灰树花水溶物对EV71病毒的抑制作用

【目的】探讨灰树花水溶物(GFWE)的化学成分及其对EV71病毒的抑制作用,为促进灰树花综合利用、提高其经济附加值,以及开发预防和治疗EV71病毒感染的功能性食品提供依据。【方法】采用色谱法测定了GFWE的主要化学成分组成、多糖组成和分子质量。基于体外细胞培养采用CCK-8法确定了GFWE的安全上样量;以EV71病毒感染Vero细胞为模型,探究GFWE对EV71病毒的抑制率及对Vero细胞形态的影响,并采用荧光定量PCR检测了EV71病毒衣壳蛋白(VP1)编码基因mRNA的表达水平,初步评价了GFWE对EV71病毒的抑制作用。【结果】GFWE主要由低分子质量多糖、氨基酸、肽及其衍生物组成。GFWE富含的13种氨基酸中包含7种必需氨基酸;其多糖由葡萄糖、半乳糖、盐酸氨基葡萄糖和古罗糖醛酸4种单糖组成,物质的量比为0.907∶0.038∶0.029∶0.026,重均分子质量分别为15.67、10.10、6.60 ku和<1.00 ku。GFWE表现出较高的抗EV71病毒活性,100、200μg·mL^(-1) GFWE对EV71病毒的抑制率分别为91.32%、91.83%,25~400μg·mL^(-1) GFWE能显著降低EV71 VP1 mRNA的表达水平。【结论】GFWE主要由低分子质量多糖、氨基酸、肽及其衍生物组成,具有较高的抗EV71病毒活性,能够抑制感染EV71病毒的Vero细胞中VP1的合成。

灰树花可溶固形物提取工艺探究

在热水提取条件下,研究灰树花可溶固形物提取工艺。通过考查子实体形态、干燥方式对灰树花可溶固形物提取率的影响,再以提取温度、提取时间、料液比、浸洗次数开展单因素试验及正交试验,筛选最佳热水提取工艺。结果表明灰树花菌盖部分的开片程度越高,越利于可溶固形物的溶出。影响灰树花可溶固形物提取率高低的干燥方式依次为鼓风干燥>冷冻干燥>微波干燥。灰树花可溶固形物的最佳热水提取工艺为,鼓风干燥预处理,提取温度70℃,料液比1∶20,提取时间2.5 h,pH自然,浸洗1次。最佳工艺下灰树花可溶固形物提取率达到54.74%。

灰树花水上清液中不同极性提取物的功能成分及其抗氧化活性

分别采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水不同极性溶剂提取灰树花水提上清液,比较不同极性提取物的主要功能成分及利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)、羟基(OH)自由基3种方法比较抗氧化活性。结果表明,正丁醇提取物的多酚和蛋白质含量最高,分别为0.36%和38.75%;石油醚和乙酸乙酯提取物中黄酮含量最高,均为0.05%;石油醚提取物的三萜、甾醇含量最高,分别为6.32%和15.88%;水提取物中多糖含量最高,为30.11%。正丁醇提取物具有最强的抗氧化活性,多酚是主要起抗氧化活性的成分。通过高效液相色谱质谱联用法(LC-MS)鉴定了13个多酚及其衍生物。本研究为灰树花功能性食品或保健品的开发提供了理论依据。

灰树花水提物的提取及其抑菌功能

为研究水溶液提取灰树花营养成分,采用水溶液对灰树花多糖进行了单因素及正交实验提取,用苯酚-硫酸法对多糖进行了测定。并用滤纸片法研究了灰树花水提物的抑菌能力。正交实验结果表明,影响灰树花多糖提取率的因素大小顺序依次是:温度、液料比、提取时间。灰树花多糖的提取最优条件为:温度80℃、液料比60∶1(mL∶g)、提取时间2.0h。灰树花水提物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有不同程度的抑制作用,抑菌圈直径分别为8.74、10.23、12.42mm。

灰树花子实体中水溶性碳水化合物的提取与纯化

灰树花中含有丰富的碳水化合物,本文在不同温度下分别提取灰树花中的低聚糖和多糖,以研究灰树花中水溶性碳水化合物的种类和含量。30℃提取低聚糖,浸提液先进行脱盐、脱色处理后,再经Sephadex G-25凝胶过滤得单一物质,核磁鉴定为海藻糖,含量占干重的10.89%。因30℃提取后,离心得到的渣相中碳水化合物的含量仍然很高(约30%),为充分利用原料,30℃处理后的渣相再用130℃高温提取多糖,多糖得率为3.42%(占干重),经Sephadex G-75凝胶过滤分离,得到2种组分,相对分子质量分别为300 k Da和16 kDa。采用扫描电镜观察原料和渣相(130℃处理)的表面结构,直观地分析多糖提取后物料表面的微观形态及空间构象的变化,实验结果表明:与原料相比,经高温处理的灰树花残渣呈疏松多孔状,直观反映出可溶性碳水化合物在灰树花中所处位置。

两产地栗蘑多糖的含量测定研究

[目的]测定并分析比较2个不同产地的栗蘑多糖含量。[方法]采用高温高压水提乙醇沉淀法分别提取迁西栗蘑和浙江栗蘑多糖,并采用紫外可见分光光度计测定其含量,经苯酚-硫酸显色反应后于波长490 nm处进行测定。[结果]试验得出,迁西栗蘑多糖含量为6.54%,浙江栗蘑为3.41%。表明两地的栗蘑由于其人工栽培条件、生长环境及采摘时机等因素不同导致多糖含量具有明显的差异。[结论]研究可为栗蘑内在质量评价以及规范化种植提供参考依据。