人参果多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

通过水提法得到人参果中的总多糖(WGBP),并通过离子交换层析对WGBP进行分离纯化,得到一个中性糖WGBP-N和三个酸性糖级分(WGBP-1、WGBP-2、WGBP-3)。利用高效液相色谱及分子筛层析法对各个级分的单糖组成、分子量等进行了分析,并对结构特点进行了概括。通过DPPH和羟自由基清除实验分析了各级分的抗氧化活性。结果表明,WGBP主要由鼠李糖(rhamnose,Rha)、半乳糖醛酸(galacturonic acid,Gal A)、半乳糖(galactose,Gal)、阿拉伯糖(arabinose,Ara)和葡萄糖(glucose,Glc)组成,分子量分布广泛。WGBP-N主要由Gal、Ara和Glc组成,比例为62.7∶17.0∶17.1。三个酸性糖主要由不同比例的Rha、Gal A、Gal和Ara构成。WGBP具有明显的DPPH·和羟自由基清除活性,且清除率随浓度的升高而逐渐增强。当WGBP浓度为2.0 mg/m L时,DPPH·清除率为62.7%;当浓度为0.2 mg/m L时,羟自由基清除率为81.2%。WGBP对DPPH·和羟自由基清除活性优于四个子级分。

人参果多糖对人舌鳞癌CAL27细胞增殖的抑制作用及其机制

目的:探讨人参果多糖对人舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌)CAL27细胞的抑制作用,阐明其潜在的作用机制。方法:采用水提醇沉法提取水溶性人参果多糖(WGBP),高效液相色谱法(HPLC)对其单糖组成成分进行分析。将人舌鳞癌CAL27细胞分为对照组和不同浓度(1、2和5 g·L^-1)WGBP组。继续培养24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖率,流式细胞术检测各组细胞周期和细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达量。结果:WGBP主要由半乳糖和半乳糖醛酸组成,而阿拉伯糖和葡萄糖次之,再次为鼠李糖和甘露糖。与对照组比较,1、2和5 g·L^-1 WGBP组CAL27细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性。流式细胞术检测,与对照组比较,2和5 g·L^-1 WGBP组S期CAL27细胞百分比明显降低(P<0.05或P<0.01),G 2/M期细胞百分比明显升高(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性。与对照组比较,1、2和5 g·L^-1 WGBP组CAL27细胞凋亡率明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性。Western blotting法检测,与对照组比较,1、2和5 g·L^-1 WGBP组CAL27细胞中pro-Caspase-3和pro-PARP蛋白表达量明显升高。结论:WGBP能通过诱导G 2/M期阻滞和激活Caspase-3引起级联反应,诱导细胞凋亡,从而抑制人舌鳞癌CAL27细胞增殖。