抗癌基因p53导入番茄的初步研究

通过根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导 ,利用特异表达的phaseolin基因的启动子与人类野生型抗癌基因p5 3构建嵌合基因 ,对‘美味樱桃’番茄进行遗传转化 ,获得转化番茄再生植株。通过组织化学法、PCR扩增及Southern杂交检测 ,证明人类野生型p5

外源性P_(53)基因转染的人肝癌细胞化疗药物敏感性的研究

目的 探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法 将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。结果 外源性P53基因在转染细胞中有效表达。增强了MTX和VP16对HepG 2细胞生长抑制并促进了药物诱导的细胞凋亡。结论 外源性P53基因能增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。

神经生长因子对红藻氨酸致痫大鼠海马神经细胞凋亡和野生型P^(53)表达的影响

目的 探讨外源性神经生长因子 ( NGF)对癫痫发作大鼠海马神经细胞凋亡与野生型 P5 3 ( wt P5 3 )蛋白表达有无抑制作用。方法 采用 KA诱导癫痫发作大鼠模型。以 TUNEL方法标记 DNA片段 ,原位检测凋亡细胞 ;免疫组化 SP法检测 wt P5 3 蛋白。观察大鼠癫痫发作 4 0 h(注射 KA4 8h)后其海马 CA1神经细胞凋亡和 wt P5 3 蛋白表达情况及外源性 NGF对它们的影响。结果 大鼠急性癫痫发作后 ,其凋亡细胞和 wt P5 3 蛋白表达均明显增加 ,wt P5 3 蛋白表达与细胞凋亡呈正相关 ( r =0 .83 9,P <0 .0 1 ) ;给予 NGF,凋亡细胞数及 wt P5 3 表达均显著性降低 ( P<0 .0 1 )。结论 外源性 NGF对癫痫所致神经细胞凋亡有抑制作用 ,其抑制凋亡的分子机制可能是通过抑制 wt P5 3蛋白表达而实现的。

黑龙江部分地区野鸟源新城疫病毒HN、P基因的克隆和序列分析

为了解野鸟源新城疫病毒(NDV)基因变异情况,我们对14株2005年～2006年分离自黑龙江三江自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的NDV的HN和P基因分别进行RT-PCR扩增,并将其克隆至pMD18-T载体进行核苷酸序列测定。结果显示:14株野鸟源NDVHN基因开放性阅读框架(ORF)均为1716bp,编码571个氨基酸;P基因开放阅读框均为1188bp,编码395个氨基酸。13株野鸟源NDVHN和P基因核苷酸同源性分别为96.4%～99.8%和95.8%～100%,分别与参考毒株HN和P基因相比,同源性为82.3%～98.7%和78.5%～99.4%。1株野鸟源NDV与参考毒株Mutkeswar的HN和P基因高度同源。分析表明:这14株NDV病毒与我国普遍流行的基因Ⅶ型和基因Ⅲ型NDV具有很高的同源性,提示野鸟与家禽新城疫的发生在流行病学和生态学上有着非常密切的关系。

重组P_(53)基因转染的肝癌细胞克隆株的建立及其生物学活性观察

人Ｐ５３基因位于１７ 号染色体短臂上（１７ｐ１３．１） ，编码一个由３９３ 个氨基酸组成的核磷酸蛋白，有调控细胞的生长，维持基因组的稳定，其突变、缺失在恶性肿瘤发生发展中起着非常重要的作用。为进一步探讨野生型Ｐ５３ 基因的抗肿瘤特性，我室采用分子克隆方法构建了重组野生型Ｐ５３ 真核表达载体（ｐｘＴ１—Ｐ５３） ，用磷酸钙—ＤＮＡ 共沉淀法将其导入人肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞内，通过标记基因ＮｅＯＲ 筛选带外源Ｐ５３ 基因的Ｇ４１８ 抗药性克隆，对Ｇ４１８ 抗药性克隆细胞的生长增殖和粘附能力进行观察。结果表明，导入野生型Ｐ５３基因能使肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞的生长增殖速度较对照细胞明显减慢，细胞粘附能力下降。提示野生型Ｐ５３ 基因能抑制肝癌细胞的生长。本研究为肝癌的Ｐ５３ 实验性基因治疗提供了一定的依据。

不同水分处理对草地早熟禾生物量及N、P积累与分配的影响

在盆栽条件下,采用单株种植,以野生草地早熟禾‘天祝’和野生草地早熟禾‘榆中’2个种质为材料,设4个水分处理水平(W1 90%～75%FWC;W2 75%～60%FWC;W3 60%～45%FWC;W445%～30%FWC),研究不同水分调控对草地早熟禾生物量,N、P积累量分配与利用的影响。结果表明:W1处理(90%～75%FWC)更有利于地上部分生物量及N、P的积累量。W2处理(75%～60%FWC)可促进野生草地早熟禾地下生物量及N、P的积累与利用,是草地早熟禾最佳水分处理。草地早熟禾‘天祝’和‘榆中’2个种质的W2与W1处理相比较,地下生物量分配比例分别提高了57.39%和6.88%、地下N积累量分别提高了86.01%和6.60%、地下N分配比例分别提高了60.95%和18.62%;草地早熟禾‘天祝’地下P积累量和分配比例分别提高了91.33%和59.53%;草地早熟禾‘榆中’N利用效率提高了8.56%。扩展性较弱的草地早熟禾‘天祝’较扩展性较强的草地早熟禾‘榆中’有更强的干旱适应性。

新疆塔城地区野生阿魏菇菌株的遗传多样性分析

【目的】研究新疆塔城地区野生阿魏菇菌株的遗传多样性和遗传分化特征,为阿魏菇驯化选育提供基础材料和科学依据。【方法】利用生物学和ISSR标记技术对23株阿魏菇菌株进行遗传多样性分析。【结果】在阿魏菇菌丝培养特征方面,各菌株除在菌丝颜色上无明显差异外,在菌落形态、菌丝长势等7项特征方面均有明显差异;ISSR标记共扩增出60条DNA条带,多态性条带57条,多态比率为95.00%,供试菌株两两间的相异系数从0.07~0.68,D=0.31时,可将23个供试菌株分为13个类群。【结论】新疆塔城地区野生阿魏菇野生阿魏菇菌株已开始发生遗传分化,并具有较丰富的遗传多样性。

磷高效野生大麦拔节期对植酸态有机磷的利用

【目的】探讨磷高效野生大麦对植酸态磷的吸收利用能力,分析植酸态磷处理对不同磷效率野生大麦生长、磷素吸收及根际土壤特征的影响,为阐明低磷胁迫下磷高效野生大麦对有机磷的利用机理提供理论依据。【方法】低磷土壤盆栽条件下,以前期筛选得到的野生大麦磷高效基因型IS-22-30、IS-22-25和磷低效基因型IS-07-07为供试材料,有机磷源为植酸钠,设3个施磷水平,即不施磷(CK)、施磷(P)15 mg·kg-1土(Po15)、30 mg·kg-1土(Po30),研究拔节期有机磷处理对不同磷效率野生大麦生物量、磷素积累量、根系酸性磷酸酶和植酸酶活性、根际土壤酸性磷酸酶和植酸酶活性及有机磷各组分含量的影响。【结果】(1)随有机磷水平提高,野生大麦生物量和磷素积累量均显著增加,而根冠比呈减小趋势。各处理下,磷高效基因型生物量、磷素积累量和根冠比均大于低效基因型。且随着有机磷水平的提高,磷高效基因型生物量和磷素积累量增幅较大。(2)随有机磷水平降低,野生大麦根系酸性磷酸酶和植酸酶活性均显著增加。各处理下,磷高效基因型根系酸性磷酸酶和植酸酶活性显著高于低效基因型,分别是低效基因型的1.15—1.24倍和1.18—1.34倍。(3)野生大麦根际土壤酸性磷酸酶与植酸酶的活性明显高于非根际,且随有机磷水平提高,土壤酶活性呈显著增加的趋势。各处理下,磷高效基因型根际土壤酸性磷酸酶和植酸酶活性显著高于低效基因型,是低效基因型的1.23—1.33倍和1.15—1.30倍。(4)随有机磷水平提高,野生大麦根际、非根际土壤各有机磷组分含量显著增加。磷高效基因型根际与非根际土壤活性有机磷和中活性有机磷含量显著低于磷低效基因型,而中稳性有机磷和高稳性有机磷含量无基因型差异。由于对有机磷的耗竭,根际土壤有机磷各组分含量低于非根际。磷高效基因型根际土壤活性较强的活性有机磷和中活性有机磷出现明显亏缺,其亏缺范围为0.64—1.12 mg·kg-1和13.8—33.9 mg·kg-1。【结论】磷高效野生大麦基因型通过根系或根际微域微生物分泌更多的酸性磷酸酶和植酸酶,提高根际土壤中活性有机磷和中活性有机磷生物有效性,从而具有较强的有机磷吸收利用能力,更能适应有效态磷缺乏的土壤环境。

春油菜田野燕麦对高效氟吡甲禾灵抗性的生理响应

为探明春油菜田野燕麦(Avena fatua L.)对高效氟吡甲禾灵抗性生理机制,在实验室对抗性生物型野燕麦和敏感性生物型喷施高效氟吡甲禾灵后测定了相关生理指标的变化,结果表明喷施高效氟吡甲禾灵EC375 m L/hm2后,野燕麦敏感种群(S)的叶绿素含量呈逐渐降低的趋势,抗性种群(R)的叶绿素含量变化趋势不明显;野燕麦抗性种群(R)喷药处理后丙二醛含量始终很低,敏感种群(S)随着药剂胁迫时间的延长,施药与未施药处理后的丙二醛含量的差异明显;敏感野燕麦种群(S)施药和未施药处理后CAT的活性差异比较显著,抗性种群(R)施药后的CAT活性与未施药的CAT活性差异不显著。研究得出敏感野燕麦生物型生理变化较大,高抗野燕麦生物型具有一定的生理适应性,生理变化较小。

高产β-葡萄糖苷酶野生酵母的筛选及产酶能力差异性分析

为了比较分析野生酵母菌产β-葡萄糖苷酶的情况,筛选高产β-葡萄糖苷酶的酵母菌株,该研究采用七叶灵显色法和4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p-NPG)显色法对从宁夏贺兰山东麓分离的941株野生酵母的产β-葡萄糖苷酶能力进行筛选,通过WL培养基上的酵母菌落形态和26S r DNA D1/D2区的序列分析对所有酵母菌株进行分类鉴定,并且对酵母产β-葡萄糖苷酶能力进行差异性分析。结果表明,941株酵母被鉴定为14个种,且筛选出了4株酵母菌高产β-葡萄糖苷酶:菌株SLY-4(98.51 U/L)、F2-24(76.93 U/L)、F2-16(62.72 U/L)和HX-13(47.95 U/L)。产酶能力差异性分析表明β-葡萄糖苷酶广泛分布于14种酵母,但是产酶能力表现出明显的种间和种内差异性。

云南野生稻对土壤环境中营养元素的吸收能力初探

对云南不同野生稻植株中氮、磷、钾、铁、镁、硼的含量及其相应生长土壤中矿质元素含量进行分析。所涉及的稻作材料和土壤中各种矿质元素的含量差异较大。根据植株材料中矿质元素含量与相应生长土壤中可利用的元素含量的比值,初步探讨了云南不同野生稻对不同营养元素的吸收能力。

济源太行山区野生牡丹资源初步研究

济源太行山零星分布着野生牡丹种群,该区野生牡丹呈群集分布,具有生长空间隐蔽、现存数量少、观赏价值高的特点。从植株形态特征上分析,济源太行山区野生牡丹为矮牡丹。

6.9%精恶唑禾草灵防除春小麦田野燕麦药效试验

经两年三点试验结果表明 ,6 .9%精恶唑禾草灵乳油 90 0ml/hm2 ,于小麦 4～ 5叶期施药 ,防除野燕麦效果 90 %以上 ,对小麦安全 ,小麦增产约 12 .0 %。

15%精喹禾灵乳油防除春油菜田野燕麦试验

为了更好防治春油菜田野燕麦杂草,在青海省对15%精喹禾灵乳油防除春油菜田野燕麦的效果及其对作物的安全性进行田间小区试验。结果表明,15%精喹禾灵乳油不同制剂量于野燕麦3-4叶期(春油菜3-4叶期)兑水300 L/hm2茎叶喷雾,对野燕麦的防除效果达到73.64%-96.21%,各处理区油菜生长正常。15%精喹禾灵乳油安全性好、防效高、持效期长,可进一步示范推广。

69g/L精恶唑禾草EW防除麦田野燕麦研究

[目的]更好的防治春麦田野燕麦杂草。[方法]在青海省对69 g/L精恶唑禾草EW防除春小麦野燕麦的效果及其对作物的安全性进行了田间小区试验。[结果]69 g/L精恶唑禾草灵EW不同制剂量于野燕麦2-3叶期（春小麦3-4叶期）兑水300 L/hm^2茎叶喷雾,对野燕麦的防除效果达88.41%-98.57%,除草效果和对照药骠马相当。药后20 d,各处理区小麦生长正常。[结论]69 g/L精恶唑禾草EW安全性好、防效高、持效期长,可进一步示范推广使用。

二溴对甲基偶氮甲磺光度法测定野生水产中微量铅

采用二溴对甲基偶氮甲磺光度法测定了野生水产中的微量铅。在0.24mol·L-1磷酸介质中,铅与二溴对甲基偶氮甲磺形成1∶2蓝色配合物,最大吸收波长为640nm,表观摩尔吸光系数为7.85×104,铅含量在0.04～0.80μg·mL-1内符合比耳定律。方法的回收率在98.5%以上,可用于鄱阳湖野生水产中微量铅的测定。

采用苯基荧光酮测定野蒜和食蒜中锗的含量

以2，3，7-三羟基-9-（2-羟基-5-对甲苯偶氮）苯基荧光酮为显色剂，测定了野蒜和食蒜中锗的含量，加标回收率在91．04％～102．83％，且该方法灵敏度和选择较高。

甘薯近缘野生资源的染色体倍性研究

以甘薯近缘野生种Ipomoea trifida根尖为材料,分析0.1%秋水仙素、对二氯苯饱和溶液、2 mmol/L的8-羟基喹啉三种试剂不同处理时间对细胞有丝分裂指数、制片效果的影响。结果表明,对二氯苯饱和溶液对甘薯野生种I.trifida根尖进行3 h处理,细胞有丝分裂指数最高,染色体制片效果较好,为最佳预处理方法。基于上述体系鉴定了本试验中的甘薯野生种I.trifida为二倍体(2 n=2 x=30),秋水仙素加倍处理后的I.trifid是四倍体(2 n=4 x=60),徐薯18是六倍体(2 n=6 x=90)。

甲基二磺隆和精噁唑禾草灵复配对野燕麦的联合毒力

为了提高药效,减少农药用药量,实现化学农药减量增效,采用整株测定法测定了甲基二磺隆和精噁唑禾草灵对野燕麦的联合毒力.结果表明:甲基二磺隆和精噁唑禾草灵有效成分比例为5∶13、1∶4、1∶6、2∶21时,其共毒系数分别为147.5、156.8、191.0、186.7,均表现为协同增效作用,其中甲基二磺隆和精噁唑禾草灵复配比例为1∶6时,共毒系数达到最大值191.0.甲基二磺隆和精噁唑禾草灵复配后对野燕麦的毒力表现为协同增效作用.

7.5%精恶唑禾草灵防除春小麦田野燕麦药效试验

7.5%精恶唑禾草灵浓乳剂对麦田野燕麦具有良好的防除效果,使用剂量以750~900ml/hm2为宜,对水225kg,于小麦4~5叶期,野燕麦3~4叶期均匀喷施。防除野燕麦效果达85%以上,对小麦安全,灭草后增产20%以上。研究结果表明,7.5%精恶唑禾草灵浓乳剂是防除野燕麦高效、低毒安全的农药,可以推广使用。