野鸭源H3N8亚型禽流感病毒NS基因的分子克隆及序列分析

根据GeneBank上已发表的H3N8亚型禽流感的非结构蛋白基因(NS)序列,设计了一对特异性引物,成功地从A/mallard/SanJiang/167/2006(H3N8)中克隆到NS基因序列,该克隆基因全长860bp,编码NS1和NS2两种非结构蛋白。与其他H3N8亚型的NS基因进行了同源性比较,核苷酸同源性为65.5%～98.3%,推导的氨基酸序列同源性为65.4%～97.8%。NS基因遗传进化树形成两个分支,该分离株处于等位基因B组。另外,此毒株NS基因在263～277位没有发生15个碱基的缺失。A/mallard/SanJiang/167/2006(H3N8)株149位为丙氨酸,其不能感染哺乳动物。

一株野鸟源H1N1亚型禽流感病毒的遗传进化特征及其系统学分析

从2007年秋季在黑龙江省三江国家级自然保护区采集的绿头鸭(Anas platyrhynchos)泄殖腔样品中,分离到一株A型禽流感病毒,亚型鉴定结果为H1N1,命名A/Mallard/Sanjiang/390/2007(H1N1),简称为MD/San-jiang/390/2007(H1N1)。对8个基因片段(PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS)进行了扩增与序列测定,其中HA基因序列的氨基酸裂解位点序列为PSIQSR↓GLFGAI,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)的序列特征。从该病毒基因组的系统进化分析看出:除PA基因属于北美群系禽流感病毒外,其余基因均属于欧亚群系禽流感病毒;与猪流感病毒、季节性人流感病毒、2009年新型H1N1流感病毒的比较来看,亲缘性较远,均处于不同分支,HA亚型分类属于h1.1.2。NP基因与家鸭分离株A/duck/Hokkaido/Vac-3/2007(H5N1)的核苷酸同源性为99.4%,M基因与家鸭分离株A/duck/Hokkaido/W90/2007(H10N7)的核苷酸同源性达99.6%,PB1基因与NP基因和猪分离株A/swine/Korea/C12/2008(H5N2)的核苷酸同源性分别达99.2%、99.1%,提示该病株可能是一个整合了来源于家鸭和猪的多个亚型AIV基因片段的重组病毒。

天府肉鸭与绿头野鸭杂交改良试验

用8只绿头野鸭公鸭与50只天府肉鸭母鸭自然交配生产F1代，测定父母本和F1代的生长速度和9周龄屠体性状。结果发现，种蛋受精率为80.5％，F1代成活率100％，6～7周龄体重1242.0～1362.0 g，比绿头野鸭提前5～6周上市。F1代各项屠体指标比绿头野鸭高1倍以上，尤其是胸肌重比绿头野鸭高178.3％，而且腹脂率显著低于天府肉鸭。

绿头鸭RIG-Ⅰ基因的分子特征及其在体内的表达分布

为揭示野生绿头鸭视黄酸诱导基因Ⅰ(Retinoic acid-inducible geneⅠ,RIG-Ⅰ)的分子特征及其在体内的表达分布规律,对野生绿头鸭RIG-Ⅰ(MdRIG-Ⅰ)基因的CDS序列进行了克隆和序列分析,并应用荧光定量PCR方法对RIG-Ⅰ基因在绿头鸭不同组织中的表达水平进行了测定。结果显示:MdRIG-Ⅰ基因的CDS序列全长2 802 bp,编码933个氨基酸,与哺乳动物和鱼类的RIG-Ⅰ基因同源率较低,为43.7%~46.7%与52.2%~54.9%;与鸟类的RIG-Ⅰ基因同源率较高,为78.7%~99.8%;与番鸭和绍兴麻鸭的RIG-Ⅰ基因同源率为98.3%和99.8%,有较强的种间特异性;MdRIG-Ⅰ基因mRNA在体内不同器官的表达量均高于SPF鸭(绍兴麻鸭),且不同组织表达量各不相同:在肝脏中表达水平最高,其次是肠,在心和脾表达呈中等水平,在肺和肾表达呈低等水平。研究结果揭示了RIG-Ⅰ通路在鸭科动物抗病毒中的作用及其分子机制,为水禽先天性免疫研究奠定良好的基础。