Construction of Fingerprint of Rape Pollen by Using HPLC

The flavonoids is a kind of complex compound and quercetin is a main composition in rape pollen.Taking quercetin as a sample and using separation technology and high performance liquid chromatography,chromatography fingerprint technique of Chinese medicine is introduced in food field to construct chromatography fingerprint of rape pollen,which can be used for medicinal use and edible use.The method will become a beneficial supplement for quality control method to ensure the safety and effectiveness of products.

A STUDY ON THE WATER—SOLUBLE PEPTIDES IN RAPE POLLEN:EXTRACTION,PURIFICATION,SEQUENCE DETERMINATION AND MEASUREMENT OF IMMUNOPROMOTIVE ACTIVITY

Four peptide components RP1,RP2,RP3Ⅰ and RP3Ⅱ were purified from the water—ex- tract of rape(Brassica campestris L.)pollen.The primary sequence of RP3I,with 12 amino acid residues,has been determined by Edman degradation—N—terminal dansylation.The immunopro- motive activities of the initially separated sample and RP3I have been also observed in vitro.

SYNTHESIS AND PARTIAL CHARACTERIZATION OF WATER SOLUBLE RAPE POLLEN DODECAPEPTIDE

A dodecapeptide extracted from rape pollen was synthesized using solid—phase method,its conforma- tions in different states were studied by FT—IR,CD,and its physiological activities were determined.Seven segments and five analogs were also synthesized to elucidate the structure—function relation.

油菜花粉生物炭固定化脂肪酶催化蒎烯环氧化

化学-酶法环氧化是生产烯烃环氧化物的一种经济环保型工艺,但高浓度的过氧化氢引起的酶失活现象仍是阻碍其发展的难题。本文选用天然生物资源油菜花粉作为生物炭制备的原料,经有机溶剂洗涤,在12mol/L硫酸刻蚀后,获得了大小均一、孔径均匀的多孔生物炭材料,并用戊二醛交联制备了固定化南极假丝酵母脂肪酶B(CRP@GA@CALB)。采用扫描电子显微镜(SEM)和接触角对固定化酶进行了表征。利用油菜花粉生物炭具有疏水性强且密度低的特点,构建了有机-水的双相环氧化反应体系。通过优化酰基供体,过氧化氢、固定化酶用量和反应温度等条件,获得了最佳反应效率。在最优反应条件:1.5mol/L正辛酸、30%过氧化氢、30mg/mL(有机相体积)酶添加量、反应温度为30℃下,1mol/Lα-蒎烯在60min达到100%转化率,并获得99.1%环氧化收率,经9次重用后仍能保持51.8%环氧化收率。

油菜花粉玛咖咀嚼片的制备及槲皮素和山奈酚的含量测定

目的:探究油菜花粉玛咖咀嚼片的制备工艺及槲皮素和山奈酚含量测定的方法。方法:通过湿法制粒工艺,制备油菜花粉玛咖咀嚼片;采用高效液相色谱(HPLC)法对油菜花粉玛咖咀嚼片中槲皮素和山奈酚的含量进行测定,色谱柱为ODS-C_(18)柱,流动相为甲醇-水,进行等度洗脱,体积流量为1.0 mL/min;柱温为35℃,检测波长为370 nm,进样量为5μL。结果:油菜花粉玛咖咀嚼片的制备工艺为油菜花粉∶玛咖提取物粉末∶填充剂=1∶1∶2,填充剂(微晶纤维素:木糖醇:乳糖=6∶4∶3)。所得咀嚼片表面光洁、甜度适中且质量稳定可控。槲皮素和山奈酚的线性范围分别为2.29~45.83μg/mL、3.75~75μg/mL,相关系数(r)分别为0.9996和0.9992;平均加样回收率分别为99.79%和101.02%,RSD分别为3.33%和2.56%。结论:油菜花粉玛咖咀嚼片制备工艺稳定可行,槲皮素和山奈酚含量测定方法准确可靠,可用于该咀嚼片的质量控制。

基于QbD理念的油菜花粉颗粒制备工艺及物理指纹图谱研究

目的基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念对油菜花粉颗粒进行制备工艺研究及质量控制。方法以油菜花粉颗粒成型率(%)、休止角(°)、平衡吸湿率(%)为评价指标,通过G1-熵权法组合赋权得到综合评价指标,单因素试验结合Box-Behnken响应面法优化油菜花粉颗粒制备工艺。采用物理指纹图谱评价不同批次油菜花粉颗粒的物理质量一致性并测定临界相对湿度。结果油菜花粉颗粒最佳制备工艺为:淀粉、甘露醇作为填充剂,药辅比1∶2、乙醇浓度55%、辅料配比7∶3。10批油菜花粉颗粒物理指纹图谱相似度均大于0.99。结论基于QbD理念的油菜花粉颗粒制备工艺稳定可行,可用于油菜花粉颗粒的制备。

油菜花粉颗粒质量标准研究

目的建立油菜花粉颗粒质量标准。方法采用薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC)对油菜花粉颗粒中黄酮类成分进行定性鉴别;运用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对槲皮素、柚皮素、山柰酚和异鼠李素(简称槲皮素)等4指标成分进行定量分析。结果槲皮素、山柰酚薄层色谱斑点清晰,分离良好;槲皮素等4指标成分在浓度为10~160 mg/L(r=0.9999)、4~64 mg/L(r=0.9993)、30~480 mg/L(r=0.9999)、0.5~8 mg/L(r=0.9993)时线性关系良好;平均回收率与相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为95.9%(1.50%)、102.7%(3.62%)、98.4%(1.36%)和98.8%(4.44%)。结论HPLC操作简便、准确可靠、专属性强,可用于油菜花粉颗粒的质量控制。

G1-熵权法多指标优化油菜花粉颗粒处方研究

目的:筛选适宜防潮辅料优化油菜花粉颗粒处方。方法:在预试验基础上,将油菜花粉提取物与常用药用辅料混合,以油菜花粉颗粒成型率、休止角、平衡吸湿率为评价指标,采用G1-熵权法计算综合评价指标,筛选最佳防潮辅料处方并测定临界相对湿度。结果:油菜花粉提取物、淀粉、甘露醇质量比为1∶1.2∶0.8时,成型率、休止角、平衡吸湿率分别为89.64%、23.42°、6.4741%,综合评价指标最高,为0.9599;临界相对湿度为80%。结论:基于G1-熵权法结合多指标优化的油菜花粉颗粒阻湿性较好,工艺稳定可行,可用于油菜花粉颗粒的制备。

基于油菜花粉模板制备Fe基复合材料及其催化特性

以油菜花粉为生物模板,采用共沉淀-焙烧法制备了Fe基复合材料活化过硫酸盐降解苯酚。采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和比表面积分析仪(BET)对Fe基复合材料进行表征分析。以苯酚为目标污染物,考察了催化剂投加量、过硫酸盐投加量、初始pH和苯酚浓度对苯酚降解效果的影响。结果表明,Fe基复合材料活化过硫酸盐降解苯酚性能优良。在最佳反应条件(25℃,苯酚初始浓度为200 mg/L,催化剂投加量为3 g/L,过硫酸盐投加量为8.4 mmol/L)下,反应60 min苯酚的降解率可达91%。Fe基复合材料可通过磁性分离,易于回收,在较宽pH范围内均可活化过硫酸盐降解苯酚,重复使用三次后,苯酚的降解率仍可达81%,稳定性良好。Fe基复合材料通过Fe^(2+)及花粉模板残留的C及其官能团共同活化过硫酸盐产生SO_(4)·^(-)和HO·降解苯酚。

油菜花粉提取物对高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝病的预防作用

目的:研究油菜花粉提取物对高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝病的预防作用。方法:通过DPPH和羟基自由基法测定油菜花粉提取物的抗氧化活性。将60只小鼠随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(200 mg/kg)、油菜花粉提取物低、中、高剂量组(2,4,8 g/kg)。除正常组给予正常饲料,其它各组给予高脂饲养,同时每天给药1次,连续饲养10周后,检测小鼠血清、肝脏中相关生化指标及p-AMPK和AMPK蛋白表达,HE染色法观察肝脏组织的病理变化。结果:油菜花粉提取物具有较强的抗氧化能力,经过干预后,与模型组相比,高剂量组小鼠肝脏质量显著性降低;所有干预组小鼠血清中AST、ALT、TG、TC和LDL-C水平及肝脏组织中TG、TC和MDA水平均显著降低,血清中HDL-C和肝脏组织中SOD水平均显著增加,肝组织中p-AMPK蛋白表达水平显著上调,并改善肝组织病理损伤症状。结论:油菜花粉提取物对高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝病具有预防作用,其机制可能与调控AMPK信号通路有关。

油菜蜂花粉的生物活性及其开发利用现状

人们健康理念日益增强,油菜蜂花粉作为一种天然保健原料,研究开发价值极高。文章介绍了油菜蜂花粉富含的多种营养成分和活性物质,主要总结油菜蜂花粉在抗氧化、抗炎、增强免疫、抗菌、保护前列腺、抗糖尿病并发症、抗肿瘤、调节保护肠道、保护卵巢等方面的生物活性和药理作用,以及油菜蜂花粉在蜂产品、保健品、食品、医药、化妆品中的应用,并对油菜蜂花粉的发展方向进行了展望。

蜜生假丝酵母LGL-2发酵油菜蜂花粉酵素工艺优化及品质评价

以油菜蜂花粉为主要原料,以蜂蜜中选育出的蜜生假丝酵母LGL-2为试验菌株,研究不同发酵时间、发酵温度、接种量和底物含量对油菜蜂花粉酵素总酚含量的影响。以总酚含量为指标,采用响应面法优化油菜蜂花粉酵素发酵工艺条件。在此条件下,进一步比较分析油菜蜂花粉及其酵素的酚类化合物、挥发性风味成分和抗氧化活性。结果表明:油菜蜂花粉酵素的最佳发酵工艺参数为发酵时间48 h、发酵温度30℃、接种量20%、底物含量30%,此时油菜蜂花粉酵素总酚含量可达11.48 mg GAE/g。采用高效液相色谱(HPLC)分析酚类化合物,发现其内包含没食子酸、对香豆酸、芦丁、鞣花酸和槲皮素,各酚类化合物含量经蜜生假丝酵母LGL-2发酵后均有所提高。采用相对气味活度值法(ROAV)结合顶空固相微萃取-气相色谱-质谱技术(HS-SPME-GC-MS)对油菜蜂花粉及其酵素的挥发性香气成分进行测定分析,共检测出26种挥发性香气成分,其中7种被鉴定为油菜蜂花粉酵素关键性挥发性香气成分,部分醇类和酯类物质含量提升为产品带来优良风味。抗氧化活性试验表明,相比于发酵前,油菜蜂花粉酵素具有更强的DPPH自由基清除能力(DPPH·)、ABTS^(+)自由基清除能力(ABTS^(+)·)以及铁离子还原能力(FRAP)。综上,经蜜生假丝酵母LGL-2发酵能有效提高油菜蜂花粉的酚类物质含量、风味品质及抗氧化活性。

油菜蜂花粉发酵工艺及生物活性研究

蜂花粉富含营养成分和生物活性物质,乳酸菌发酵是改善食品感官、营养和生物活性的有效方法之一。该文以油菜蜂花粉为原料,选用植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌进行混合发酵,用单因素试验和正交设计对发酵工艺进行优化,并对比了发酵前后蜂花粉基本营养成分、抗氧化、抗炎和抑菌活性。结果显示,油菜蜂花粉的最佳发酵条件为添加水量40%,发酵温度37℃,乳酸菌接种量10%,植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌的菌液比例为3∶1,最优条件下发酵72 h后油菜蜂花粉总酚和总黄酮的含量分别提高了16.09%和51.02%;还原糖和蛋白质含量显著降低(P<0.05);总抗氧化能力提高了1.26倍,DPPH自由基清除率、Fe^(2+)螯合率分别提高了10.49%、23.19%;透明质酸酶活性抑制率达到46.08%,抑制蛋白质变性的能力提高了24.65%;油菜蜂花粉经发酵后对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌活性均显著增强(P<0.05)。研究表明,发酵可进一步提高蜂花粉品质,增强其生物活性,该研究可为油菜蜂花粉进一步深加工提供理论指导。

油菜芥甘种间杂交后代F_(2)及BC_(1)F_(1)群体的遗传分析

根据芥菜型油菜和甘蓝型油菜染色体特异基因的序列设计引物,对芥菜型油菜‘四川黄籽’与甘蓝型油菜‘中双11’杂交后代F2和BC_(1)F_(1)群体进行基因型分析,研究芥甘杂种后代中染色体的遗传规律。结果表明:甘蓝型油菜来源的An03、An08、An09、An10、Cn03、Cn09等6条染色体和芥菜型油菜来源的Aj03、Aj10染色体在BC_(1)F_(1)群体中未见丢失,但Bj07染色体丢失频率最高,达62.83%;F2群体中,芥菜型油菜来源的Aj、Bj基因组染色体比甘蓝型油菜来源的An、Cn基因组染色体丢失多,甘蓝型油菜来源的An08、Cn03染色体和芥菜型油菜来源的Bj08染色体丢失少,分别为1.36%、1.36%和0.90%,而Bj07染色体丢失多,达56.56%;BC_(1)F_(1)群体套袋自交平均结实率仅0.60,最高达5.31,自由授粉平均结实率为1.95,最高达12.85;F2群体套袋自交平均结实率仅0.66,最高达17.70,自由授粉平均结实率为2.18,最高达23.05。综上,芥甘杂交后代中芥菜型油菜遗传物质比甘蓝型油菜亲本的遗传物质更容易丢失,要将芥菜型油菜优异的基因导入甘蓝型油菜创制优质种质,需在油菜芥甘杂交育种的早期世代促进其染色体重组配对。

紫外和荧光光谱法研究油菜蜂花粉多酚对胰脂肪酶的作用过程

本文利用酶动力学方法测定了油菜蜂花粉多酚对胰脂肪酶的抑制作用,并通过紫外光谱、荧光光谱和同步荧光光谱分析了油菜蜂花粉多酚与胰脂肪酶的相互作用过程。结果表明,油菜蜂花粉多酚对胰脂肪酶的活性具有一定的抑制作用,其半抑制浓度(IC_(50))为1.670±0.045 mg/mL,抑制类型为可逆性抑制中的混合型抑制。荧光光谱分析显示,随着油菜蜂花粉多酚浓度增加,胰脂肪酶的最大荧光发射强度逐渐降低,同时荧光最大发射波长从341 nm红移到349 nm。同步荧光光谱表明,多酚与胰脂肪酶结合时酶内部的疏水性降低,肽链的伸展程度增加;荧光猝灭机理结果显示,猝灭常数随温度升高从0.1000减小到0.0743,其结合过程为静态猝灭,且结合位点约为1个。综上,油菜蜂花粉多酚通过改变胰脂肪酶构象来抑制胰脂肪酶的活性,这为深入研究蜂花粉减脂机理提供了一定理论依据。

油菜花粉多糖提取工艺条件研究

对油菜花粉多糖的提取工艺进行研究。探讨浸提次数、时间、料液比和温度对多糖得率的影响,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明:温度对多糖得率的影响最大,其次为提取时间、次数,料液比的影响最小。油菜花粉多糖提取的最优条件为1:4的料液比,90℃水浴条件下,浸提4次,每次浸提4h,其水溶性多糖提取率达1.450%。

FAAS法测定不同产地油菜花粉中13种金属元素含量

采用先灰化、再经硝酸-高氯酸(V:V=4:1)常压微沸条件下消化油菜花粉样品,应用火焰原子吸收法测定不同产地油菜花粉中的金属元素K,Na,Ca,Mg,Fe,Co,Ni,Cu,Zn,Mn,Cd,Cr和Pb的含量。研究了测定不同元素的仪器最佳工作条件,并作了方法的准确性和精密度的考察。结果表明:山丹和景泰油菜花粉中K,Na,Ca,Mg,Fe,Cu,Zn和Mn的含量分别为4248·00,75·77,312·10,856·61,599·53,8·78,27·82,22·54μg·g-1和7585·75,242·56,287·88,699·43,1020·65,10·25,40·44,30·97μg·g-1。Co,Ni,Cr,Cd和Pb未检出。加标回收率为95·22%～105·49%,相对标准差(n=9)为0·30%～5·00%。测定方法简单易行,方便快捷。

油菜蜂花粉黄酮醇的测定及其抗氧化活性研究

本实验通过盐酸酸解蜂花粉乙醇提取物,薄层色谱法分离酸解液中黄酮醇,并测定酸解液中黄酮醇的含量及其抗氧化活性。结果表明:蜂花粉乙醇提取物酸解后,槲皮素(Rf值0.59)含量为0.40mg/g,山奈酚(Rf值0.71)含量为3.98mg/g,酸解液DPPH.清除率强于花粉乙醇提取物。经制备液相分离,采用核磁和质谱鉴定出一种黄酮醇苷,其结构为山奈酚3-O-(2"-O-β-D-吡喃葡萄糖)-β-D-葡萄糖。采用TLC-DPPH技术对蜂花粉乙醇提取物及其酸解液中抗氧化成分进行追踪,为花粉中黄酮醇苷的抗氧性研究提供参考。

油菜蜂花粉蛋白的分离提取及其抗氧化活性

以油菜蜂花粉为研究对象,根据溶解性的不同,从中分离出了水溶性蛋白、醇溶性蛋白、碱溶性蛋白及盐溶性蛋白,并对各蛋白组分抗氧化活性进行了研究。结果表明:油菜蜂花粉中主要蛋白为水溶性蛋白,占其干重的7.35%,其次为醇溶性蛋白3.65%,盐溶性蛋白和碱溶性蛋白分别占2.50%和2.24%。4种不同溶解性的油菜蜂花粉蛋白均具有一定的体外抗氧化作用,各蛋白组分的总抗氧化能力以及对DPPH自由基、OH.和O2-.的清除能力呈现较好的量效关系;4种蛋白抗氧化活性由强到弱的顺序依次为水溶性蛋白>醇溶性蛋白>碱溶性蛋白>盐溶性蛋白。因此,油菜蜂花粉蛋白质可作为一种潜在的天然抗氧剂进行深入研究。

HPLC法测定油菜蜂花粉中黄酮含量及六种破壁方法对黄酮提取的影响

目的:六种破壁方法处理油菜蜂花粉,运用HPLC测定花粉中的黄酮含量,研究不同破壁方法对黄酮提取的影响。方法:色谱柱为反相C18柱,流动相V(甲醇):V(0.4%磷酸)为60:40,流速0.5ml/min,波长370nm。采用超声法、酶解法、温差法、温差-超声法、温差-酶法和混合方法进行花粉破壁。结果:未破壁花粉总黄酮含量为2.2447mg/g。六种破壁方法提取的花粉总黄酮含量比未破壁的依次增加12.4%、8.3%、23.1%、25.4%、28.1%、31.5%,破壁分别为52.56%、41.31%、76.94%、78.66%、83.13%、86.88%。结论:建立了HPLC测定花粉黄酮的方法;花粉破壁率越高,黄酮的提取得率越高。