体外培育牛黄的基础和临床研究进展

牛黄是我国传统名贵中药材,药用历史已超过两千年。但是,牛黄产量低,价格昂贵。体外培育牛黄是天然牛黄的理想代用品,其性状、成分、临床疗效等方面与天然牛黄几乎相同。研究体外培育牛黄的基础和临床研究有助于更好的运用,挖掘其临床价值。通过分析结果显示,体外培育牛黄对人体的消化系统、中枢神经系统、免疫系统、内分泌系统等多个系统的疾病具有作用,新的研究发现其可以调控胆汁酸,有助于在临床上精准调控牛黄的用药剂量,治疗肝胆疾病。体外培育牛黄还具有抗肿瘤、抗衰老的作用,可以为治疗癌症、延长人的寿命领域提供重要的研究内容和参考价值,临床应用价值大。由于纳入的研究较少,今后还需要更多的文献进一步验证体外培育牛黄的价值。

CLMS观察iRoot BP Plus对根尖倒充填封闭效果的体外研究

目的:观察iRoot BP Plus作为根尖倒充填材料封闭根尖的效果。方法:选取上下颌单直根管离体牙60颗,Reciproc blue机用单支镍钛锉预备根管,热牙胶连续波技术充填根管,超声工作尖对离体牙根尖区行倒预备。将离体牙随机分为三组,分别以iRoot BP Plus、MTA、3MZ350树脂行倒充填。体式激光共聚焦扫描显微镜观察倒充填后材料及牙体组织的颜色变化率。上述标本再次随机分为两个亚组,分别浸泡于2%亚甲基蓝溶液和1 g/L罗丹明B荧光染料中,48 h后分别在光学显微镜、扫描电镜和激光共聚焦显微镜下测量染料线性渗漏长度;测量材料与牙本质间的微间隙宽度,观察不同倒充填材料与根管壁间的微观结合形态;计算分析根尖区微渗漏荧光染色面积。通过定性和定量的方法研究不同倒充填材料对根尖封闭性能的影响。结果:iRoot BP Plus组倒充填后未发生明显颜色改变,美观性优于MTA组(P<0.05),但与树脂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。iRoot BP Plus组染料渗漏长度较MTA组短(P<0.05),和MTA组染料渗漏长度比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组微间隙宽度比较,iRoot BP Plus组<MTA组<树脂组(P<0.05)。三组微渗漏荧光染色面积比较,iRoot BP Plus组<MTA组<树脂组(P<0.05)。结论:iRoot BP Plus具有良好的根尖封闭性、密合性和美观性。

前沿科研成果融入药剂学实验教学——木犀草素可溶性微针的制备

为打破原有实验教学的壁垒,本文将科研前沿与药剂学实验相结合,开展实验创新改革,以提高学生的创新能力与动手能力。首先,采用模具法制备木犀草素可溶性微针,然后对其显微形态、皮肤穿刺性能、载药量及体外透皮性能进行考察。本实验可以锻炼学生制备可溶性微针的能力和创新能力,并掌握高效液相色谱仪等仪器设备的使用,认识微针的微观结构,拓宽学生的科研视野,提升科学素养。

口腔显微镜辅助种植体表面去污的体外研究

目的探讨体外采用口腔显微镜辅助种植体表面去污的效果。方法收集因重度种植体周围炎而脱落的12颗离体种植体,按照“刮治、超声、钛刷、喷砂”的流程,分别在裸眼(1倍)、8倍、12.8倍显微镜放大倍数下对植体表面进行去污,测量去污后植体表面螺纹尖端、上方、凹陷区和下方4个位置残留物的位点数及大小;根据螺纹间距和螺纹不同部位对去污效果做进一步分析。结果1)显微镜8倍、12.8倍组植体表面残留物评分均低于裸眼(P<0.0001),12.8倍组的评分低于8倍组(P<0.001);2)宽、窄螺纹间距之间残留物评分无差别(P>0.05),8倍和12.8倍组的残留物评分均低于裸眼组(P<0.001);3)螺纹尖端污染物位点数最少,螺纹下方残留污染物最多,差异有统计学意义(P<0.001),但螺纹宽度对不同部位残留的污染物位点数没有影响(P>0.05);4)8倍、12.8倍组在螺纹尖端、上方、凹陷区和下方四个位置的残留物评分均低于裸眼组(P<0.05)。结论借助口腔显微镜可更为有效去除污染植体表面的残留物,去污后污染物的残留主要集中在植体螺纹下方,植体螺纹宽度对污染物的残留无显著的影响。

禽蛋蛋清体外模拟消化液的营养与抗氧化性差异分析

禽蛋作为重要的营养和功能性食物来源,其消化产物的营养与功能的差异尚未见系统研究。本试验对4种禽蛋蛋清(鸡蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋和鸭蛋)进行体外模拟消化,并对消化液的营养(小分子肽和氨基酸)和抗氧化性进行评价。结果表明:经胃肠模拟消化后,禽蛋蛋清均被显著降解,水解度变化范围6.23%~28.42%,其中,鸡蛋蛋清的消化程度最高(28.42±1.03)%,其次是鸽蛋(22.11±0.51)%和鹌鹑蛋(21.93±0.84)%,最低的是鸭蛋(6.23±0.71)%。SDS-PAGE测定结果显示,除了鸭蛋,其它禽蛋中主要蛋白质均被降解为游离氨基酸和小分子肽。在4种禽蛋消化液中,总游离氨基酸含量7.94~21.28 g/100 g,必需氨基酸占比范围3.83~9.60 g/100 g,1 ku的寡肽占比13.3%~14.9%。鸽蛋必需氨基酸、精氨酸和脯氨酸和<1 ku的寡肽含量均在4种禽蛋中最高,分别为9.60,2.0,3.58 g/100 g和14.9%,表明鸽蛋可能具有某些特定的功能特性。4种禽蛋胃肠模拟消化液均具有抗氧化效果,其羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子还原能力、铁离子还原能力等范围为86.89%~96.06%,66.10%~90.09%,35.89%~88.38%,0.370~0.736。其中,鸽蛋羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子还原能力最高,鸡蛋第二,鹌鹑蛋次之、鸭蛋效果最差。综上,鸽蛋具有比其它3种禽蛋更高抗氧化效果。

果蝇CYP6G1真核表达及其对新烟碱类杀虫剂的体外代谢

【目的】CYP6G1是黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内重要的P450酶,其底物谱广泛,除了介导黑腹果蝇对DDT的抗性之外,还与其对新烟碱类和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性密切相关,但目前CYP6G1的代谢功能与黑腹果蝇抗药性之间的因果关系还缺乏一些直接证据。【方法】本研究通过建立Bac-to-Bac昆虫杆状病毒真核表达系统,功能性地表达了果蝇细胞色素P450酶CYP6G1,以吡虫啉为阳性对照,利用超高效液相色谱(ultra-performance liquid chromatography,UPLC)和超高效液相色谱串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)分析CYP6G1对噻虫啉和噻虫嗪的体外代谢情况。【结果】孵育2 h后,重组CYP6G1能够羟基化吡虫啉和噻虫啉,使它们的含量分别减少17.6%±7.1%和4.2%±2.3%;重组CYP6G1可以促进噻虫嗪转化为噻虫胺,使噻虫嗪含量减少5.8%±2.1%。【结论】本研究结果为果蝇CYP6G1的结构功能研究提供一定理论依据。

人工智能在辅助生殖领域中应用的研究进展

人工智能近年来常应用于辅助生殖领域技术中。精液质量、子宫内膜厚度、输卵管通畅度、胚胎的选择及移植、宫腔微环境等多个因素均会影响辅助生殖技术。人工智能可通过处理图像、数据分析、预测模型、胚胎分级、机器人手术等多种新兴技术应用于生殖疾病的诊治,从而实现精确的诊断及个性化的治疗,但部分操作的利弊仍存在争议。虽然,目前人工智能在医疗领域取得了巨大的发展,但国内相关的文献报道尚少。本文对近年来人工智能在辅助生殖领域中应用的研究进展进行综述,探讨未来人工智能在生殖医学中的发展前景。

特色蔬菜芜菁种质资源与遗传育种研究进展

芜菁为药食饲同源的根菜类蔬菜,具有较高的利用价值。本文从芜菁的种质资源、育种研究、离体再生体系以及分子研究进展对现有的研究结果进行了阐述,以期为芜菁的种质资源筛选及品种选育等研究提供依据,促进芜菁产业发展。

视网膜光辐照实验模型研究进展

随着电子设备的普及与环境光污染现象的日趋严重,视网膜光辐照引起的损伤及其对视网膜色素变性、年龄相关性黄斑变性等疾病的致病作用逐渐被关注。光-视网膜组织反应类型以光热反应及光化学反应为主,其中可见光产生的光化学反应与视网膜疾病关系密切。光辐照参数包括光辐照波长、辐照能量及辐照时间等,不同参数下光辐照对视网膜细胞的作用还可能受多种外界因素影响。较多视网膜光辐照细胞实验模型建立以研究光辐照,尤其是蓝光对视网膜色素上皮细胞、光感受器细胞及神经细胞损伤的机制。光辐照会导致视网膜各细胞氧化应激、内质网应激及线粒体损伤激活自噬调控细胞凋亡。炎性小体激活及外泌体也参与调控光辐照对视网膜色素上皮细胞的损伤。也有研究探讨不同波长光源对细胞的潜在治疗作用。本文从光-视网膜组织反应类型、生物学研究中常用的光辐照参数,以及视网膜色素上皮细胞光辐照模型、视网膜光感受器细胞光辐照模型、视网膜神经节细胞光辐照模型等方面就视网膜光辐照的实验模型,探讨不同模型间细胞及光辐照参数的差异。

骨关节炎体外模型特点及设计新思路

背景:国内外的相关文献报道,体外模型是研究骨关节炎发病机制和有效治疗手段的重要工具,各种体外模型均有其优缺点和相关应用,但到目前为止还没有一个理想的实验模型可以阐述骨关节炎的所有特征。目的:综述近年相关文献,总结各类骨关节炎体外模型的优缺点及相关应用进展,为进一步了解骨关节炎及研究治疗方法提供一定帮助。方法:应用计算机检索2010-2021年PubMed、中国知网、维普和万方数据库相关文章,英文检索词:“Osteoarthritis,in vitro,model”;中文检索词:“骨关节炎、体外模型”。选取相关性强、发表年限较新的合格文献进行综述,最终纳入63篇文章进行综述。结果与结论:①骨关节炎2D细胞培养模型易于构建,也易于大规模生产,由于其缺乏典型的三维微观结构,缺少与周围细胞及细胞外基质的相互联系,因此只能适应于细胞水平研究。②外植体模型和3D细胞培养提供了与人体生理条件接近的内环境,不仅适用于研究细胞因子刺激机制,还可以用于研究骨关节物理损伤和生物力学对组织的影响,因此可以更好地研究骨关节炎的分子机制,并制定治疗措施,但从组织体积和维持细胞活力的角度来看,这些模型难以量产。③此外,文章还讨论了3D生物制造模型、类器官、芯片器官模型等先进组织工程模型,其中3D生物打印技术和生物反应器模型在精确控制组织结构、输送生物活性分子、动态培养细胞等方面具有明显的优势,但目前仍需进一步完善及创新。④总之,与2D细胞培养模型相比,体外3D组织模型更适合应用于目前的骨关节炎相关研究及其个体化治疗,未来希望研究者们将器官芯片技术、3D生物打印技术、生物反应器这些新兴技术进行整合,最终为骨关节炎治疗和药物测试开发一个更合适的平台。

质性研究结合针对性心理护理在卵巢过度刺激综合征患者中的应用效果

目的通过质性研究探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中卵巢过度刺激综合征(OHSS)患者真实心理体验,指导临床制订有效护理干预措施。方法采用目的抽样法选取2017年1月至2020年12月萍乡市妇幼保健院生殖健康科轻、中、重度OHSS患者各8例(共24例)为研究对象,以质性研究方法对全部患者实施半结构式深度访谈。应用录音和笔录方式记录,基于Colaizzi 7步分析法对访谈资料进行分析,提炼出主题。结合访谈主题制订针对性护理提纲,并采用随机数字表法将24例患者分为对照组和观察组,每组各12例。对照组实施常规护理,观察组实施针对性心理护理,比较两组患者护理前后的蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、简易精神状态量表(MMSE)、生活质量评估量表评分。结果护理后,观察组的MoCA、MMSE评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。护理后,观察组的心理领域、生理领域、环境领域、社会关系领域等生活质量评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过质性研究全面了解IVF-ET中OHSS患者的真实心理体验,而给予针对性的心理支持与护理,可提高患者认知功能,帮助患者积极面对治疗,改善患者精神状态,从而提高其生活质量。

试管开花植物研究现状及展望

概括国内外目前的试管开花植物科种以及目前试管开花的研究思路,着重介绍依靠其中一种普遍的研究思路(即外界因素对试管开花的影响)所取得的成果,并对目前存在的问题进行讨论。

转铁蛋白修饰的阿霉素隐形脂质体的制备及体外细胞试验

目的:用转铁蛋白(Tf)修饰盐酸阿霉素隐形脂质体(SL),以增加药物在肿瘤部位的积蓄,从而增加药物向肿瘤细胞内的转运。方法:采用薄膜超声法制备空白脂质体,硫酸铵梯度法装载盐酸阿霉素(DOX);通过膜材DSPE-PEG2000-COOH上的活性羧基末端与Tf上的氨基连接制备Tf修饰的隐形脂质体(Tf-SL);采用凝胶柱-UV法测定脂质体中DOX的包封率,双辛丁酸试剂盒测定蛋白结合效率;通过流式细胞试验和激光共聚焦显微试验考察肝癌细胞HepG2对SL包封的DOX(DOX-SL)及Tf-SL包封的DOX(Tf-DOX-SL)的结合或摄取情况,并观察两种脂质体对HepG2细胞的体外杀伤作用。结果:Tf-DOX-SL的平均粒径为(62±17)nm,药物平均包封率为96.4%,蛋白结合效率为100.28μg Tf/μmol磷脂。与DOX-SL相比,Tf-DOX-SL与肝癌细胞HepG2的结合及摄取均增加。48 h细胞毒试验表明Tf-DOX-SL对HepG2细胞的杀伤作用(IC50=20.4μmol/L)明显优于DOX-SL(IC50=166.2μmol/L)(P<0.01)。结论:Tf修饰的隐形脂质体可作为肿瘤靶向的载体通过受体介导的方式促进DOX向肿瘤细胞内的传递。

大鼠睾丸Leydig细胞的培养和鉴定

目的:研究体外培养大鼠睾丸Leyd ig细胞的有效方法。方法:原代培养大鼠睾丸Leyd ig细胞,用4 U/m l人绒毛膜促性腺激素(hCG)作用细胞,对照组未用hCG,放射免疫法测定培养液中睾酮浓度,3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)免疫组化染色观察睾丸Leyd ig细胞形态和生物学特性。结果:培养细胞成分均一、增殖旺盛、分化率高。接种72 h后大鼠睾丸Leyd ig细胞纯度达95%。接种后24 h内,hCG刺激组较对照组睾酮分泌量明显提高(P<0.05)。结论:体外培养的睾丸Leyd ig细胞可分泌高浓度的睾酮;睾丸Leyd ig细胞的纯化和培养方法的建立,可为中老年男性雄激素部分缺乏综合征睾酮替代治疗的基础和临床研究提供一条可行的思路。

铸造卡环、树脂卡环和包埋金属丝树脂卡环固位力的体外研究

目的对铸造卡环、树脂卡环和包埋金属丝树脂卡环固位力的力值变化进行体外研究。方法制作铸造卡环、树脂卡环和包埋金属丝树脂卡环,在第二前磨牙金属代型远中制作三臂卡固位体,用Chatillon循环测力仪测量3种卡环摘戴500次、1000次后的固位力,并记录摘戴过程中力值的变化。结果3种卡环都能提供足够的固位力,铸造卡环固位力最大,树脂卡环固位力最小,三者间比较差异有统计学意义(P<0.01)。摘戴500次后3种卡环固位力均有少量衰减,但衰减率比较差异无统计学意义(P>0.05);摘戴1000次后,铸造卡环固位力衰减最明显,包埋金属丝树脂卡环固位力衰减最小,三者间衰减率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论包埋有金属丝的树脂卡环在满足美观要求的同时又具有较大的固位力,其固位力衰减没有单纯树脂卡环明显。

五氯酚对大鼠睾丸支持细胞影响的研究

目的:检测五氯酚(PCP)对体外培养的大鼠睾丸支持细胞的毒性作用。方法:35日龄雄性SD大鼠4只,采用MTT法检测浓度为10-2、10-1、1、10μmol/LPCP对大鼠睾丸支持细胞活力的影响以及AnnexinV/PI流式细胞术检测PCP对大鼠支持细胞的毒性作用。结果:支持细胞的活力随PCP浓度的提高而明显降低并呈时间依赖效应;随浓度增高,细胞由胞质丰富、胞核饱满变为胞质稀疏、胞核皱缩、细胞数目减少,进而细胞界限不明显乃至消失;流式细胞仪检测结果表明,PCP导致坏死的支持细胞比例增加。结论:PCP可引起大鼠睾丸支持细胞坏死,细胞毒性作用明显。

三七总皂苷逆转乳腺癌细胞MCF-7/ADM多药耐药的实验研究

目的从中药中寻找安全有效的多药耐药逆转剂,并初步研究三七总皂苷(PNS)对人乳腺癌细胞MCF-7/S(敏感细胞)及MCF-7/ADM(耐药细胞)的影响。方法以MTT法测定PNS对MCF-7/S及MCF-7/ADM的直接细胞毒作用;测定阿霉素(DOX)对两种细胞的毒性作用并计算出耐药倍数;以无细胞毒性的三七总皂苷注射液作为耐药逆转剂用MTT法体外药敏感实验观察其对多药耐药细胞株MCF-7/ADM的逆转作用;用RT-PCR分别测敏感细胞和PNS作用后的耐药细胞表达的MDR1基因的阳性率;用WESTERN测定敏感细胞和PNS作用后的耐药细胞表达多药耐药蛋白P-gp(P-170)的阳性率。以上实验均用维拉帕米作为阳性对照。结果①PNS在300μg/m l浓度以下时对两细胞基本无毒性,为安全有效的逆转剂量。②阿霉素对敏感细胞和耐药细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.62μg/m l和25.03μg/m l,耐药倍数为40.37倍。③PNS能够增强阿霉素(DOX)对MCF-7/ADM的细胞毒作用,PNS 50,100,200μg/m l分别作用于乳腺癌耐药细胞48 h后,耐药细胞株的IC50分别降至17.85,13.80,11.63μg/m l。④PNS(50,100,200μg/m l)均可下调多药耐药基因mdr-1及其表达的糖蛋白P-gp的量,且随PNS浓度的增加,下调作用更加明显。而未发现维拉帕米有类似作用。结论①高浓度的三七总皂苷具有一定的抗肿瘤作用;②三七总皂苷可下调MCF-7/ADM的MDR-1和P-gP;③PNS能够部分逆转耐药细胞MCF-7/ADM的多药耐药性;④三七总皂苷是一种有效安全的多药耐药逆转剂。

COX-2抑制剂联合抗肿瘤的研究进展

环氧酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)抑制剂具有预防和治疗多种肿瘤的作用,并且能够影响化疗药物的抗肿瘤活性。COX-2抑制剂联合化疗药物抗肿瘤可能成为肿瘤治疗的新方法。该文对国内外COX-2抑制剂联合化疗药物抗肿瘤的临床前和临床研究进行综述,分析研究结论中存在的争议,并探讨影响化疗效果的可能机制。

水牛与娟姗牛对不同粗饲料体外消化能力的比较研究

本研究于晨饲前通过瘘管采集饲喂相同精料,粗料自由采食的水牛和娟姗牛瘤胃液,利用活体外产气法比较研究了二者对青贮玉米、象草、木薯渣和青贮甘蔗尾4种粗饲料的体外消化能力。试验中记录第2、4、6、9、12、24、36、48、72 h的产气量,并拟合产气参数;取24 h的发酵液测定总挥发性脂肪酸(TVFA)。结果表明:二者对粗饲料的体外可消化性与粗饲料营养价值具有较好的一致性。水牛对青贮玉米(P<0.05)和木薯渣的72 h产气量和理论产气量均高于娟姗牛,而娟姗牛对象草和青贮甘蔗尾的24 h和72 h产气量和理论产气量均高于水牛(P<0.05);除象草外娟姗牛对其余三种粗饲料的产气速率均高于水牛(P<0.05);水牛青贮甘蔗尾24 h发酵液的TVFA及其它各VFA均低于娟姗牛(P<0.05);水牛木薯渣24 h发酵液的TVFA、乙酸和丙酸均高于娟姗牛(P<0.05)。表明水牛瘤胃液对木薯渣和青贮玉米的体外降解率高于娟姗牛;但对青贮甘蔗尾和象草的体外降解率低于娟姗牛,说明二者瘤胃液对粗饲料消化能力各有优势,可见水牛耐粗饲能力与其瘤胃液纤维物质消化能力无直接关系。

人毛囊单位体外保存培养研究

目的通过对不同保存培养液下毛囊单位生长情况的研究，旨在寻找一种更为适合的毛囊保存培养液。方法：将添加不同配方的毛囊培养液进行毛囊培养，观察并计算毛囊生长长度。结果：本研究中⑤的保存培养液提高了毛囊单位的成活率，毛囊单位的生长速度明显加快，平均生长天数延长至14 d以上，最终生长长度可达（1．075±O．215）mm。结论：本研究中⑤的保存培养液有利于毛囊的持续、稳定生长延长，并对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用，效果良好，明显优于传统培液。