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Comparison of the Two Chromosome Forms of Paragonimus Westermani Using DNA Restriction Fragment Size and DNA Hybridization
1
作者 王恩荣 郑韧坚 george D.Cain 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第S2期24-28,共5页
Restriction enzyme digestion of total genomic DNA of two chro-mosome type Paragonimus westermani showed the presence of homologus highlyrepeated DNA in diploid and triploid forms. Southern blot analysis providedfurthe... Restriction enzyme digestion of total genomic DNA of two chro-mosome type Paragonimus westermani showed the presence of homologus highlyrepeated DNA in diploid and triploid forms. Southern blot analysis providedfurther evidence that the distribution of restriction enzyme sites (with 3enzymes) on repeated DNA of both was similar. But with Pst Ⅰ、Dde Ⅰ、Hae Ⅲand Hpa Ⅱ. They revealed polymorphism which also occured individually ineach form tested separatedly with hybridization technique. Mutation of recog-nize sites by enzymes, which is resulted from the alternation of gene sequance,has occured during evolution. Additionally, it is probably possible, based on PstⅠand Dde Ⅰdigest pattern to distinguish between diploid and triploid Parag-onimus westermani and group the Paragonimus simply and rapidly. 展开更多
关键词 PARAGONIMUS westermani CHROMOSOME form DNA HYBRIDIZATION DNA RESTRICTION FRAGMENT
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Experimental observation of effects of triclabendazole on Paragonimus westermani infection in dogs
2
作者 刘约翰 高劲松 +2 位作者 王小根 余登高 苏群 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期58-61,共4页
Objective To observe the therapeutic effects of triclabendazole in the treatment of dogs with Paragonimiasis westermani. Methods Six dogs were experimentally infected, each with 100 metacercariae of Paragonimus... Objective To observe the therapeutic effects of triclabendazole in the treatment of dogs with Paragonimiasis westermani. Methods Six dogs were experimentally infected, each with 100 metacercariae of Paragonimus westermani intraperitoneally and divided into untreated and treated groups, 3 dogs were treated orally with triclabendazole 100 mg/kg·d 1 for 2 consecutive days on day 170 after infection. Stool egg count was done by Stoll method. All dogs were killed on day 38 after treatment and the number of worm cysts and worms in the lungs were examined by naked eye and microscopically. Results Stool eggs became negative from day 7 to day 14 after starting chemotherapy in treated dogs. The numbers of worm cysts in the lungs of untreated dogs were 18, 24 and 24 on necropsy,while those in the treated dogs were 10, 7 and 4, respectively. The numbers of adult worms in the untreated dogs were 38, 51 and 42, while in the treated dogs only 2 small adult worms were found in one dog and no worm was found in the other two dogs. The mean worm reduction rate was 98.5%. Conclusion Triclabendazole is highly effective against Paragonimus westermani in experimentally infected dogs. 展开更多
关键词 Paragonimus westermani TRICLABENDAZOLE METACERCARIAE PRAZIQUANTEL
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三氯苯达唑对卫氏并殖吸虫体壁及卵黄细胞超微结构的影响 被引量:12
3
作者 许世锷 陈彩云 +2 位作者 金立群 陆秀君 陈家俊 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期342-345,共4页
目的: 观察三氯苯达唑在体内外杀灭卫氏并殖吸虫后, 虫体体壁及卵黄细胞超微结构的变化。方法:将被药物在体内、外杀死的虫体及对照组正常虫体, 按常规方法制成电镜样品, 用扫描和透射电镜观察。结果: 在药物作用下, 体壁的外质... 目的: 观察三氯苯达唑在体内外杀灭卫氏并殖吸虫后, 虫体体壁及卵黄细胞超微结构的变化。方法:将被药物在体内、外杀死的虫体及对照组正常虫体, 按常规方法制成电镜样品, 用扫描和透射电镜观察。结果: 在药物作用下, 体壁的外质膜及基质层裂解消失, 肌肉层有不同程度的坏死, 皮层细胞膜及卵黄细胞膜破坏消失,核膜部份破坏, 核内异染色质凝固、聚边、直至溶解。胞质内的高尔基体消失, 内质网扩张, 线粒体肿胀变性、直至溶解,但对糖原颗粒无明显影响。对体内虫体的破坏比体外严重。结论: 三氯苯达唑对卫氏并殖吸虫的体壁及卵黄细胞均有明显的破坏作用, 主要破坏细胞核、细胞的膜质结构以及微管系统, 并可使虫体皮层裂解消失。 展开更多
关键词 三氯苯达唑 卫氏并殖吸虫 体壁 卵黄细胞
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二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫同工酶谱的发育变异及其分类学意义 被引量:8
4
作者 吴信忠 李树华 苗素英 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1997年第3期263-270,共8页
采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳(verticalPAGE)法分析比较了二倍体(2n)型与三倍体(3n)型卫氏并殖吸虫童虫、成虫的醛缩酶(ALD)、已糖激酶(HK)和葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)的同工酶谱,结果显示2... 采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳(verticalPAGE)法分析比较了二倍体(2n)型与三倍体(3n)型卫氏并殖吸虫童虫、成虫的醛缩酶(ALD)、已糖激酶(HK)和葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)的同工酶谱,结果显示2n型与3n型卫氏并殖吸虫在不同发育期之间及两型吸虫相应各发育期之间ALD、HK及G6PD同工酶谱均显示变异,变异表现为两种方式,一种是在同一个基因座位区的同工酶的酶带数目、迁移位置及活性发生变异;另一种是两型吸虫在有的发育期整个基因座位区无酶带显示。两型吸虫发育同工酶谱的差异反映了两型吸虫在发育进程中编码同工酶的基因遗传背景的差异。这一结果支持了两型卫氏并殖吸虫可为两个独立虫种的观点。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 同工酶 发育 二倍体 三倍体 变异
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卫氏肺吸虫重组抗原的制备及初步应用研究 被引量:8
5
作者 侯敏 刘剑南 +3 位作者 姚永伟 褚宏亮 张耀娟 章子豪 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期467-469,514,共4页
目的纯化重组细菌Pw鄄1/pRSETB/BL21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景。方法通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液... 目的纯化重组细菌Pw鄄1/pRSETB/BL21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景。方法通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液相层析纯化,比较前后两法的纯化效果。初步纯化产物经氧化/还原型谷胱苷肽复性后即为重组蛋白抗原(以下简称重组抗原)。用该重组抗原,以ELISA法检测肺吸虫、血吸虫、肝吸虫、囊虫和包虫病患者以及正常人血清中相应抗体,并与卫氏肺吸虫粗抗原做比较。结果经分步洗涤及透析纯化后的重组抗原纯度已较高,快速液相层析进一步纯化效果不明显。以初步纯化后经复性的重组抗原进行ELISA法检测肺吸虫病患者血清,敏感性为91.07%,与其他寄生虫病患者和正常人血清均无交叉反应;粗抗原检测肺吸虫病患者血清敏感性虽为100%,但与其他寄生虫病患者和正常人血清交叉反应率分别为血吸虫病11.43%,肝吸虫病4.84%,囊虫病3.22%,包虫病5.88%,正常人为2.5%。结论研究制备的重组抗原应用于肺吸虫病的免疫诊断特异性较高。 展开更多
关键词 卫氏肺吸虫 重组抗原 纯化 ELISA
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卫氏并殖吸虫基因片段的克隆与鉴定 被引量:4
6
作者 凌家俭 侯敏 +2 位作者 刘剑南 章子豪 张耀娟 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期144-146,共3页
目的 从卫氏并殖吸虫成虫cDDA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆入表达载... 目的 从卫氏并殖吸虫成虫cDDA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆入表达载体pRESETB,并转化大肠杆菌BL-21细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。结果 所筛选的阳性克隆插入片段约800bp。DNA序列分析显示其为编码半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L的基因序列。Pw-2重组子特异性表达产物约为32kDa,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异地识别。结论 从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库筛选的重组质粒Pw-2编码属于半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 基因片段 克隆 鉴定 重组蛋白
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卫氏并殖吸虫染色体制备方法的改进 被引量:4
7
作者 陈韶红 常正山 +2 位作者 陈名刚 张永年 冯正 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期155-157,共3页
目的 改进卫氏并殖吸虫染色体的制备方法 ,以利于并殖吸虫染色体核型的分析。 方法 将浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫成虫通过秋水仙胺作用后分离睾丸 ,所用试剂均进行预温 ,通过低渗、固定、制片和染色等处理。 结果 浙江永嘉地区卫氏... 目的 改进卫氏并殖吸虫染色体的制备方法 ,以利于并殖吸虫染色体核型的分析。 方法 将浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫成虫通过秋水仙胺作用后分离睾丸 ,所用试剂均进行预温 ,通过低渗、固定、制片和染色等处理。 结果 浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫染色体采用改进后的制备方法 ,效果好。该虫染色体数 2n =2 2 ,核型公式 :2m +6sm +1 4t。 结论 改进后的染色体制备方法操作简便 ,染色体清晰 ,可读性好 ,便于进行核型分析。 展开更多
关键词 制备方法 卫氏并殖吸虫 染色体 核型
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日本血吸虫卵与卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原内的共同抗原组分研究 被引量:12
8
作者 曾庆仁 张悟澄 +2 位作者 陈翠娥 聂崇兴 刘多 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期31-34,共4页
应用凝胶电泳和免疫印斑技术对日本血吸虫卵与卫氏并殖吸虫成虫的水溶性抗原(JSEA、PAA)和尿素溶性抗原(JEA-u、PAA-u)进行了抗原蛋白组分比较分析。结果显示:两者的特异性抗原显色主带,JSEA、JEA-u分别有8条和3条,PAA、PAA-u分别有9条... 应用凝胶电泳和免疫印斑技术对日本血吸虫卵与卫氏并殖吸虫成虫的水溶性抗原(JSEA、PAA)和尿素溶性抗原(JEA-u、PAA-u)进行了抗原蛋白组分比较分析。结果显示:两者的特异性抗原显色主带,JSEA、JEA-u分别有8条和3条,PAA、PAA-u分别有9条和2条;其中JSEA、JEA-u分别有1条和2条,PAA、PAA-u分别有1条和2条对异种抗血清呈现交叉反应显色带。表明两种吸虫的可溶性抗原均存在共同抗原组分。慢性血吸虫病患者血清与并殖吸虫成虫抗原的交叉反应仅见于PAA,而未见于PAA-u,提示PAA-u在避免交叉反应和抗原纯化方面比PAA较为优越。 展开更多
关键词 血吸虫卵 并殖吸虫成虫 免疫印斑
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浙江省金华地区并殖吸虫自然宿主调查及虫种鉴定 被引量:5
9
作者 楼宏强 胡野 +4 位作者 金耀建 余新图 王岚 何旭英 屠平光 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期348-352,共5页
目的调查浙江省金华地区并殖吸虫自然中间宿主和终宿主感染情况,并确定并殖吸虫虫种地位。方法采用整群随机抽样法,在金华市的9个区(县)中,各随机抽取3个乡镇(街道),共27个调查点。现场采集标本,剖检淡水螺类,检查并殖吸虫尾蚴感染情况... 目的调查浙江省金华地区并殖吸虫自然中间宿主和终宿主感染情况,并确定并殖吸虫虫种地位。方法采用整群随机抽样法,在金华市的9个区(县)中,各随机抽取3个乡镇(街道),共27个调查点。现场采集标本,剖检淡水螺类,检查并殖吸虫尾蚴感染情况。以双筛水洗法检查溪蟹并殖吸虫囊蚴感染情况。从囊蚴检查阳性的调查点收集猫、狗和溪边山坑的流浪猫粪便,以水洗沉淀法检查并殖吸虫虫卵。用分离自溪蟹的并殖吸虫囊蚴人工感染家犬获取成虫。测量尾蚴、囊蚴、虫卵和成虫的大小。提取成虫基因组DNA,进行PCR扩增并殖吸虫线粒体细胞色素C氧化酶亚单位(COI)和核糖体DNA第二间区(ITS2)的基因,测序后用BoiEdit软件分析其与其他11株并殖吸虫的同源性,利用MEGA软件构建种系发生树。结果金华市婺城区沙畈乡和琅琊镇与武义县白姆乡均发现并殖吸虫,第一、二中间宿主分别是放逸短沟蜷和浙江华溪蟹。婺城区沙畈乡的螺类和溪蟹的感染率分别为0.2%(2/1 088)和76.7%(46/60),溪蟹的感染指数为2.0。琅琊镇的螺类和溪蟹的感染率分别为0.1%(1/1 683)和53.0%(32/60),溪蟹的感染指数为0.9。武义县白姆乡的螺类和溪蟹的感染率分别为0(0/575)和30.0%(18/60),溪蟹的感染指数为0.1。沙畈乡和琅琊镇各在1份流浪猫粪便中检出并殖吸虫虫卵,检出率分别为8.3%(1/12)和0.6%(1/17)。金华市并殖吸虫尾蚴、囊蚴、虫卵和成虫的大小以及形态与卫氏并殖吸虫基本一致。PCR结果显示,COI和ITS2片段大小分别为390bp和363 bp,与GenBank中已报道的11株卫氏并殖吸虫的同源性分别为88.2%~98.2%和86.5%~88.1%。在种系发生树上,金华地区的并殖吸虫位于福建闽清和日本Mie与Chiba地理株之间,与前者最为接近。结论浙江省金华地区存在自然感染并殖吸虫的螺、蟹和家猫宿主,虫种为卫氏并殖吸虫,在进化和亲缘关系上与福建闽清卫氏并殖吸虫非常接近。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 宿主 自然感染
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卫氏肺吸虫成虫cDNA文库的多抗筛选 被引量:7
10
作者 凌家俭 章子豪 张耀娟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期473-475,F002,共4页
目的 :从卫氏肺吸虫成虫 c DNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 :采用预吸收成虫抗原免疫兔血清 ( IRS,多抗 )筛选阳性克隆 ,经 PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选... 目的 :从卫氏肺吸虫成虫 c DNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 :采用预吸收成虫抗原免疫兔血清 ( IRS,多抗 )筛选阳性克隆 ,经 PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。选取插入片段不同的两个克隆测定其 DNA序列 ,用 BL AST软件对所得 DNA序列进行同源性比较。结果 :得到 P.w- 2 ,P.w- 4两个阳性克隆 ,长度分别为 80 1bp和 10 5 3 bp,分别与卫氏肺吸虫原组织蛋白酶 L和卫氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶基因同源 ,同源程度分别为 99%、86%。结论 :用卫氏肺吸虫成虫多抗筛选成虫 c DNA文库 ,所获 P.w- 2和 P.w- 展开更多
关键词 卫氏肺吸虫 CDNA文库 免疫学筛选 并殖吸虫 肺吸虫病 诊断 预防
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卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的筛选和免疫反应性分析 被引量:3
11
作者 时红波 姜昌富 +4 位作者 李天群 潘红 魏兰英 朱晓华 雷家慧 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2003年第6期422-425,共4页
目的 初步探讨卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的免疫反应性。方法 应用卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白(Pw-Ig)筛选噬菌体随机12肽库,对筛选到的抗原模拟表位用ELISA检测其免疫反应性,并与卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwA)进行比较。结果 获得... 目的 初步探讨卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的免疫反应性。方法 应用卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白(Pw-Ig)筛选噬菌体随机12肽库,对筛选到的抗原模拟表位用ELISA检测其免疫反应性,并与卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwA)进行比较。结果 获得的6个卫氏并殖吸虫抗原模拟表位(即P5、P6、P7、P8、P13、P16)特异性和敏感性与PwA相比差异均无显著性(P>0.05),其中P5、P6和P7交叉反应性明显较PwA低(x2=4.630,P<0.05),其余则与PwA无明显差异(P>0.05)。结论 卫氏并殖吸虫抗原模拟表位对卫氏并殖吸虫病的诊断具有潜在的应用价值,有望代替天然抗原用于卫氏并殖吸虫病的诊断。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 模拟表位 抗原
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卫氏并殖吸虫童虫神经系统结构的胆碱酯酶组织化学定位 被引量:6
12
作者 王勇 金大雄 毛克强 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1991年第3期336-338,共3页
乙酰胆碱酯酶(AChE)的组织化学定位,被广泛用于显示动物神经组织中胆碱能神经细胞的存在。现已证明,多种蠕虫神经组织存在 AChE 活性。关于卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)神经系统结构的较完整资料尚未见报道。为此,我们用 AChE... 乙酰胆碱酯酶(AChE)的组织化学定位,被广泛用于显示动物神经组织中胆碱能神经细胞的存在。现已证明,多种蠕虫神经组织存在 AChE 活性。关于卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)神经系统结构的较完整资料尚未见报道。为此,我们用 AChE 整体组织化学定位的方法,对卫氏并殖吸虫童虫神经系统结构进行了研究,报告如下。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 童虫 神经系统 ACHE
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二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原的观察 被引量:6
13
作者 王恩荣 马爱新 +1 位作者 王继春 于秀华 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1990年第5期21-23,共3页
用间接免疫荧光抗体法,对鼠体内两种类型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原做了检测。结果显示两类型童虫与感染同源卫氏并殖吸虫小鼠血清反应后,虫体抗原存在于体表皮层、肠管上皮细胞上;两类型童虫与兔抗鼠红细胞抗体血清反应后,主要在... 用间接免疫荧光抗体法,对鼠体内两种类型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原做了检测。结果显示两类型童虫与感染同源卫氏并殖吸虫小鼠血清反应后,虫体抗原存在于体表皮层、肠管上皮细胞上;两类型童虫与兔抗鼠红细胞抗体血清反应后,主要在表皮层看到宿主抗原,荧光强度比虫体抗原所示为弱;三倍体型童虫的宿主抗原荧光反应有52.6~60%呈(++),而二倍体型大部只是(+)反应;这种荧光强度的差别在非免疫状态所获的童虫切片上也被看到。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 虫体抗原 宿主抗原
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一例并殖吸虫病患者的虫卵DNA序列分析鉴定(英文) 被引量:3
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作者 常正山 吴波 +6 位作者 David Blair 张永年 胡玲 陈韶红 陈名刚 GeorgeM.Davis 冯正 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期213-215,共3页
[目的 ]运用分子生物学技术分析虫卵基因序列鉴定并殖吸虫病类型。 [方法 ]先从并殖吸虫病患者痰中分离出虫卵 ,然后PCR扩增出虫卵中完整的核糖体DNA第二间隔区基因 (ITS2 ) ,并直接用于测序从而获得该基因的核苷酸序列。同时 ,亦用同... [目的 ]运用分子生物学技术分析虫卵基因序列鉴定并殖吸虫病类型。 [方法 ]先从并殖吸虫病患者痰中分离出虫卵 ,然后PCR扩增出虫卵中完整的核糖体DNA第二间隔区基因 (ITS2 ) ,并直接用于测序从而获得该基因的核苷酸序列。同时 ,亦用同法分别从动物宿主粪便中分离出的卫氏并殖吸虫和斯氏狸殖吸虫虫卵中获得ITS2基因序列作为DNA参照分析。此外 ,本文也对从患者痰中分离出的虫卵进行详细的形态学特征描述分析。 [结果 ]来自患者的虫卵ITS2基因序列与参照的卫氏并殖吸虫虫卵的基因序列 10 0 %一致 ,而与来自斯氏狸殖吸虫虫卵的基因序列只有 92 %核苷酸相同。此外 ,从形态学上讲 ,来自患者的虫卵形态特征更与卫氏并殖吸虫虫卵相似。 [结论 ]通过基因序列分析 ,可确诊患者所患的是卫氏并殖吸虫病。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫病 虫卵 DNA序列分析 ITS2 鉴定
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卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究 被引量:3
15
作者 凌家俭 侯敏 +2 位作者 刘剑南 章子豪 张耀娟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期357-359,共3页
目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-P... 目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Westernblotting)对表达产物进行鉴定。结果:成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中。其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异性识别。结论:成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 重组抗原 亚克隆 CDNA文库
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卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库的单抗筛选 被引量:5
16
作者 凌家俭 章子豪 张耀娟 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期48-50,53,共4页
目的 从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素... 目的 从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。其中 3个克隆测定其DNA序列 ,用BLAST软件对所得DNA序列进行同源性比较。结果 得到 1,2 ,4三个不同阳性克隆 ,其长度分别为 1783bp、397bp和 1132bp ,分别与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白 (P wyolkferritin)基因、鞘脂激活蛋白A(DictyosterliumdiscoideumsaposinA)基因和曼氏血吸虫主要卵抗原 (Smmajoreggantigen -P4 0 )基因同源。 结论 本研究首次报道用抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库 ,所获克隆1、2。 展开更多
关键词 卫氏肺吸虫 CDNA文库 免疫学筛选 单克隆抗体 卫氏并殖吸虫病
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六地卫氏并殖吸虫及斯氏狸殖吸虫种间和种内虫体重复DNA序列的比较 被引量:5
17
作者 肖建华 陈翠娥 +2 位作者 张悟澄 聂崇兴 李本文 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第4期279-281,共3页
从湖南、广东两省六地采集卫氏并殖吸虫和斯氏狸殖吸虫,分别制备各地虫体基因组DNA,用 BamHI、HaeⅢ及 HindⅢ 3种限制性内切酶消化,琼酯糖凝胶电泳后,比较酶切片段长度。结果显示两种虫种间重复 DNA序列带型有明显的差异,而同种虫种不... 从湖南、广东两省六地采集卫氏并殖吸虫和斯氏狸殖吸虫,分别制备各地虫体基因组DNA,用 BamHI、HaeⅢ及 HindⅢ 3种限制性内切酶消化,琼酯糖凝胶电泳后,比较酶切片段长度。结果显示两种虫种间重复 DNA序列带型有明显的差异,而同种虫种不同地区虫体的重复 DNA序列带型则多数相同或完全相同。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 斯氏狸殖吸虫 DNA
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青蒿琥酯治疗家犬卫氏并殖吸虫感染的效果观察 被引量:2
18
作者 邢文鸾 方周溪 +13 位作者 陈旭丹 刘启真 谭峰 郑晓云 秦茜 金永国 诸葛青云 谢开婿 邹珊玮 姚孜栋 胡芸 朱金昌 梁韶晖 潘长旺 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第5期365-367,F0003,I0002,共5页
目的探讨青蒿琥酯(Art)对双倍体卫氏并殖吸虫病的治疗作用。方法1)卫氏并殖吸虫成虫用含不同浓度Art的RPMI 1640培养基体外培养后作电镜观察;2)实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常... 目的探讨青蒿琥酯(Art)对双倍体卫氏并殖吸虫病的治疗作用。方法1)卫氏并殖吸虫成虫用含不同浓度Art的RPMI 1640培养基体外培养后作电镜观察;2)实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常规病理检查,取出的虫体作电镜观察。结果1)5 mg/kg组体外培养24 h后,虫体萎缩,扫描电镜观察部分体棘消失、倒伏、絮状物附着;透射电镜显示皮层水肿、细胞器及分泌颗粒减少,卵黄腺萎缩,卵巢卵细胞胞浆空泡变等;2)两治疗犬体内虫体萎缩,厚壁囊肿数分别为28和35个,对照犬为16个,差异有显著性(P<0.05);透射电镜显示成虫变化与体外培养试验相似。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫有损伤作用。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 青蒿琥酯 治疗
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McAbDot-ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物 被引量:6
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作者 段义农 张耀娟 +2 位作者 章子豪 侯敏 吴观陵 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1997年第1期34-36,共3页
应用Dot-ELISA法,以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体IF8A3检测了卫氏并殖吸虫感染犬血清循环免疫复合物动态。感染后1~2wk可以检测到免疫复合物,3~4wk阳性滴度逐渐上升,5~6wk处于较高水平,第8wk达高... 应用Dot-ELISA法,以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体IF8A3检测了卫氏并殖吸虫感染犬血清循环免疫复合物动态。感染后1~2wk可以检测到免疫复合物,3~4wk阳性滴度逐渐上升,5~6wk处于较高水平,第8wk达高峰,然后较快地下降。研究结果表明,卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性;单克隆抗体Dot-ELISA检测特异的循环免疫复合物,可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感染的诊断。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 单克隆抗体 DOT-ELISA CIC
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三氯苯达唑体内外杀灭卫氏并殖吸虫的效果和虫体蛋白质、糖原及DNA含量测定 被引量:9
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作者 许世锷 陆秀君 金立群 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期18-21,共4页
目的 探讨三氯苯达唑在家犬体内及体外培养中对卫氏并殖吸虫的杀虫效果 ,并取得大量死虫。探讨该药对虫体蛋白质、糖原及DNA含量的影响 ,为研究该药的杀虫机理奠定基础。方法 用卫氏并殖吸虫囊蚴感染家犬 ,至粪检查到虫卵后 ,用三氯... 目的 探讨三氯苯达唑在家犬体内及体外培养中对卫氏并殖吸虫的杀虫效果 ,并取得大量死虫。探讨该药对虫体蛋白质、糖原及DNA含量的影响 ,为研究该药的杀虫机理奠定基础。方法 用卫氏并殖吸虫囊蚴感染家犬 ,至粪检查到虫卵后 ,用三氯苯达唑口服治疗观察疗效。将从对照犬获得的活虫培养于BME培养液内 ,观察体外杀虫效果。用Lowry法测定虫体蛋白质含量 ;用Johnson法测定还原糖含量 ;用二苯胺显色法测定DNA含量。结果 治疗犬于服药后 3天及 5天解剖 ,均可获得大量死虫 ,杀虫率达 10 0 %。在体外培养中 ,加入药物后虫体的平均存活时间为 2 39天 ,与对照组有显著差异。体内杀虫所取得的死虫较对照组的活虫 ,虫体显著缩小 ,重量减轻 ;体外培养中杀死的虫体 ,体积无明显缩小 ,但重量显著减轻。经测定体内外杀虫组与对照组之间 ,虫体蛋白质含量及DNA含量均有非常显著的减少 ;而虫体糖原的含量 ,体内杀虫组有非常显著的减少 ,而体外杀虫组则无显著差异。结论 三氯苯达唑在体内外对卫氏并殖吸虫有良好的杀虫效果。药物主要作用于虫体的蛋白质及核酸的合成或代谢 ,而对虫体糖原的合成与代谢影响不大。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫 三氯苯达唑 蛋白质 糖原 DNA
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