冬虫夏草及其近缘品中铅、镉、砷污染评价及人体健康累积风险评估方法探索

目的:对冬虫夏草及其近缘品中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)的残留量进行测定,探索符合冬虫夏草及相关产品使用特点的污染评价及人体健康风险评估方法。方法:基于冬虫夏草及其近缘品中Pb、Cd、As的残留量监测数据,综合运用单因子污染指数法、尼梅罗综合指数法、金属污染指数法对冬虫夏草及其近缘品进行重金属污染评价,计算重金属日暴露量,分别采用危害指数法和更加精确的靶器官毒性剂量法对Pb、Cd、As联合暴露产生的健康风险进行累积风险评估。结果:污染评价结果说明,冬虫夏草及其近缘品中As的污染应引起关注,不同品种污染程度为冬虫夏草(繁育品)=蛹虫草<冬虫夏草(野生品)<香棒虫草<亚香棒虫草;人体健康风险评估结果表明,对于心血管和神经系统,1批冬虫夏草(野生品)全草中Pb、Cd、As联合暴露产生的累积健康风险需被进一步关注。结论:冬虫夏草及其近缘品重金属污染评价,以及人体健康风险评估方法,可为中药安全性评价及相关限量标准的制修订提供参考。

复合零假设下的修正Berk-Jones检验

首先给出带估计参数的上界型和积分型两种修正Berk-Jones拟合优度检验统计量,接着在复合零假设下研究了这两种检验统计量的渐近分布.所得结论可以为进一步讨论非参数似然比拟合优度检验提供较好的理论基础.

修正Berk-Jones检验统计量在零假设下的极限分布

讨论上界型修正Berk-Jones(RBJ)拟合优度检验统计量在简单零假设下的极限分布后,给出一种新的积分型RBJ检验统计量,并研究这种统计量在简单零假设下的极限分布,然后对这两种RBJ型检验与其他常用检验的功效进行模拟比较。模拟结果显示,两种RBJ型检验在我们所作的大多数模拟情况下不比常用的拟合优度检验差。

Makowski—Berkes不等式的变形

本世纪六十年代初,A.Makowski和J.Berkes给出了不等式 （（ak+bk+ck）/3）1/k≤31/2R,（1）对每个三角形成立的充要条件; k≤ln9-ln4/ln4-ln3.（2） 当k】0时,我们将（1）等价变形: ak+bk+ck/3≤(31/2abc/4△)k,（3）

钩藤炭疽病生物学特性研究

钩藤是常绿藤本,属茜草科药用植物,具有很高的药用价值。文章就剑河钩藤较为严重的炭疽病进行病原菌分离,并对其中分离出的葡萄座腔菌进行生物学特性研究。通过病叶接种、分离纯化、病原菌鉴定、葡萄座腔菌的生物学特性研究,得出最适合萄座腔菌的生长环境,即温度在30℃左右,喜光,偏酸性,pH在5左右,最适碳源为果糖、最适氮源为蛋白胨和酵母浸粉,以为钩藤炭疽病的绿色防控提供理论支撑。

银耳皂角米果冻的配方优化

银耳和皂角米都是具有营养与保健功能的食品。以银耳、皂角米、蔗糖等为主要原料,添加卡拉胶、魔芋胶等辅料制作银耳皂角米果冻。采用单因素试验及Box-behnken方法进行相关研究分析,得到最优配方如下:银耳添加量19.06%,皂角米添加量6.53%,复配胶为卡拉胶、魔芋胶(卡拉胶、魔芋胶=2∶2)添加量为0.41%,柠檬酸添加量1%(配成10%的溶液),蔗糖添加量12%,银耳皂角米果冻色泽均匀、表面光滑、弹性良好、酸甜适宜,具有银耳皂角米的独特风味。

葡萄霜霉菌糖基水解酶基因的表达模式与功能分析

【目的】克隆葡萄霜霉菌(Plasmopara viticola)糖基水解酶(glycosyl hydrolase,GH)基因(PvGH),分析其特征以及在葡萄霜霉菌侵染葡萄叶片过程中的表达模式,研究其抑制/促进烟草叶片程序性细胞死亡(PCD)以及影响烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)侵染的能力,为深入探究调控寄主植物免疫的机制提供理论依据。【方法】以葡萄霜霉菌Pv5-27菌株作为试材,采用RT-PCR方法扩增获得8个PvGH基因全长,并对其基因及编码蛋白进行生物信息学分析;利用酵母信号肽诱捕系统(SST)验证PvGH的分泌活性;利用实时荧光定量PCR技术检测葡萄霜霉菌侵染葡萄叶片过程中PvGH的表达模式;同时利用农杆菌介导的PVX病毒表达系统在本氏烟上瞬时表达PvGH效应蛋白,分析其对INF1和BAX触发的烟草PCD的抑制能力以及促进烟草疫霉侵染的能力。【结果】8个PvGH基因序列与通过全基因组预测的序列完全一致,长度为1 092—1 392 bp,分别编码364—464个氨基酸,与其他卵菌同源蛋白相似性高达60.62%—86.36%。8个PvGH均不含跨膜结构域,其二级结构差异较大,三级结构与其他蛋白三级结构相似性较低,呈现非常独特的三级结构。使用SingalP 5.0软件对编码的蛋白进行信号肽预测,发现它们均含有20—26 aa的信号肽,但通过SST验证结果显示PvG09279和PvG13517并不具有分泌特性。保留、缺失或者替换信号肽的8个PvGH均可抑制BAX触发的本氏烟PCD,并促进烟草疫霉的侵染,表明PvGH效应蛋白发挥其毒力不依赖于信号肽。PvGH在葡萄霜霉菌侵染初期表达上调,进一步表明其在病原菌与寄主互作中的重要作用。【结论】在侵染寄主过程中,葡萄霜霉菌分泌的PvGH通过抑制寄主PTI反应参与致病过程。

一种特殊虫草与冬虫夏草的表型和DNA条形码特征比较分析及鉴别方法研究

目的:通过对子座和虫体部分进行表型与DNA条形码序列分析,探讨一种发现于四川的特殊冬虫夏草(以下简称特殊虫草)与常见冬虫夏草的区别。方法:体视显微镜观察虫草样品的外部特征;聚合酶链式反应(PCR)扩增得到真菌部位内转录间隔区(ITS)序列和宿主蝙蝠蛾昆虫的细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)序列;利用CodonCode Aligner和MEGA软件进行序列分析,建立邻接(NJ)系统进化树;对ITS序列进行限制性内切酶图谱分析,寻找具有鉴别意义的酶切位点,并通过PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)鉴别进行验证。结果:特殊虫草与常见冬虫夏草相比,虫体头部的颜色明显不同;子座真菌的ITS序列存在7个差异位点,虫体COⅠ序列存在56个差异位点,基于ITS序列及COⅠ序列的NJ系统进化树分析均显示,两者不能聚为一支;在两者差异区域,冬虫夏草存在1个XhoⅠ的酶切位点,因此其ITS序列的PCR产物可被限制性内切酶XhoⅠ切割为2个片段,特殊虫草不能被XhoⅠ切割,所以酶切前后的PCR产物在琼脂糖凝胶图上没有变化,通过该方法可对两者进行鉴别。结论:发现了一种特殊虫草,其与常见冬虫夏草的真菌子座和宿主蝙蝠蛾昆虫部分均有明显不同,并为鉴别两者提供了有效方法。

云南省葡萄霜霉病菌群体遗传结构的SSR分析

为明确云南特色葡萄产区葡萄霜霉病菌的群体遗传结构,本研究采用7对SSR分子标记对采自云南3个地区的155株葡萄霜霉病菌进行了群体遗传多样性研究,并分析了病原菌群体遗传结构与地域之间的关系。7对引物共检测出41个等位基因,114种基因型,病原菌群体的Shannon’s信息指数和Nei’s无偏基因多样性指数分别为0.942和0.600。分子方差分析和群体连锁不平衡分析显示,不同群体间存在相当大的遗传变异。遗传分化系数、基因流以及Structure分析表明,元谋群体与宾川、寻甸两群体之间均具有较高的基因交流,宾川和寻甸两群体间则存在一定的遗传分化。上述结果表明,云南葡萄霜霉病菌群体存在较高水平的遗传多样性,且群体遗传结构与地理距离之间存在一定相关性。

中国4省份葡萄霜霉病菌群体对烯酰吗啉的抗性及适合度

为明确我国山西、山东、河北和云南省葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性以及田间病菌群体的适合度,本研究采用Taqman-MGB技术检测了2020年-2021年采自上述4省份292株葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性频率;采用叶盘法测定了田间抗性菌株与敏感菌株的适合度。结果表明,上述4个地区的平均烯酰吗啉抗性频率及抗性等位基因频率分别为64.0%和74.7%,其中山东省蓬莱区最高(91.2%和96.3%),河北省廊坊市(73.8%和85.0%)和云南省宾川县(75.0%和82.6%)次之,山西省清徐县(16.7%和34.7%)最低。适合度分析发现,田间抗性菌株的产孢能力明显高于敏感菌株,但二者的复合适合度指数无显著差异。上述结果表明,4省份霜霉病菌群体均对烯酰吗啉产生了不同程度的抗性,田间抗性菌株与敏感菌株相比无明显适合度变化。

基于高通量测序的人工培殖冬虫夏草僵虫颜色变化转录组分析

目的:探索人工培殖冬虫夏草Cordyceps sinensis(BerK.)Sacc.外观品质形成的分子基础。方法:以重庆和康定人工培殖冬虫夏草僵虫为材料,利用Illumina Hiseq 2500高通量测序技术进行转录组测序分析,基于差异倍数(FC)和错误发现率(FDR)筛选差异表达基因,具体筛选条件为|log2FC|>1、FDR<0.05。结果:共获得21942个转录本,利用DEGSeq筛选获得1575个差异表达基因,其中上调表达基因626个、下调表达基因949个;基因本体(GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析结果显示,这些差异表达基因主要集中于氨基酸代谢、折叠-分选-降解、糖代谢、转运和分解代谢、辅酶因子和微生物代谢等途径;筛选到66个颜色变化差异表达基因,包含46个氧化还原酶活性相关基因、12个过氧化物酶体相关基因、3个单加氧酶活性调节相关基因、3个黑化反应相关基因、2个活性氧代谢相关基因,其中tyr1、TYR基因可能是冬虫夏草僵虫颜色变化的关键功能基因。结论:利用高通量测序技术和生物信息分析获得了人工培殖冬虫夏草僵虫转录组信息特征,为阐明人工培殖冬虫夏草僵虫颜色变化的调控机制研究提供参考。

青海省冬虫夏草蕴藏量及产地适宜性区划分析系统的设计与实现

目的:预测青海省冬虫夏草产区资源蕴藏量和产地适宜性区划分析,设计“青海省冬虫夏草蕴藏量及产地适宜性区划分析系统”。方法:基于地理信息技术的组件式开发方式,以最大信息熵模型和青海省冬虫夏草蕴藏量的核心算法搭建C/S架构分析系统。结果:形成了以冬虫夏草采样点的空间分布和密度数据为依据,以生态环境因子库为基础,能够对冬虫夏草进行多维度、定量化、空间化分析的“青海省冬虫夏草蕴藏量及产地适宜性区划分析系统”。结论:建立的分析系统可预测青海省冬虫夏草的资源蕴藏量,并对青海省冬虫夏草进行产地适宜性区划分析。

冬虫夏草与虫草菌丝体的研究进展与前景

冬虫夏草属麦角菌科虫草属真菌类,是冬虫夏草菌寄生于蝙蝠蛾幼虫体内而产生的子座及其寄主幼虫尸体的复合物。天然冬虫夏草味甘性平,甘平质润,作用平和,补益肾肺,其功效缓和、滋而不腻,具有很好的益补作用。本文就冬虫夏草生长特性、产生过程、其寄主蝙蝠蛾、冬虫夏草无性型、冬虫夏草的主要化学成分及药理作用、人工培育与发酵等进行阐述,探讨用低成本高药效性的虫草菌丝发酵产物替代昂贵的天然冬虫夏草的可行性,以期为研发工作提供参考。

32.5%苯甲·嘧菌酯悬浮剂对莓茶拟茎点霉溃疡病的防效与安全性

为了获得防治莓茶溃疡病的安全、有效药剂,开展了防治莓茶拟茎点霉溃疡病的田间药效试验。结果表明:32.5%苯甲·嘧菌酯悬浮剂(湖南产)2000、1500和1000倍液(处理1、2和3)对莓茶拟茎点霉溃疡病防治效果良好、持效期较长,防效明显高于其单剂40%苯醚甲环唑悬浮剂3200倍液(处理4)和250 g/L嘧菌酯悬浮剂1250倍液(处理5),且对莓茶安全,其中张家界永定区三家馆村试验点处理1、2和3末次药后7和14 d的防效分别达74.72%~81.66%和69.31%~77.78%,均显著高于处理4和处理5,以处理3的防效最好;张家界永顺县向家村试验点处理1、2和3末次药后7和14 d的防效分别达76.07%~82.58%和72.55%~79.61%,均显著高于处理4和处理5,以处理3的防效最好;恩施州利川市柏杨坝镇试验点处理1、2和3末次药后7和14d的防效分别为74.2%~81.6%和71.9%~78.7%,以处理3最高。

宁夏贺兰山东麓不同葡萄品种对霜霉病的抗性鉴定

为了给葡萄抗性品种的选育和葡萄霜霉病的防治提供科学依据,对16个不同酿酒葡萄品种和19个鲜食葡萄品种的抗病性进行了抗性测定。结果表明,室内回接与田间调查结果一致,16个酿酒葡萄品种可划分为4类;19个鲜食葡萄品种可划分为4类;从发病时间来看,抗性与发病时间存在一定相关性,抗性越强发病越晚。随即将测定结果采用DPS软件进行聚类分析,在酿酒葡萄抗性反应谱系图上,第1类为抗性稍强品种,为白比诺、灰比诺和赛美蓉;第2类为抗性中等品种,由白长相思和神索等8个品种组成;第3类是稍感病品种,包括赤霞珠等4个品种;第4类是感病品种,只有品丽珠1个。在鲜食葡萄谱系图上,第1类为六月紫等7个抗性稍强品种;第2类是新华1号和巨峰;第3类是稍感品种,由奥古斯特等6个品种组成;第4类为力扎马特等4个感病品种。

葡萄霜霉病田间调查及防治效果试验

葡萄霜霉病是中国葡萄产区的重要病害之一,为了该病害的防治,2012年笔者调查了北京地区30个不同葡萄品种霜霉病的田间发生情况,并对病情指数进行了差异显著性和聚类分析。结果发现:30个葡萄品种被划分为4类:第1类包括‘甲斐乙女’、87-1、‘京早晶’、‘黑奥林’、‘红富士’、‘奥迪亚无核’和‘红伊豆’,田间发病程度最重,病情指数为61.63～49.96;第2类包括‘茉莉’、‘贵妃玫瑰’、‘秋黑’、‘亚都蜜’、‘龙宝’、‘美人指’和‘红宝石无核’,发病程度较重,病情指数为44.91～28.56;第3类包括‘红双味’‘、玫瑰香’‘、里扎马特’‘、无核早红’‘、世纪无核’‘、亚历山大’和‘黄意大利’,发病程度中等,病情指数为23.86～12.64;第4类包括‘葡萄园皇后’、‘巨峰’、‘香妃’、‘魏可’、‘醉金香’、‘藤捻’、‘红脸无核’、‘夏黑’和‘黎明无核’,发病最轻,病情指数为10.47～3.78。调查结果一定程度上反映了这些品种在生产上对霜霉病的抗性,为抗病品种的利用提供了参考依据。另外,试验还在田间进行了6种农药对霜霉病防治效果的比较,结果发现它们对葡萄霜霉病均有较好的防治效果。其中,代森锰锌、波尔多液和百菌清效果最好,可达87.23%～76.48%,它们可作为田间防治霜霉病的推荐药剂。

辽宁葡萄霜霉病流行动态及防控对策

以葡萄霜霉病[Plasmopara viticola(Berk et Curt.)Burl.&de Toni]为监测对象,对辽宁省5个葡萄主栽地区的霜霉病流行情况进行了系统监测。结果表明,葡萄霜霉病的发生逐年加重,其中2016年该病害成灾严重。针对葡萄霜霉病流行特点,结合病害监测情况,分析了未来葡萄霜霉病的发生趋势和防控对策,为该病的流行预测及防治决策提供借鉴参考。

香蕉炭疽病菌不同菌株的特性比较

对采自海南、广东、广西及云南4省(区)的27株香蕉炭疽病菌[Colletotrichum musae(Berk.&Curt.)Arx]进行了致病性、培养性状、生物学特性及对多菌灵敏感性等方面的比较研究。结果表明,不同菌株的致病性,培养性状包括菌落形态、产孢量及孢子大小对多菌灵的敏感性等均存在很大差异,但相互间无相关性,也与采集地无关,不同菌株的生物学特性变化虽然有一定的差异,但变化规律基本一致,该菌最适的培养温度为28～30℃,最适pH为5～7,最适的碳源为香蕉果皮提取物,最适氮源为营养肉汤、牛肉浸膏、酵母浸膏、蛋白胨,12h光暗交替培养对菌丝体生长最有利。

古尼虫草多糖提取分离及初步分析

本文用30%乙醇溶液作提取剂,从古尼虫草菌丝体中提取多糖,提取液经去脂、去蛋白、醇析后得两种粗多糖CPS-50,CPS-70。利用DEAE-Sephadex A-25柱色谱对两种粗多糖进行分离纯化,得纯多糖CPS-1,CPS-2。苯酚-硫酸法测定糖含量,紫外光谱分析证明其纯度,红外光谱显示其具有多糖类的特征吸收峰。多糖降解后经薄层分析表明,降解的虫草多糖由葡萄糖或(和)甘露糖组成。

银耳碱提多糖抗氧化活性的研究

目的对从银耳孢子发酵物中用碱液提取得到的4个多糖组份的抗氧化活性进行研究。方法采用清除羟基自由基实验、清除超氧阴离子自由基实验、抗H2O2诱导的红细胞氧化溶血实验考察4个多糖组份的抗氧化活性。结果在H2O2引起的红细胞溶血试验中,以蒸馏水溶血率为100%,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D溶血率分别为21.4%、31.2%、28.5%、25.6%;在对超氧阴离子自由基(O2.)的清除作用实验中,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D最大清除率分别为21.4%、28.4%、36.6%、53.0%;在清除羟基自由基实验中,TFFB-A、TFFB-B、TFFB-C、TFFB-D的EC50分别为233.6mg/L、603mg/L、191mg/L、195mg/L。结论4个多糖组分均具有一定的清除.OH、O2.和抑制红细胞溶血的活性。