多西他赛联合野生型p53对Hela细胞的抑制作用

目的探讨多西他赛单用及与野生型p53基因联合应用对宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法Hela细胞分两组培养，p53转染实验组（p53-Hela组）和空白对照组（Hela组），野生型p53基因表达用逆转录-多聚酶链反应鉴定。多西他赛作用于p53-Hela细胞及Hela细胞，24小时与48小时后形态学观察并使用活细胞计数试剂盒检测吸光度值OD450,计算细胞抑制率。结果用逆转录-多聚酶链反应法检测到p53-Hela细胞的p53mRNA表达，与对照组Hela细胞的p53mRNA表达相比，差异有统计学意义（t=-17．504，P〈0．01）。多西他赛对p53-Hela及Hela细胞作用时，不同时间都有抑制作用（FP53-Hela=53．500，P〈0．01；FHela=430．225，P〈0．01），该抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性。结论多西他赛单独应用时可对宫颈癌Hela细胞产生抑制作用，与野生型p53基因联用时，其药物抑制作用增强。

人野生型p53基因增强5-FU对大肠癌化疗敏感性的分子生物学机制

为了探讨人野生型p53(wt-p53)基因增强大肠癌细胞化疗敏感性的分子生物学机制,将携带wt-p53基因的质粒分别转染两种p53基因突变的人大肠癌细胞系HT-29及SW620,分析细胞中p53及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)蛋白的表达水平;将化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)以不同浓度、不同时间分别作用于HT-29及SW620细胞,另外将已转染wt-p53基因的大肠癌细胞用5-FU进行诱导,Western印迹分析上述干预条件下细胞中p53蛋白及细胞周期蛋白D1表达水平的变化;流式细胞术检测wt-p53基因联合5-FU组及对照组中细胞凋亡的改变情况.结果表明,wt-p53基因能增加癌细胞中细胞周期蛋白D1的表达,与wt-p53基因呈剂量依赖性关系;5-FU则降低其蛋白表达,与5-FU呈时间和剂量依赖性关系,而5-FU所致的细胞周期蛋白D1表达水平的降低在细胞预先转染了wt-p53基因时会被抑制;wt-p53基因与5-FU联合使用能提高大肠癌细胞凋亡率.结果提示,wt-p53基因可提高大肠癌细胞中细胞周期蛋白D1的表达水平,并抑制5-FU所致的细胞周期蛋白D1降解,从而提高大肠癌细胞对化疗药物5-FU的敏感性.