无创高频振荡通气对急性呼吸衰竭新生儿SP-D、AQP-5水平的影响

目的探讨无创高频振荡通气治疗新生儿急性呼吸衰竭患者对其SP-D(肺表面活性物质D,Pulmonary surfactant D)、AQP-5(肺组织水通道蛋白5,Lung tissue water channel protein 5)水平的影响。方法选择2014年1月-2017年1月在本院诊治的急性呼吸衰竭患儿(acute respiratory failure,ARF)94例,按随机数字法分为无创高频(noninvasive high-frequency ventilation,NHFOV)组和常频机械通气(Constant frequency mechanical ventilation,CMV)组。NHFOV组予NHFOV治疗,CMV组给予CMV治疗,然后观察两组的治疗效果及机械通气时间、用氧时间、住院时间、并发症等,在治疗前、治疗12、24、48、72h监测两组患者的呼吸动力学、血气指标以及血清SP-D、AQP-5水平。结果NHFOV组的有效率为93.61%,显著高于CMV组(78.32%),差异有统计学意义(P=0.037);NHFOV组的气漏、呼吸相关性肺炎、下呼吸道感染等并发症显著低于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);NHFOV组的机械通气时间、用氧时间、经口喂养时间、住院时间显著短于CMV组(P<0.05);两组患儿的Pa O_2、Pa CO_2、Pa O_2/Fi O_2、OI、RI、p H在治疗后均较治疗前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05),NHFOV组的血气指标、呼吸动力学在各时间点均明显改善,均显著优于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);在治疗后两组患者的SP-D、AQP-5水平均较治疗前改善显著(P<0.05),在治疗24h内两组患者的SP-D、AQP-5水平差异不大,差异无统计学意义(P>0.05),24h后各时间点NHFOV组的血清SP-D、AQP-5水平显著低于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);结论 NHFOV治疗新生儿ARF疗效较好,可以有效改善氧合功能,并且不良反应较少,在临床上应用价值较高。

腺病毒介导AQP1基因治疗涎腺干燥综合征的实验研究

目的 为了观察SS涎腺局部AQP1基因转移的治疗效果。方法 建立小鼠 SS动物模型,分别予以 AQP1 基因重组腺病毒、空病毒载体对照和生理盐水对照。观察各组小鼠饮水量、唾液流率的改变,Western blot分析各组小鼠颌下腺中 AQP1表达量的变化。结果 在SS小鼠颌下腺腺体破坏、腺泡萎缩变性、腺体分泌功能受到破坏的情况下,通过将 AQP1 基因腺病毒重组体转染到小鼠颌下腺可以有效提高唾液分泌,从而改善口干症状降低饮水量。结论 空载体对照组与 SS组在饮水量、唾液流率等方面无显著性差异说明腺病毒空载体转染对SS小鼠的唾液分泌无显著影响,说明 AQP1 基因腺病毒重组体对小鼠涎腺干燥综合征的治疗作用是通过其携带的AQP1基因发挥作用的。

脑外伤患者AQP4的表达及其与临床预后的关系

目的对比检测不同程度脑外伤患者的水通道蛋白4(AQP4)的表达差异,探讨AQP4与临床预后的关系。方法选取87例脑外伤患者根据GCS评分分为3组,中度损伤组(GCS 9～12分)33例,重度损伤组(GCS 4～8分)37例,特重度损伤组(GCS 3分)17例,取手术清除的创伤区脑组织标本,用免疫组化法检测不同组别的AQP4的表达情况。结果①中度脑外伤组中,脑组织细胞和血管内皮细胞轻度肿胀;在重度、特重度脑外伤组中,脑组织细胞肿胀明显,血管内皮细胞肿胀明显,血管周围间隙明显扩大,血脑屏障受损严重。②脑组织中细胞膜或细胞浆棕黄色染色为AQP4阳性表达。随损伤程度加重,AQP4表达逐渐增强,在特重度损伤组AQP4表达最强,其次为重度损伤组,中度损伤组,且比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AQP4表达强度与病情程度呈正相关,会提示患者预后情况,抑制AQP4的活性有可能减轻脑水肿,改善预后。

灵芝多糖对荷膀胱癌T24细胞小鼠T细胞亚群及AQP1、AQP3表达的影响

目的研究灵芝多糖对荷膀胱癌T24细胞小鼠T细胞亚群及AQP1、AQP3表达的影响。方法选择BALB/c裸鼠30只作为实验动物,皮下注射膀胱癌T24细胞建立荷膀胱癌动物模型,随机分为对照组、顺铂组、灵芝多糖^+顺铂组各10只,顺铂组给予顺铂25 mg/kg腹腔注射,顺铂^+灵芝多糖组小鼠给予灵芝多糖200 mg/kg灌胃,顺铂25 mg/kg腹腔注射,对照组给予相当体积的生理盐水灌胃。测定肿瘤组织的体积和质量、外周血中T细胞亚群的含量以及肿瘤组织中AQP1、AQP3、Caspase-3、Bax的mRNA含量。结果顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织的体积、肿瘤组织质量明显低于对照组(P<0.05),顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织体积、肿瘤组织质量明显低于顺铂组(P<0.05);顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4^+/CD8^+均明显高于对照组(P<0.05),顺铂^+灵芝多糖组CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+均明显高于顺铂组(P<0.05);顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织中Bax、Caspase-3的mRNA含量明显低于对照组(P<0.05),顺铂^+灵芝多糖组鼠肿瘤组织中Bax、Caspase-3的mRNA含量明显低于顺铂组(P<0.05);顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织中AQP1、AQP3的mRNA含量明显低于对照组(P<0.05);顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织中AQP1、AQP3的mRNA含量明显低于顺铂组(P<0.05)。结论灵芝多糖干预能够抑制荷膀胱癌T24细胞小鼠的肿瘤生长,增强细胞免疫功能,调节凋亡基因、AQP1、AQP3的表达水平。

健脾益肝方对肝硬化大鼠AQP8的影响

目的:观察健脾益肝方对肝硬化模型大鼠肝组织水通道蛋白AQP8表达的影响。方法:将90只Wist-ar大鼠随机分为空白对照组、模型组、健脾益肝方高、中、低剂量组及秋水仙碱组,运用CCL4法造肝硬化模型,并对肝脏组织作AQP8 PCR定量及Western Blotting检测。结果:模型组AQP8蛋白含量及平均光密度值和积分光密度值均很低,与空白组相比有极显著差异(P<0.01);经过治疗后健脾益肝方可以使AQP8蛋白含量及平均光密度值和积分光密度值均升高,其中疗效与中药使用剂量正相关,健脾益肝方低剂量组与模型组相比有显著差异(P<0.05),而健脾益肝方中剂量组及高剂量组与模型组相比具有极显著差异(P<0.01);秋水仙碱组与模型组比较没有显著差异(P>0.05)。结论:健脾益肝方对AQP8蛋白的升高作用是治疗肝硬化的靶点之一。

他克莫司滴眼液对损伤角膜上皮AQP3、5表达的影响

目的通过研究他克莫司(tacrolimus)滴眼液(0.1%FK506)在损伤角膜上皮愈合过程中水通道蛋白(AQP)3、5的表达及其作用机制,为研制角膜上皮创伤修复的有效治疗药物提供理论依据。方法采用机械法刮除小鼠角膜中央上皮的方法建立模型,观察角膜上皮修复情况。取损伤若干小时用药后大鼠角膜进行AQP3、5免疫组化染色,观察AQP3、5表达情况。结果角膜上皮基底细胞层可见AQP3表达,并且实验组表达比对照组更高,表达高峰出现在损伤后18 h。角膜上皮损伤后用0.1%FK506滴眼,伤后6 h实验组愈合面积与对照组比较,差异无统计学意义,而损伤后12、18、24 h比较,差异有统计学意义(P<0.05)。上皮全层可见AQP5表达,随着角膜的愈合,其表达量降低。实验组6、12、18 h表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用0.1%FK506滴眼,可通过增加AQP3表达而加快小鼠角膜上皮损伤的修复;而AQP5表达量则随角膜愈合时间延长而降低。

藏绵羊与小尾寒羊骨骼肌结构特点及AQP表达特性的研究

为了研究藏绵羊与小尾寒羊骨骼肌结构特点及水通道蛋白(AQP)家族在骨骼肌中的表达特性,试验根据H.E.染色、Gomori染色情况计算了藏绵羊和小尾寒羊骨骼肌肌纤维面积、单位面积肌纤维数量、胞浆占比及胶原纤维含量,并利用免疫组织化学SP法对比分析了AQP1、AQP3和AQP4蛋白在两种绵羊骨骼肌中的表达特性。结果表明:经H.E.染色可见,藏绵羊和小尾寒羊的背部、前腿部和后腿部肌细胞排列紧密,胶原纤维长而粗。藏绵羊前腿部肌纤维面积显著大于小尾寒羊(P<0.05),而背部和后腿部肌纤维面积与小尾寒羊比较差异不显著(P>0.05);藏绵羊后腿部单位面积肌纤维数量、胞浆占比均显著高于小尾寒羊(P<0.05),背部和前腿部单位面积肌纤维数量与小尾寒羊比较差异不显著(P>0.05),而小尾寒羊背部、前腿部胞浆占比均显著高于藏绵羊(P<0.05);藏绵羊背部、前腿部和后腿部胶原纤维含量均显著高于小尾寒羊(P<0.05)。经Gomori染色可见,AQP蛋白免疫阳性产物主要在肌细胞膜中表达,胞浆中散在分布。藏绵羊背部、前腿部AQP1相对表达量显著高于小尾寒羊(P<0.05),背部、前腿部和后腿部AQP3、AQP4相对表达量均显著高于小尾寒羊(P<0.05)。说明藏绵羊骨骼肌肌纤维密度相对较高,且AQP表达量高,骨骼肌组织结构和AQP蛋白表达可能参与调节藏绵羊高原低氧适应机制。

17例AQP4抗体阳性视神经脊髓炎谱系疾病的临床分析

目的探讨AQP4抗体阳性视神经脊髓炎谱系疾病的临床资料、受累部位、临床表现、辅助检查,为临床早期诊断提供借鉴,以降低该病的误诊率、漏诊率。方法选取宁夏医科大学总医院2012年1月至2018年7月诊断为视神经脊髓炎谱系疾病且血清AQP4抗体阳性的患者17例作为研究对象,回顾性分析患者的性别、年龄、首次发病年龄、发病诱因、发病次数等临床资料,临床表现及眼科检查、脑脊液、神经电生理等辅助检查结果。结果17例患者中,女性例数明显高于男性,青壮年多见,复发率高,部分病例合并自身免疫性疾病,首次受累部位最常见于视神经64.7%(11/17),视神经和脊髓均易受累88.2%(15/17),且累及脊髓者多见于颈髓86.7%(13/15)、胸髓80%(12/15)。有93.3%(14/15)的脊髓病灶≥3个椎体节段。有41.2%(7/17)的病例脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)白细胞数升高,有17.6%(3/17)的病例脑脊液蛋白质升高。脑脊液寡克隆区带(oligoclonal bands,OB)阳性占28.6%(2/7)。视觉诱发电位异常者82.4%(14/17),其中潜伏期延长者52.6%(10/19)。结论AQP4抗体阳性的视神经脊髓炎谱系疾病病例女性多见,青壮年多发,疾病复发率高,可合并自身免疫性疾病,首次受累部位常见于视神经,易累及视神经和脊髓,脊髓病变多数≥3个椎体节段,且病灶常位于颈髓和胸髓,该病可导致脑脊液白细胞、蛋白数可升高,诱发电位敏感性较高,可协助早期诊断。

大黄泻下效应的药理学新解释

大黄以"泻下"效应著称,其效应部位在结肠、且与"水"密切相关,对大黄蒽醌衍生物构效关系分析证实,具有1,8-二羟基且在2,3,6或7位没有羟基的蒽醌苷(emodin,rhein,chrysophanol)能产生较强的"水泻作用";结肠上皮细胞AQP丰富表达,AQPs表达异常可能导致结肠对水的吸收减少和/或肠液分泌增加,这可能是以结肠为主要药理效应部位的药物(泻下药)重要的效应分子之一,为大黄"泻下"功效的药理效应机制研究提供了新视角。大黄这一"水泻作用"是否与结肠AQP变化有关。通过对中医药理论、大黄功效与药理和AQPs研究资料分析,认为大黄对结肠AQP的调节效应可能是其"泻下"功效的药理学新解释,亦可能是大黄具有多重功效的缘由。

水分亏缺条件下玉米根系PIP2-5基因的表达

在PEG-6000模拟水分亏缺条件下,以微管蛋白基因为内参基因,水通道蛋白基因PIP2-5为检测基因,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)体系检测PIP2-5基因在玉米根系中的表达的结果表明,人工模拟水分亏缺条件下PIP2-5基因表达量高于正常水分条件下的。这暗示,水分亏缺条件下细胞-细胞途径对根系吸水的贡献可能增大。

严重烧伤后大鼠心肌组织水通道蛋白-1表达变化及其意义

目的探讨大鼠严重烧伤后心肌组织中水通道蛋白-1(AQP-1)的表达变化及意义。方法健康成年Wistar大鼠48只,分为正常对照组(n=6)、烫伤组(n=42);采用30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,其中单纯烫伤组又分为2、4、8、12、24、48、72h组,每个时相点为6只动物。用干湿重法和ELSIA方法分别检测烧伤后不同时间段心肌组织含水量和AQP1的表达变化。结果严重烧伤后2h心肌组织含水量增加及AQP1表达增强;烧伤后12h达到高峰,烧伤后48h仍高于正常;统计学分析表明,AQP1的表达与心肌组织含水量呈显著正相关(r=0.844,P<0.01)。结论严重烧伤后AQP1蛋白表达明显增强可能导致心肌组织含水量的增加。试验提示AQP1可能参与介导烧伤后心肌水肿的病理进程。

水通道的分子生物学研究

水通道是哺乳动物及植物细胞膜上转运水的特异孔道。第一个水通道蛋白即原型分子水通道（２８ｋＤ通道构成整合膜蛋白）的ｃＤＮＡ序列是在１９９１年完成鉴定的。目前从哺乳动物组织中已鉴定出至少五种水通道蛋白，统称为水蛋白（ａｑｕａｐｏｒｉｎ，ＡＱＰ），均属于主体内在蛋白（ＭＩＰ）家族的成员。水通道介导水依渗透梯度方向运动。不同的水通道蛋白在组织中的分布不同，但多在肾髓质有表达。原型分子水通道蛋白在膜中以四聚体形式存在，每一单体形成一个功能性的水孔道。

茯苓三萜类成分利水作用的虚拟筛选

目的探讨茯苓三萜类利水成分的虚拟筛选技术。方法选取39种茯苓三萜类成分作为配体,选取3种水通道蛋白AQP1,4,5作为靶蛋白,采用PyRx0.8软件autodock vina模块进行筛选。结果在39个茯苓三萜化合物中,去氢松香酸甲酯分别与AQP1,4,5结合的活性较强。结论去氢松香酸甲酯可能是茯苓利水健脾的活性物质。

水分亏缺条件下玉米根系TIP1-1基因的表达

以一组具有不同抗旱性状的玉米遗传材料杂交种户单4号(抗旱)及其父本803(不抗旱),母本天四(抗旱)为供试材料,以微管蛋白基因为内参基因,水通道蛋白基因TIP1-1为检测基因,在PEG-6000模拟水分亏缺条件下,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)体系检测TIP1-1基因在玉米根系中的表达情况。在正常供水条件下,TIP1-1基因在抗旱性强的天四和户单4号根系中表达量较多,而在不抗旱的803根系中的表达量较少。水分胁迫下,TIP1-1基因在天四和户单4号根系中表达量没有增多,而在803根系中表达量增多,但依然少于户单4号。并且无论是正常供水还是水分胁迫条件下,抗旱性最强的户单4号根系中TIP1-1基因的表达量均最多。证明水通道蛋白表达量的高低与根系吸水能力的强弱及作物抗旱性的强弱有关,这对水分亏缺条件下植物维持体内水分平衡具有重要意义。

单唾液酸神经节苷脂对创伤性脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响

目的研究神经节苷脂对脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响。方法建立大鼠重度颅脑损伤模型,随机分成正常组、模型组和治疗组。考察大鼠伤后不同时间点神经节苷脂对脑含水量和脑组织AQP 4mRNA表达水平的影响。结果模型组和治疗组大鼠脑组织含水量在造模4 h后逐步上升,治疗组在24 h到达峰值后下降,72 h大鼠脑组织含水量值与正常组接近,而模型组大鼠脑组织含水量一直升高,72 h含水量高达80%。两组大鼠造模后1 h后AQP 4 mRNA表达水平开始上调,逐步增加,治疗组在12 h达峰值,然后表达持续回落,72 h与正常组表达水平接近;模型组在24 h达峰值,且表达维持在高位,明显高于治疗组(P<0.05)。结论神经节苷脂能抑制脑水肿的发生,减轻脑水肿形成。

水通道蛋白-1,5在干燥综合征小鼠下颌下腺中的表达

目的:探讨水通道蛋白-1和-5(AQP1、AQP5)在干燥综合征(Sjgrensyndrome,SS)小鼠下颌下腺中的表达及其意义。方法:选用BALB/c小鼠10只,用完全弗氏佐剂+同种鼠下颌下腺抗原诱导,使之产生在临床表现、病理损害和免疫特征上都类似于人SS的动物模型,对照组10只均注射等体积的生理盐水。用免疫组化和Western印迹方法研究SS小鼠下颌下腺AQP1、AQP5表达的变化特点。结果:SS小鼠下颌下腺组织中AQP1和AQP5的表达量均显著减少(P<0.01),主要分布在导管部位;AQP5在腺泡顶膜表达减少,而基侧膜的表达增强。结论:AQP1和AQP5表达量减少以及分布部位的异常改变,可能是SS患者口干的重要原因之一。

《金匮要略》泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水模型影响的研究

目的:研究泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水豚鼠模型的影响。方法:采用醋酸去氨加压素复制膜迷路积水模型,以豚鼠颞骨切片耳蜗蜗管面积和蜗管加前庭阶面积之和之比值以及耳蜗及肾的水通道蛋白-2的免疫组化表达为药效学的主要指标,研究泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水豚鼠模型的作用。结果:模型组与正常对照组比较有非常显著性差异(P<0.01);模型组与泽泻汤超临界萃取液治疗组比较有非常显著性差异(P<0.01)。水通道蛋白-2免疫组化表达实验组较模型组减弱。结论:泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水模型有较好作用,且机制可能为抑制其内耳及肾脏水通道蛋白-2的表达。

水通道蛋白亚型1-5在鼠鼻粘膜中表达及意义

目的检测水通道蛋白(water channel protein;Aquaporin AQP)不同亚型在大鼠鼻粘膜组织中的分布及各亚型的组定位。探讨其组织水代谢障碍所致疾病的发生机制。方法取20只成年Wistar大鼠,3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,即刻取鼻粘膜组织,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋。应用免疫组织化学技术检测鼻粘膜组织中水通道蛋白1、2、3、4、5的分布情况。结果AQP1、4为1∶1000,AQP3为1∶300,AQP5为1∶400的抗体浓度可以观察到它们在鼻粘膜组织不同部位稳定、清晰的染色反应。但AQP2使用1∶50也未观察到染色,AQP1在基底膜反应清晰,AQP3在腺体内导管及胞浆被标记,AQP4在被覆上皮细胞膜、血管内皮表达清晰,AQP5在纤毛,浆液细胞胞浆广泛表达。结论水通道蛋白13、、45、广泛分布在鼻粘膜不同部位,当某种水通道蛋白亚型表达出现异常时,可能会成为导致组织发生水代谢异常疾病的重要原因之一。

水通道蛋白1在人角膜内皮细胞的表达

目的 研究水通道蛋白 1(water channel protein1,AQP1)抗体在人角膜中的表达及水转运机制。方法 运用免疫组织化学法测定人角膜中 AQP1的表达。结果 在角膜内皮细胞和基质细胞中有 AQP1的表达 ,而角膜上皮细胞不表达 AQP1。结论 本实验证实了 AQP1在角膜内皮的表达 。

脾胃湿热证临床研究新进展

从幽门螺杆菌感染、炎症、保护因子、胃肠动力学、细胞内能量代谢、细胞凋亡、基因调控及相关蛋白表达、水通道蛋白、肠道微生态的变化等方面对脾胃湿热证的研究进展进行分析总结。脾胃湿热证是机体对病因应答呈亢进性、失调性和代偿性的形态和功能的综合性病理反应;对其客观化研究需多方面、多层次进行。