麦胚内源蛋白酶主要特性研究

研究了麦胚蛋白酶的主要特性。结果显示：麦胚蛋白酶主要被饱和度为20%~60%的硫酸铵沉淀,其水解酪蛋白的最佳反应温度为50℃,30℃保温30 min其活性无显著下降;麦胚蛋白酶活性在p H为5.5和7.5时较高,且在p H 5.5条件下放置30 min其活性无显著下降。p H 5.5时,Mg2＋、Mn2＋、Ba2＋、胃酶抑素A（Pepstatin A）、碘乙酸（IAA）、苄磺酰氟（PMSF）和乙二胺四乙酸（EDTA）强烈抑制其活性,而Li＋、Ca2＋、Cu2＋、2-ME和二硫苏糖醇（DTT）显著促进其活性。p H 7.5时,Pepstatin A、IAA、PMSF和EDTA显著抑制蛋白酶活性。p H 5.5和7.5时,麦胚蛋白酶对酪蛋白的Km分别为0.562和4.935 mg/m L,且亲和力比以牛血清蛋白、卵清蛋白和明胶为底物时高。麦胚蛋白酶主要为半胱氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。

培育条件对麦胚中蛋白酶活力及蛋白质性质的影响

以脱脂小麦麦胚为原料,经微波辅助处理(600 W,10 s)后,通过改变培育温度、培育时间、培育液pH、培育液液料比,提高麦胚中内源性蛋白酶的活力,达到富集多肽的目的。研究结果表明,温度、时间、pH、液料比对麦胚中蛋白酶活力、肽含量皆有显著影响(P<0.05)。采用Box-Behnken设计对上述单因素进行响应面优化试验,发现培育温度50℃、培育时间6 h、培育液pH4.5和液料比10:1 mL/g为最优组合,蛋白酶活力、肽含量分别为3812.34 U/g、303.12 mg/g。实验表明,优化培育条件能够有效提高经脱脂、微波处理麦胚中蛋白酶活力及肽含量。

响应面法优化孵育麦胚功能肽研究

麦胚是小麦加工成面粉后的副产物,蛋白质含量高且必需氨基酸组成合理,但在现实生活中却没有很好地利用。从功能肽的角度对麦胚资源开发进行了研究,利用麦胚自身的内源蛋白酶进行水解。以肽含量为响应值,在孵育温度、时间、孵育液pH、液料比等单因素实验基础之上,进行了响应面优化实验,确定了最优条件:孵育温度为45℃、提取时间为4.31h、液料比为30、pH4.39,在此条件下,依据建立的数据模型,肽最大提取产量预测值达171.074mg/g,经验证,实测值达(169.04±0.42)mg/g,说明模型是可信的。