昆仑雪菊水溶性黄酮的制备及初步鉴定

目的:考察昆仑雪菊水溶性总黄酮的制备及初步定性分析方法。方法:经热水提取并以正丁醇萃取法制备总黄酮提取物;利用薄层色谱法和化学定性分析法进行初步的色谱和化学鉴定。结果:以正丁醇-醋酸-水(4∶1∶5)为展开剂的薄层色谱结果显示,水提物经正丁醇萃取后,大部分黄酮类成分被转移至正丁醇层;化学定性分析结果显示,雪菊花水溶性黄酮主要包括黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、查耳酮及异黄酮类化合物。结论:本研究的实验方法可用于昆仑雪菊水溶性总黄酮的制备、化学结构分析及质量标准研究。

雪菊花黄酮分散片的处方工艺研究

对雪菊花黄酮分散片的处方工艺进行优化,以崩解时间、片剂表面形态或软材制备情况为考察指标,通过单因素以及正交试验,考察不同辅料的种类及用量对雪菊花黄酮分散片的影响,确定最佳处方。结果表明,最佳处方工艺为25%雪菊花提取物,64%微晶纤维素(MCC),5%交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP),5%低取代羟丙基纤维素(L-HPC)和1%硬脂酸镁,其崩解时间为(63±5)s。采用此工艺所制备的雪菊花黄酮分散片溶出度高,分散均匀性好,质量可控,满足速释的要求,具有一定的开发和利用价值。

昆仑雪菊水溶性黄酮提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

为探讨昆仑雪菊水溶性黄酮提取物(water soluble flavonoids from Coreopsis tinctoria flowers,CTWF)对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的影响,以SPF级昆明种小鼠为实验对象,随机分为正常组、衰老模型组、VE组(50 mg/(kg·d))和CTWF低、高剂量组(150、600 mg/(kg·d))。除正常组皮下注射生理盐水外,其余各组均注射D-半乳糖(300 mg/(kg·d)),连续42 d造模,注射1 h后,药物组分别灌胃VE和不同剂量CTWF,正常组和模型组灌胃等量生理盐水。采用Morris水迷宫测试各组小鼠学习记忆能力,并测定小鼠脑组织乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)含量,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果表明:CTWF能够显著提升衰老模型小鼠的学习记忆能力(P<0.05),并显著提高脑组织SOD、GSH-Px活力和Ach含量(P<0.05),降低AchE活力和MDA含量(P<0.05)。因此,CTWF具有明显改善衰老模型小鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与提高脑组织胆碱能系统功能和减少自由基损伤有关。

昆仑胎菊水溶性黄酮提取工艺优化及其对衰老小鼠肝组织SIRT1、p53表达的影响

采用水溶剂法提取昆仑胎菊水溶性黄酮(water-solubleflavonoids from Coreopsis tinctoria buds,CBF)。在单因素试验的基础上,以提取液中总黄酮提取量为指标,响应面法优化得到CBF提取最优工艺:水提时间15 min、水提温度96℃、液料比71∶1(mL/g),在此条件下水溶性总黄酮提取量可达到145.45 mg/g。探讨CBF对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用及其对衰老小鼠肝组织中沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、p53蛋白表达的影响。以长期皮下注射D-半乳糖(300 mg/(kg·d))建立衰老小鼠模型,连续造模45 d,建模的同时分别灌胃VE(50 mg/(kg·d))、CBF(180、700 mg/(kg·d)),观察各组小鼠体质量变化及行为学状态,HE染色法观测肝组织病理形态学变化,并采用免疫印迹法评价衰老小鼠肝组织中SIRT1、p53蛋白的表达。结果表明,CBF对小鼠生长发育无不良影响且可改善衰老小鼠的行为状况;显著减轻D-半乳糖引起的肝组织病理学损伤;显著提升衰老小鼠肝组织中SIRT1蛋白表达(P<0.05),有效抑制D-半乳糖引起的p53蛋白过量表达(P<0.05)。结论:响应面法建立的回归数据模型优化得到的CBF水提取工艺条件实际有效,同时发现CBF具有良好的抗衰老作用,其作用机理可能与激活SIRT1/p53信号通路有关。

随机质心映射优化法对新疆雪菊中黄酮和多酚提取工艺的研究

采用随机质心优化设计研究了新疆雪菊中黄酮和多酚类化合物的亚临界水提取工艺。实验结果表明，亚临界水可有效地提取雪菊中的黄酮和多酚类物质，通过对提取温度、料液比和提取时间三个因素的优化和验证，获得了亚临界水的最佳提取工艺条件为：提取温度160～170℃、料液比0．04、提取时间47min。在该条件下，雪菊黄酮和多酚总含量达到了25．85％以上，其中，总黄酮的含量大于15．81％，总多酚的含量大于10．04％。随机质心优化法可以不进行单因素实验直接优化实验参数，具有优化过程简单，实验次数少、广泛的适应性等特点，而亚临界水同时提取多酚和黄酮的工艺完全避免有机溶剂和酸的使用，是高效、无毒、环保的绿色提取技术。

响应面法优化金花葵花水溶性黄酮和总多糖提取工艺

本实验以水溶性黄酮和多糖提取量为指标,考察提取方式、提取时间、提取温度和料液比对金花葵花中水溶性黄酮和多糖提取量的影响。在单因素实验的基础上,采用响应曲面法优化工艺条件,并利用高效液相色谱对金花葵花中黄酮和多糖类成分进行定性分析。结果表明,相比于其他方法,浸泡法操作简单,成本低,避免了长时间受热破坏生物活性成分。浸泡法提取金花葵花中水溶性黄酮和多糖的最佳工艺为:提取时间240 min,提取温度90℃,料液比为1∶270,在此条件下,水溶性黄酮和多糖的提取量分别达到为(43.23±0.56)、(134.60±1.45) mg/g,实测值与响应曲面回归模型预测值之间的相对误差分别为0.44%和0.69%。金花葵花中黄酮类化合物主要有芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷和杨梅素,其中棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷含量最高,多糖主要由鼠李糖、葡萄糖和半乳糖组成,同时含有少量的岩藻糖、阿拉伯糖和甘露糖。

新疆昆仑雪菊水溶性总黄酮的含量测定

目的建立检测新疆昆仑雪菊中水溶性总黄酮含量的方法。方法以芦丁为对照品,用分光光度计进行全波长扫描并在510nm波长处测定吸光度,计算总黄酮含量。结果昆仑雪菊总黄酮在0.008-0.080mg.mL-1浓度范围内具有良好的线性关系,方法操作简便,重现性好,r=0.9999,平均加样回收率92.80%,RSD为1.91%(n=9),总黄酮平均含量为18.62%。结论昆仑雪菊总黄酮含量较高;该实验方法可适用于昆仑雪菊及其制剂的质量控制。

质量权重系数法整体表征雪菊黄酮提取物性质及其磷脂复合物的制备研究

目的 研究雪菊黄酮理化性质,优化雪菊黄酮磷脂复合物制备工艺。方法 以马里苷、木犀草素、槲皮万寿菊苷为指标成分,测定雪菊黄酮的平衡溶解度和油水分配系数,并通过质量权重系数整体表征药物性质;采用层次分析法(AHP)对雪菊黄酮磷脂复合物复合率赋权,设计Box-Behnken响应面试验,优化制备工艺。结果 雪菊黄酮在pH 1.0 ~ 8.0缓冲液和水中的平衡溶解度为0.056 6 ~ 1.861 5 mg/mL,为低溶解性药物,在pH 1.0 ~ 6.0溶液中LogP > 0,易透过胃和十二指肠等上消化道,为高渗透性药物;雪菊黄酮磷脂复合物最优工艺中无水乙醇为反应溶剂,脂药比为3∶1,药物浓度为0.5 mg/mL,反应温度为40 ℃,反应时间为2.0 h,复合率为(96.26±2.71)%,与预测值相比偏差< 3.00%。结论 雪菊黄酮为BCSⅡ类药物,制备为磷脂复合物,工艺稳定可行,可为BCSⅡ类药物设计提供参考。