金银花粗多糖提取工艺优化及其抗氧化活性评价

采用热水提取法提取金银花多糖,通过单因素实验考察料液比、浸提时间、浸提温度和提取次数4个因素对多糖得率的影响,在此基础上利用响应面法对提取条件进行优化。以DPPH自由基、ABTS+自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力和总还原力为指标评价金银花粗多糖的抗氧化活性。结果表明:金银花多糖的最佳提取工艺条件为料液比1:30(g/mL)、浸提时间120 min、浸提温度70℃,此条件下多糖的实际得率为6.45%±0.15%,与预测值的相对误差为1.2%。当金银花粗多糖浓度为2 mg/mL时,DPPH自由基、ABTS+自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为88.56%、99.51%、46.40%和85.88%,总还原力为1.04。该方法制备的金银花粗多糖具有较好的抗氧化能力,这为金银花活性多糖的进一步分离、纯化及结构表征提供了理论依据。

金银花叶抑菌成分的提取及效果研究

研究金银花叶抑菌成分的最佳提取工艺和抑菌效果。以抑菌圈大小为评价指标,通过比较普通回流、超声提取、索氏提取三种方法的效果确定相对较佳提取方法,并在单因素的基础上采用正交试验优化提取工艺,采用梯度稀释法测定提取物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果表明,最佳提取工艺为采用普通回流提取,温度为70℃、乙醇体积分数为60%、料液比为1∶15 g/m L的条件下提取时间1.5 h,金银花叶乙醇提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为500μg/g和250μg/g,MBC分别为1 000μg/g和500μg/g。结论:采用普通回流提取法能较好地提取金银花叶抑菌活性成分,工艺稳定、可行。

忍冬干叶基因组DNA提取方法的研究

目的:从变色硅胶干燥的忍冬叶片中提取高质量的基因组DNA。方法:分别采用常规CTAB法与改良CTAB法提取干叶的DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、酶切检测其质量,并与鲜叶的提取效果比较。结果:改良CTAB法所得DNA优于常规CTAB法,电泳条带清晰,完整性好,纯度高,能被EcoRⅠ完全酶切。从变色硅胶干燥的忍冬叶片中提取的DNA质量与鲜叶无明显差异,且产率更高。结论:改良CTAB法适合忍冬干叶基因组DNA的提取。

金银花叶中黄酮类物质的提取工艺

目的研究金银花叶中总黄酮的最佳提取工艺。方法以乙醇为提取溶剂,分别采用温浸法和超声法从金银花叶中提取黄酮,并通过单因素考察和正交试验优化各自的工艺条件。结果在优化的工艺条件下,温浸法提取总黄酮的收率为11.5%,超声法的收率为15.0%。工艺为用20倍量的50%乙醇浸泡金银花叶12 h后,于50℃超声提取。结论从金银花叶中提取黄酮类化合物的较佳方法为超声波法。

响应面法对金银花叶中绿原酸提取工艺的优化

为了优化金银花(Lonicera japonica)叶中绿原酸醇浸水提工艺,通过单因素试验筛选pH、提取时间、乙醇体积分数等关键影响因素,以绿原酸得率为响应值设计响应面优化试验。结果表明,提取金银花叶绿原酸的最佳工艺为pH 4.5、提取时间25 min、浸析乙醇体积分数65%,该条件下绿原酸的得率可达6.856%。该工艺合理可行,可用于金银花叶中绿原酸提取的产业化生产。

复合酶辅助提取金银花叶中黄酮工艺和动力学研究

为了探索采用恒温水浴法从金银花(Lonicera japonica)叶中提取黄酮的最佳试验方法及条件,采用单因素试验考察了酶种类和加入量、搅拌速度、提取温度、金银花叶粉末粒度、提取时间等因素对黄酮提取率的影响,采用正交试验获得在复合酶存在下提取金银花叶中黄酮的最佳试验条件,并用常规动力学模型进行验证。结果表明,复合酶的加入有利于金银花叶中黄酮的提取,其最佳条件为80℃、纤维素酶和果胶酶各0.06 g、搅拌速度800 r/min、提取时间40 min。当提取温度低于353 K,常规提取受动力学控制;若提取温度高于353 K,过程将不再受动力学控制。

红腺忍冬叶不同溶剂提取物中咖啡酸和多糖的含量变化研究

[目的]研究红腺忍冬叶不同溶剂提取物中咖啡酸和多糖的含量变化。[方法]1采用HPLC法对红腺忍冬叶提取物中咖啡酸的含量测定进行回收率等方法学研究。2采用紫外-可见分光光度法对红腺忍冬叶提取物中多糖的含量测定进行回收率等方法学研究。3检测10批红腺忍冬叶水提物、50%乙醇提取物和95%乙醇提取物中咖啡酸和多糖的含量。[结果]1咖啡酸和多糖的线性范围分别为：0.10~0.70μg·m L-1（r=0.9999）和0.0025~0.0125mg·m L-1（r=0.9997）。重复性RSD均为0.54%（n=6）;平均加样回收率分别为98.01%和99.51%,RSD分别为1.30%和1.75%（n=9）。2红腺忍冬叶三种提取物中,只有水提物检测出咖啡酸,含量为4.547~246.776μg·m L-1。水提物多糖含量为1.302~4.437mg·m L-1,50%乙醇提取物多糖含量为0.359~2.16mg·m L-1,95%乙醇提取物多糖含量为0.179~0.439 mg·m L-1。且同一批次红腺忍冬叶中,多糖含量均为水提物〉50%乙醇提取物〉95%乙醇提取物。[结论]咖啡酸和多糖含量均在红腺忍冬叶水提物中最高,多糖含量在95%乙醇提取物中最低。

金银花叶提取物的抑菌效果研究

对金银花叶提取物的抗菌作用进行了初步研究,结果表明:金银花叶提取液对供试的几种主要危害食品卫生、安全和对临床医学等具有重要影响的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、青霉、黑曲霉、黄曲霉和酿酒酵母等均有一定抑制作用,金银花叶中的黄酮类提取物对各敏感供试菌的最低抑菌浓度分别是125、62.5、250、1000、250、62.5、250和250μg/g;金银花叶中的绿原酸类提取物对各敏感供试菌的最低抑菌浓度分别是250、250、500、2000、500、125、500和500μg/g。

金银花叶提取物对奇异变形杆菌抑菌作用的研究

目的:研究金银花叶水、醇提取物对奇异变形杆菌抑菌作用的影响。方法:采用麦康凯培养基对患烂皮病棘胸蛙胃肠细菌进行分离及其鉴定;试管法测定金银花叶水、醇提取物的最低抑菌浓度;抑菌圈法比较抑菌能力的大小。结果:金银花叶醇提物和水提物的最低抑菌浓度分别为15.3和31.3 mg/m L,金银花叶醇提物的抑菌作用大于水提物。结论:金银花叶水、醇提取物有较好的抑菌作用,提示金银花叶作为抗菌中药资源,可应用于水产养殖业。

山银花叶中绿原酸水提工艺研究

研究以水为溶剂提取山银花叶中绿原酸的最佳工艺条件,实现山银花叶的经济价值。通过单因素试验研究各因素对绿原酸提取率的影响,应用正交试验优化工艺条件。单因素实验结果表明:分别在提取温度100℃、pH 3、提取时间1.5 h、料液比1:16的条件下山银花叶绿原酸得率最高;而正交试验结果表明:水提取山银花叶绿原酸最佳工艺条件为提取温度为100℃、pH 4、提取时间1 h、料液比1:18,且在最佳条件下,绿原酸提取率为2.83%。正交试验可弥补单因素试验的不足,提高山银花叶中绿原酸的得率,此法简单、可行、经济、适用、环保,适于工业化大生产。

金银花叶提取物对棘胸蛙烂皮病治疗效果的探讨

研究了金银花(Lonicera japonica)叶不同溶剂提取物对棘胸蛙(Rana spinosa)烂皮病治疗效果的影响。首先制备金银花叶的水提物与醇提物,分别用终浓度为16 mg/m L的水提物和醇提物浸浴患病蝌蚪,比较蝌蚪的存活量和平均体重。结果表明,金银花叶醇提物治疗组的蝌蚪存活数量远高于金银花叶水提物治疗组。说明金银花叶的醇提物对患病蝌蚪有较好的治疗效果。

金银花多糖提取工艺优化

响应面法优化金银花多糖水提工艺,考察提取时间、液料比、提取次数对提取率的影响。结果表明,金银花多糖提取最优化工艺参数为:液料比12 mL/g,提取次数3,提取时间116 min,金银花多糖提取率为3.01%。

微滤法澄清枳实、苦参和金银花中药水提液的研究

目的考察微滤法澄清枳实、苦参和金银花中药水提液的效果。方法对枳实、苦参和金银花中药水提液采用Al2O3陶瓷微滤膜进行微滤,对水提液在固形物、性状、膜通量、指标成分等方面微滤前后的变化进行比较分析。结果中药水提液微滤前均为浑浊液体,微滤后成为颜色变浅的澄清透明液体,有效成分保留率为77%~84%,总固形物去除率为36%~40%。结论陶瓷膜微滤技术对枳实、苦参和金银花中药水提液具有较好的澄清除杂效果。

金银花叶和花蕾提取物的抑菌活性研究

主要研究金银花叶和花蕾提取物的抑菌活性。采用超声波法提取金银花叶和花蕾有效成分,琼脂扩散法测定提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌和枯草杆菌的抑菌效果,体积倍稀释法测定提取物最高抑菌稀释度。试验结果表明,金银花叶和花蕾提取物对4种常见细菌都有抑菌作用,对所试细菌的抑菌活性有显著性差异。金银花叶提取物对供试菌的抑菌活性大于金银花蕾的。

金银花中绿原酸的水提取工艺研究

以水为溶剂,采用煎煮法、回流法、超声法三种提取方法对金银花中绿原酸的提取工艺进行研究。结果表明,相比于煎煮法和超声提取,回流法的绿原酸得率显著高于其他两种提取方法(P<0.05)。以绿原酸相对提取率为评价指标,在单因素试验的基础上,选取液料比、提取温度以及提取时间为因素,采用L_(9)(3^(4))正交试验法对该提取工艺进行优化。结果表明,绿原酸水提回流法提取的最佳条件:液料比为25 mL·g^(-1),提取温度为75℃,提取时间为60 min,提取次数为2次,在此条件下,绿原酸的相对提取率为97.22%±0.84%。以上研究结果为金银花绿原酸的提取提供了一种绿色、简便与高效的方法。

浸泡时间对金银花7种成分水提效果的影响

为探究不同浸泡时间对金银花水提液中有机酸类成分的影响,金银花浸泡0、30、60、90 min,80、95℃提取,采用高效液相色谱法测定7种有机酸类成分的含量变化。结果表明绿原酸在浸泡30 min后提取效果最好,獐牙菜苷在浸泡90 min后提取效果最好,隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C均为:直接提取>浸泡30 min>浸泡90 min和浸泡60 min,绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C在95℃提取效果比80℃时好,异绿原酸A在80℃下提取效果比95℃时好。结果表明,浸泡对金银花中各有机酸成分均有不同程度的影响,浸泡30 min后95℃提取90 min的提取条件既能保证金银花中较高的有机酸提取量又能保证生产效率,适当的浸泡能够加快提取进程,提高得率,降低加热提取长时间的耗能。

金银花干叶总黄酮提取工艺研究

文章以乙醇为溶剂,采用超声波法从金银花干叶中提取黄酮。通过单因素考察和四因素三水平的正交试验筛选出最佳工艺条件是以70%乙醇为溶剂、物料比1∶10,超声波温度60℃提取30 min,总黄酮含量10.00 mg/g。金银花各部位的总黄酮含量测定结果显示,金银花干花的黄酮含量比干枝、干叶和鲜枝、鲜叶高约4-6倍。

红腺忍冬叶水提物抗氧化作用研究

目的研究红腺忍冬叶水提物的抗氧化作用,为红腺忍冬叶的开发利用奠定科学依据。方法对红腺忍冬叶水提醇沉法分离所得各部分的样品进行体内、体外抗氧化研究。以Vc、二丁基羟基甲苯（BHT）为对照品,通过DPPH法和铁离子还原法考察红腺忍冬叶不同样品的体外抗氧化活性。以Vc为阳性对照,由D-半乳糖（1 g·kg？1）致衰的小鼠为动物模型,通过测定血清、肝脏组织中SOD、GSH-PX活性和丙二醛（MDA）含量,考察样品的体内抗氧化活性。结果红腺忍冬叶水提醇沉分离所得各部分体外抗氧化活性,在0.1-5 mg·m L-1内,90%乙醇直接沉淀物、30%乙醇沉淀物以及滤液部分具有较好的抑制DPPH自由基的活性和铁还原能力。体内SOD活性影响实验表明,30%乙醇沉淀物高剂量组、90%乙醇直接沉淀物低剂量组对提高小鼠体内SOD活性均有良好的效果,且都略优于Vc,但无显著性差异。体内GSH-PX活性影响实验表明,30%乙醇沉淀物高剂量组、90%乙醇直接沉淀物高剂量组和90%乙醇直接滤液低剂量组为佳。体内MDA含量影响实验表明,30%乙醇沉淀物高、低剂量组和30%乙醇滤液高剂量组以及90%乙醇直接沉淀物低剂量组降低MDA含量的作用最为显著。结论红腺忍冬叶水提液进一步醇沉分离所得各部分都具有不同程度的抗氧化效果,综合考虑以30%乙醇沉淀物活性最佳,值得进一步研究。

金银花露与水提液共制备过程中的成分变化规律研究

目的:为提高金银花资源利用率和生产效率,建立金银花露和金银花水提液的共制备方法,探讨共制备过程中的多种水溶性成分及挥发性成分的变化规律。方法:组装共制备提取装置,分别选用料液比为1:30、1:40、1:50,制备时间为3 h,水提液和金银花露在不同时间点分别取样,采用高效液相色谱法(HPLC)测定水提液中主要成分的含量变化,采用顶空-固相微萃取-气质联用(SPME-GC-MS)法考察金银花露中挥发性气体成分的变化规律。结果:新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、獐牙菜苷、异绿原酸B的含量均呈现逐渐增加的趋势,异绿原酸A的含量逐渐减少,异绿原酸C先增加后减少;综合考虑采用1:50的料液比,共制备时间为90 min,既能保证金银花露与水提液较好的提取率又能保证生产效率。该研究创新了金银花饮品的原料生产方式,为相关工艺改进提供理论依据及技术支持。

金银花水提物改善非酒精性脂肪性肝炎的探索

目的:探讨金银花水提物(FL)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的改善作用及其机制。方法:采用蛋氨酸胆碱缺乏饲料(MCD)喂养C57BL/6小鼠6周,第3周开始连续灌胃给药0.2、0.4 g·kg^(-1)FL至实验结束。检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)与天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活力;进行肝脏病理苏木素-伊红(HE)染色分析;测定肝组织中甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(NEFA)的含量;测定肝组织中髓过氧化物酶(MPO)活力;利用天狼星红和Masson染色观察肝组织中胶原沉积情况,并测定肝脏羟脯氨酸(HYP)含量。利用网络药理学分析并结合实验验证FL改善NASH的潜在机制;应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织中炎症相关因子、纤维化相关因子的mRNA的表达;同时采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血清中热休克蛋白60(HSP60)的释放和肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:FL(0.2、0.4 g·kg^(-1))可以降低MCD诱导的小鼠NASH模型中升高的血清ALT、AST及肝组织中MPO活力及HYP含量。网络药理学结果提示FL可能是通过影响胶原等细胞外基质及炎症反应等生物过程来改善NASH,核转录因子-κB(NF-κB)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和热休克蛋白等信号通路可能参与其中。FL(0.2、0.4 g·kg^(-1))可以减少炎症及纤维化相关分子mRNA水平的升高,0.4 g·kg^(-1)FL可以减少血清中HSP60的释放并降低肝脏中α-SMA的蛋白表达。结论:FL可以通过降低炎症,减少胶原沉积、抑制HSC激活来改善NASH。