冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及癌基因c-fos、c-jun表达的影响

目的探讨冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其可能的作用机制。方法用MTT法测定不同浓度冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs增殖的影响,用流式细胞仪分析冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs细胞周期的影响,用免疫细胞化学染色法测定冬虫夏草水提取物对慢性低氧大鼠PASMCs增殖细胞核抗原(PCNA)和癌基因c-fos、c-jun表达的影响。结果低氧对照组大鼠PASMCs吸光度(A)值明显高于常氧对照组,差异有统计学意义(P<0.01),1、10、100mg/mL冬虫夏草组A值呈明显下降趋势,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧对照组S+G2M期细胞比例明显高于常氧对照组,差异有统计学意义(P<0.01),冬虫夏草组S+G2M期细胞比例明显低于低氧对照组,但高于常氧对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);冬虫夏草组PCNA阳性表达率明显低于低氧对照组,但高于常氧对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);冬虫夏草组细胞c-fos和c-jun蛋白阳性染色平均积分光密度值(AIOD)明显低于低氧对照组,但高于常氧对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论冬虫夏草水提取物呈浓度依赖性抑制慢性低氧导致的大鼠PASMCs增殖,其抑制作用可能是通过减少细胞内c-fos、c-jun基因和PCNA的表达、降低S期和G2/M期细胞比例来实现的。

冬虫夏草菌丝水提液对SP2/0细胞凋亡的影响

在冬虫夏草菌丝水提液诱导下,采用Hoechst33342荧光染色、MTT、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法,观察和分析了SP2/0细胞的凋亡情况。结果显示,冬虫夏草菌丝水提液可抑制SP2/0细胞增殖,在荧光显微镜下,凋亡细胞呈亮绿色,DNA琼脂糖电泳可见典型的“阶梯状”条带,Annexin-V-FITC和碘化丙啶(PI)双染后流式细胞仪分析显示,细胞凋亡数量明显增多。表明,冬虫夏草菌丝水提液对SP2/0细胞增殖的抑制作用可能与诱导其凋亡有关。

冬虫夏草菌丝体水提物的抗新城疫病毒作用

通过低温水浸提取方法,获取冬虫夏草菌丝体水提物。采用MTT的方法和观察细胞病变(CPE)的方法分别研究了水提物毒性和抗病毒作用。结果显示水提物浓度≤0.5mg/mL时,对Vero细胞无毒性,0.5mg/mL水提物与新城疫病毒作用,或预处理Vero细胞,均能抑制新城疫病毒在细胞上病变的形成。提示水提物具有直接抗新城疫病毒和预防新城疫病毒感染的作用。

人工培植冬虫夏草水提物抗人巨细胞病毒的研究

研究人工培植冬虫夏草水提物对人类巨细胞病毒(HCMV)的抑制作用,并对其抑制机制进行初步研究。通过细胞病变法(CPE)检测虫草水提物的细胞毒性及抗病毒活性,同时采用免疫印迹实验(Western Blot-ting)初步探究虫草水提物抗HCMV的作用靶点。结果表明虫草水提物浓度在0.3 g.L-1以上时能有效抑制HCMV在宿主细胞中的复制,用虫草水提物处理感染的宿主细胞,HCMV的早期立即蛋白IE1、IE2及早期蛋白UL84的表达均明显受到抑制。虫草水提物可作为潜在的抗HCMV药物。

单味中药及提取物治疗糖尿病肾病实验研究简况

单味中药及提取物防治糖尿病肾病(DN)具有较好且稳定疗效,实验研究提示黄芪、大黄、姜黄、三七、冬虫夏草、雷公藤及提取物可纠正糖脂代谢紊乱、拮抗氧化应激、抑制炎症反应、保护足细胞、调节血管活性物质及细胞因子等。已从单纯疗效验证、比较向作用机制方向发展,并已从分子细胞学水平阐述机制。问题与对策:(1)仍滞留现象观察和机制推测,应采用相关基因敲除或过表达细胞和动物模型,验证机理;(2)不能仅从单一指标解释作用机理,应着眼各指标或各因子间相互作用,阐述整体调节机制;(3)缺乏系统研究,中药成分复杂,不同中药可能含有相同作用成分,应采用现代药理学研究方法和手段做好系统研究。

冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉抗焦虑活性研究

[目的]研究冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉的抗焦虑作用。[方法]取健康雄性SD大鼠70只,按体重随机分为7组,模型对照组,冬虫夏草低剂量组(8.4 mg/kg WECS-l),冬虫夏草高剂量组(16.8 mg/kg WECS-h),冬虫夏草水提取物低剂量+速溶芦笋粉(8.4mg/kg WECS-l+400 mg/kg IAP),冬虫夏草高剂量+速溶芦笋粉(16.8 mg/kg WECS-h+400 mg/kg IAP),速溶芦笋粉(400 mg/kg IAP),空白对照组。采用慢性情绪应激模型,从行为学观察和内分泌水平角度研究速溶芦笋粉的抗焦虑作用。[结果]行为学观察表明,与模型对照组比较,在此焦虑模型上WECS-h+IAP剂量组的攻击行为显著降低(P<0.05),WECS-l+IAP剂量组的探究行为和修饰行为显著降低(P<0.05),其他各个处理组与模型对照组比较统计结果均没有显著的差异(P>0.05)。内分泌水平检测结果表明,与模型对照组比较,在此焦虑模型上冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉(WECS-h+IAP)剂量组能显著降低血清种皮质醇(CORT)、肾上腺素(E)和去甲肾上腺素(NA)浓度(P<0.05),并能显著升高血清中5-羟色氨酸(5-HT)和多巴胺(DA)水平(P<0.05)。[结论]冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉联用具有增强抗焦虑作用。

冬虫夏草核磁特征指纹图谱建立及鉴别研究

目前冬虫夏草市场伪品泛滥,鉴别困难。本文采用核磁共振技术对3个不同产地的21批野生冬虫夏草、30批冬虫夏草野生抚育品和4种冬虫夏草伪品的水提物及醇提物进行了测定,比较分析之后确定了9组特征峰作为量化标准,建立了冬虫夏草的核磁特征指纹图谱。对野生冬虫夏草、冬虫夏草野生抚育品和冬虫夏草伪品的核磁特征指纹图谱进行比较分析发现,野生冬虫夏草和冬虫夏草野生抚育品具有高度的相似性,4种冬虫夏草伪品的核磁特征图谱与野生冬虫夏草及冬虫夏草野生抚育品的核磁指纹图谱均存在不同程度的差异。比对结果也显示,冬虫夏草的核磁指纹图谱具有很强的特征性和专属性。野生冬虫夏草与冬虫夏草野生抚育品核磁指纹图谱具有良好的一致性,表明两种冬虫夏草的化学成分基本相同。

冬虫夏草菌丝体水提醇沉物体外抗肿瘤活性研究

目的研究冬虫夏草菌丝体水提醇沉物的体外抗肿瘤活性及其机制。方法采用热水浸提-醇沉法得到水提物,高效液相色谱仪测定水提醇沉物中腺苷的量;采用MTT法测定其抗肿瘤活性,利用流式细胞仪结合碘化丙锭染色法检测其对细胞周期的抑制。结果实验表明水提醇沉物能抑制人肝癌HepG2细胞株及大细胞肺癌NCI-H460细胞株的增殖,并呈浓度相关性;半数抑制浓度(IC50)值分别为(1.49±0.19)和(1.67±0.27)mg/mL。细胞周期分析表明,水提醇沉物分别阻滞HepG2及NCI-H460细胞周期于G2/M期、S期,并可诱导上述两种细胞发生凋亡。结论冬虫夏草水提醇沉物通过阻滞HepG2及NCI-H460细胞周期循环,诱导其凋亡,从而表现出良好的增殖抑制活性。为深入研究冬虫夏草菌丝体水提醇沉物抗肿瘤的机制提供了实验证据。