发酵麦胚球蛋白体外模拟消化

基于体外模拟胃、肠消化的方式评估发酵麦胚球蛋白(FWG)在不同消化阶段消化率、微观结构、氨基酸组成、二级结构及其抗氧化活性的变化。结果表明,FWG经胃、肠消化后,其可消化率由55.43%分别降至34.33%和9.54%,平均粒径由100 nm分别降至50~70 nm和20~30 nm,未消化蛋白分子质量稳定在15 ku附近。胃消化2 h后,FWG总游离氨基酸释放量达到原始样品的2.05倍,芳香族氨基酸和支链氨基酸含量显著增加;与α-螺旋和β-折叠稳定相关的赖氨酸、缬氨酸在这一阶段被解离出来,无序性增加。FWG经胃消化后羟自由基清除率显著升高32.76%,胃消化过程中ABTS自由基和DPPH自由基清除率呈下降趋势。肠消化后,FWG总游离氨基酸量趋于稳定,二级结构有序性增加。肠消化期间反映亲水性肽抗氧化能力的ABTS自由基清除率呈先下降再上升后下降的趋势,羟自由基清除率则和含羟基氨基酸相对含量的变化趋势呈正相关性,呈先下降再上升而后下降最后上升的变化趋势,DPPH自由基清除率变化趋势和疏水性氨基酸含量的变化密切相关。本研究为进一步了解FWG在肠、胃消化过程中理化性质及功能的变化机制提供理论参考。

超声波处理对小麦胚芽球蛋白理化和功能性质的影响

采用超声波处理小麦胚芽球蛋白以提高其功能性质。研究了超声波处理对小麦胚芽球蛋白理化和功能性质的影响。结果表明:经超声波处理后,小麦胚芽球蛋白的巯基和二硫键含量、紫外光谱和荧光光谱均发生了显著的变化。随着超声波功率的增加,小麦胚芽球蛋白的疏水性、起泡性、起泡稳定性、乳化性和乳化稳定性都降低;当超声波功率大于900 W时,由于小麦胚芽球蛋白重新伸展,疏水基团暴露增多,引起疏水性、起泡性、起泡稳定性、乳化性和乳化稳定性增加。此外,超声波功率对小麦胚芽球蛋白的溶解度有显著影响,随着超声波功率的增加其溶解度明显增加。因此,通过选择适宜的超声波功率水平能够改善小麦胚芽球蛋白的理化和功能性质。

小麦胚球蛋白提取工艺的研究

以小麦胚芽为碌料,首先进行脱脂处理,从脱脂胚中分离出清蛋白后再提取出其中的球蛋白,对影响球蛋白提取工艺的参数,如盐浓度、pH等进行单因素研究,并时氮的去向进行了测定分析,然后利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白产品的亚基含量和纯度进行初步分析与探讨。结果表明,提取小麦胚芽球蚤白的最佳工艺为:用去离子水提出清蛋白后的沉淀物,依次用3%NaCl溶液,体积比为2:1的NaHCO3(0.1mol/L)-Na,CO3(0.02mol/L)溶液浸提,于30℃水浴中调溶液的pH至4.0,然后沉淀分离球蛋白,再用去离子水透析36h。

小麦胚芽球蛋白的提取及功能性质研究

球蛋白是小麦胚芽蛋白中最主要的两种蛋白组分之一,也是深度开发和利用小麦胚芽蛋白资源深加工产品—分离蛋白的主要组分。主要研究了小麦胚芽球蛋白的提取及其功能性质,结果表明:采用盐提酸沉的方法分离提取小麦胚芽球蛋白是切实可行的,所得产品的纯度可达82%;并且发现使用0.5 mol/L NaCl提取小麦胚芽球蛋白的得率最高。小麦胚芽球蛋白的等电点pH在4.0左右,其溶解度整体偏低。脱脂小麦胚球蛋白的吸油性大大优于大豆分离蛋白;脱脂小麦胚球蛋白的起泡性和泡沫稳定性以及乳化性均劣于大豆分离蛋白,但乳化稳定性略却好于后者。

麦胚球蛋白的分离制备及理化性质研究

采用Osborne分级分离的方法制备得到麦胚球蛋白,获得的球蛋白的蛋白质含量为87.3%(干基),得率为5.8g/100g脱脂麦胚粉,其在脱脂麦胚粉蛋白中的构成比例为15.6%。氨基酸分析表明,除蛋氨酸略低于FAO/WHO的推荐值外,其它七种必需氨基酸都高于或接近FAO/WHO的推荐值;另外,谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸和丙氨酸的含量十分丰富,而胱氨酸和半胱氨酸的含量最低。还原的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)表明,麦胚球蛋白主要有六条谱带,其分子量依次为57.8kDa、41.8kDa、38.7kDa、24.1kDa、16.5kDa和14.3kDa。差示扫描量热仪(DSC)分析表明麦胚球蛋白干粉和稀溶液的变性温度分别为98.2℃和83.8℃。

采用Raman光谱研究小麦胚芽8S球蛋白的二级结构

采用显微激光拉曼光谱仪研究了小麦胚芽8S球蛋白的二级结构。结果表明:小麦胚芽8S球蛋白的二级结构主要为β折叠,另外还含有一定量的α螺旋和无规卷曲构象,小麦胚芽8S球蛋白的C—C—S—S—C—C侧链为扭曲—扭曲—扭曲式和扭曲—扭曲—反式两种构型,其酪氨酸残基趋于全部暴露于溶剂中,而其色氨酸残基趋向于埋藏。

小麦胚芽球蛋白的酶法改性研究

球蛋白是小麦胚芽蛋白中最主要的两种蛋白组分之一,也是深度开发和利用小麦胚芽蛋白资源深加工产品———分离蛋白的主要组分。然而,小麦胚芽球蛋白由于在水中的溶解度较差,造成其食品加工方面的功能性质较差,因此改善麦胚球蛋白的功能性质对于深度开发小麦胚芽资源具有重要的意义。鉴于此,本文主要采用盐提酸沉的方法分离提取小麦胚芽球蛋白,并在此基础上,采用了包括碱性蛋白酶,中性蛋白酶在内的多种蛋白酶对其进行酶法改性。结果表明酶解对脱脂小麦胚球蛋白的功能性质有比较明显的改进作用,特别是碱性蛋白酶对于小麦胚芽球蛋白的水解效果最好,溶解度得到大幅提高。综合比较,使用中性蛋白酶Neutrase 1.5MG和木瓜蛋白酶Papain两种蛋白酶酶解脱脂小麦胚球蛋白能够得到功能性质较好的改性蛋白。

小麦胚8S球蛋白的分离纯化及理化性质研究

本实验主要研究了小麦胚球蛋白的主要组成及其理化性质和二级结构。研究结果表明:8S球蛋白是小麦胚球蛋白中最主要的成分,其含有两个亚基谱带55.0kD和38.0～40.0kD;富含谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸和亮氨酸,而缺乏胱氨酸和蛋氨酸;小麦胚8S球蛋白主要是β折叠结构(54.9%),其次是无规卷曲结构(25.3%)和α螺旋(19.8%)。

脱脂麦胚可溶性蛋白各组分中黄酮含量的测定及脱除

很多植物中都含有酚类物质,它很容易与蛋白质相结合,因此酚类物质是各种植物蛋白产品色泽和风味的一个主要影响因素,并且它也会影响食品蛋白质的功能性质和营养特性。黄酮类化合物是麦胚中最主要的酚类物质。本文以脱脂麦胚为原料,通过两种不同的方法制备脱脂麦胚可溶性蛋白组分,测定各蛋白组分中黄酮类化合物的含量,并尝试通过醇洗的方法脱除黄酮。实验结果表明:制备获得了三种脱脂麦胚可溶性蛋白组分:清蛋白、球蛋白和分离蛋白,三种蛋白组分的蛋白质含量均超过80%。小麦胚清蛋白中的黄酮类化合物含量最高,分离蛋白次之,球蛋白含量最低。黄酮类化合物可能主要是与麦胚清蛋白相结合。采用50%的冷乙醇对麦胚可溶性蛋白进行洗涤,洗涤三次可以脱除90%以上的黄酮类物质。

麦胚球蛋白的体外抗炎活性研究

麦胚球蛋白是一种优质蛋白,在改善身体机能和消除炎症方面有着重要的研究价值。通过脂多糖(LPS)干预巨噬细胞建立炎症细胞模型,对提取麦胚球蛋白的体外抗炎活性进行了探究。通过体外细胞培养研究了麦胚球蛋白对RAW264.7细胞的细胞毒性;利用Griess法研究了麦胚球蛋白对RAW264.7细胞经LPS诱导前后NO产生量的影响;利用ELISA法检测实验组对炎症细胞模型中细胞因子TNF-α含量的影响。结果表明:麦胚球蛋白能显著降低经LPS诱导RAW264.7细胞因子TNF-α和NO的含量,并存在一定的剂量依赖关系。麦胚球蛋白抗炎活性的研究为功能性保健品及抗炎药品原料开发提供了思路。

麦胚球蛋白对亚硝酸盐急性中毒大鼠肝损伤的保护作用研究

研究不同剂量的麦胚球蛋白(wheat-embryo globulin,WEG)对亚硝酸盐急性中毒大鼠肝损伤的保护作用。该实验测定肝脏组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性以及谷胱甘肽(gluthione,GSH)含量,同时对血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)以及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的活性进行检测,并以苏木晴-伊红染色(hematoxylineosin staining,HE)在显微镜下观察大鼠肝组织形态变化。结果表明:在亚硝酸盐急性中毒模型中,不同剂量的麦胚球蛋白均能减少脂质过氧化产物MDA含量(p<0.05),提高肝脏中SOD活性和GSH含量,降低血清中AST、ALT以及LDH水平(p<0.05),肝脏变性和坏死病理程度明显减轻。可见麦胚球蛋白对亚硝酸盐中毒大鼠肝损伤具有明显保护作用。

麦胚球蛋白对亚硝酸盐急性中毒大鼠肾损伤的保护作用

目的:探讨不同剂量的麦胚球蛋白(WEG)对亚硝酸盐急性中毒大鼠肾损伤的保护作用。方法:将36只大鼠分为空白组、模型组、麦胚球蛋白组(80 mg/kg)、麦胚球蛋白低、中、高剂量组(40,80,160 mg/kg)及维生素C(80 mg/kg)组,持续干预1周,末次给药12 h后,按60 mg/kg NaNO_(2)剂量进行攻毒。观察比较大鼠肾组织抗氧化活性、细胞凋亡因子含量以及部分肾功的变化,并以苏木精-伊红(HE)染色在显微镜下观察大鼠肾组织形态变化。结果:与模型组相比,不同剂量的麦胚球蛋白可以明显减轻大鼠肾脏系数,提高肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(H_(2)O_(2))、抗氧化能力(T-AOC)的含量,减少丙二醛(MDA)的产生,降低血清中尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平(P<0.05),肾脏中半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)和半胱氨酸蛋白酶8(Caspase 8)含量增加,病理学观察肾脏变性和坏死程度明显减轻。结论:麦胚球蛋白对亚硝酸盐引起的肾毒性具有潜在的保护作用,可有效改善肾组织抗氧化活性,提高抗氧化应激能力,促进抗炎因子与促炎因子平衡,进而使肾组织细胞结构和功能逐步恢复来达到保护作用。

小麦胚芽球蛋白提取工艺及分子质量测定

小麦胚芽营养丰富,为了更进一步对其进行开发利用,通过单因素试验和正交试验对小麦胚芽球蛋白提取条件进行了优化.球蛋白提取最佳工艺条件为NaCl质量分数3%,料液比1∶13,温度30℃,时间1 h.对提取球蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳,球蛋白有6条谱带,分子质量分别为12.36、16.63、22.34、42.56、47.64、59.43 ku.从而实现了对小麦胚芽球蛋白的充分提取.

麦胚球蛋白分子印迹聚合物制备及表征

运用蛋白质印迹法对麦胚球蛋白中的免疫组分进行分离提纯。以人血丙种球蛋白为模板,间氨基苯硼酸为功能单体,以活化的壳聚糖球为载体,制备对麦胚球蛋白有特异性吸附的2种印迹材料。利用傅里叶红外色谱及扫描电镜对印迹聚合物进行表征。通过静态吸附及等温吸附试验研究其吸附性能,并分析MIPs-麦胚蛋白吸附-解析附的过程。结果表明,以2种形态壳聚糖微球为载体的印迹聚合物对麦胚球蛋白组分的有效吸附量分别为20.75,3.27 mg/g;分离因数达到1.92,1.04。对印迹聚合物A建立Langmuir吸附模型,得到吸附平衡常数K为6.11。通过分析发现该材料对麦胚球蛋白免疫组分存在特异性吸附且能够有效洗脱。该聚合物的制备为进一步研究开发麦胚球蛋白及医药级球蛋白的纯化提供了新思路。