1表现乙酰转移酶活性。26个化合物中有3个对VatD表现抑制作用,IC50分别为168.6,91.0和55.2μmol.L-1。其他化合物在反应体系中不溶解和/或对酶活性的抑制作用很小(IC50>200μmol.L-1)。本文首次设计VatD的小分子化合物抑制剂,发现了3个有活性的化合物,希望其可作为先导化合物进一步发展为新的对抗链阳霉素耐药性的药物。

维吉霉素类抗生素新化合物X-435-C的产生菌X-435的初步分类鉴定

菌株 X- 435是从我国土壤中分离得到的一株维吉霉素 (virginiamycin)类抗生素产生菌 ,它与已经报道的维吉霉素类抗生素的产生菌相比较 ,在气丝的颜色、孢子链的形状和孢子的表面形态等方面比较接近于菌株 S.graminofaciens(IFO134 5 5 )和 S.pristinaespiralis(IFO130 74)。因此 ,进一步对这三株菌进行r DNA同源性分析 ,结果表明 :菌株 X- 435与 IFO130 74、IFO134 5 5两株菌不属于同一个种群 ,因此认为 ,菌株X- 435是一株不同于已知的维吉霉素类抗生素产生菌的菌株 ,可能是一个新种。

食品中维吉尼霉素残留检测方法研究进展

维吉尼霉素是一种环状多肽类抗生素,常用于猪、鸡等畜禽疾病的预防和治疗,并能有效提高饲料利用率和动物生长速率。但食品中抗生素的残留会引起细菌、动物与人之间产生交叉耐药性,欧盟从1999年开始禁止将包括维吉尼霉素在内的抗生素作为饲料添加剂,抗生素在动物性食品中的残留普遍受到各国的高度重视。本文主要综述样品前处理技术和维吉尼霉素检测方法,对比分析各检测方法的优缺点,同时也对检测方法的发展进行展望,以期为我国对维吉尼霉素残留的检测和监管研究提供参考。

维基尼亚霉素对肉牛瘤胃乳酸杆菌数量和L-乳酸浓度的影响

本试验应用Real-timePCR和L-乳酸试剂盒分析了维吉尼亚霉素对瘤胃乳酸杆菌数量和L-乳酸浓度的影响。试验结果显示:试验组与对照组中乳酸杆菌数量和L-乳酸浓度差异不显著,但试验组乳酸杆菌数量和L-乳酸浓度明显低于对照组;这说明维吉尼亚霉素对乳酸杆菌数量和L-乳酸浓度具有一定程度的抑制作用。这种作用可能是通过维吉尼亚霉素抑制乳酸杆菌数量变化而间接地抑制L-乳酸浓度增加。