中医肝阳化风证本质蛋白质组学研究

目的从蛋白质表达水平初步探讨中医肝阳化风证的本质内涵。方法严格按照中医辨证标准选择脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)肝阳化风证与阴虚风动证、脑梗死(cerebral infarction,CI)肝阳化风证与阴虚风动证、颈椎病(cervical spondylosis,CS)肝阳化风证与肝阳上亢证、帕金森病(Parkinson′s disease,PD)肝阳化风证与血虚生风证患者作对照研究,分离上述各证型组患者及健康人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),提取总蛋白后进行双向凝胶电泳(2-DE),PDQuest软件进行分析,采用基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-TOF-MS)测定肽质量指纹图,用Mascot查询系统查询SwissProt数据库,比较同病异证、异病同证及同类证患者PBMC差异表达与相同表达的蛋白。结果建立了上述各证型组与健康人PBMC总蛋白的2-DE图谱,通过比较分析并鉴定出同病异证中ICH肝阳化风证与阴虚风动证相同表达蛋白质点1个,差异表达蛋白质点22个;CI肝阳化风证与阴虚风动证相同表达蛋白质点6个,差异表达蛋白质点21个;CS肝阳化风证与肝阳上亢证相同表达蛋白质点3个,差异表达蛋白质点12个;PD肝阳化风证与血虚生风证无相同表达蛋白质点,差异表达蛋白质点12个。异病同证中相同表达蛋白质点13个。四病同类证有1个相同表达的蛋白质点为硫氧环蛋白依赖性过氧化物酶(Thioredoxin-dependent peroxide reductase,TPx)。结论同病异证有不同的本质内涵(有多个不同的蛋白表达),异病同证有共同的物质基础(有共同的蛋白表达),同类证有相同的物质基础(有相同的蛋白表达),提示中医学的证有物质基础,有本质可寻。

脑梗死肝阳化风证临床辨证标准与神经功能缺损评分、实验诊断指标间的相关性分析

目的探讨脑梗死肝阳化风证的临床辨证标准与神经功能缺损程度、辅助实验诊断指标之间的关联性。方法收集60例临床上辨证为肝阳化风证的脑梗死患者的证候积分、临床神经功能缺损程度评分及实验诊断指标[血浆皮质醇(F)、血栓素B2(TXB2)、去甲肾上腺素(NE)及血清三碘甲状腺原氨酸(T3)]的数据,用统计学方法分析三者之间的关联性。结果证候积分与神经功能缺损程度评分和血浆F、NE、TXB2呈正相关,与血清T3呈负相关,经检验,有统计学意义。结论神经功能缺损评分和实验诊断指标能显著提高临床辨证标准的客观性,建立证候积分、神经功能缺损评分和4项实验诊断指标的综合辨证标准有临床使用价值。

应用信使核糖核酸差异显示研究中医肝阳上亢、肝阳化风证的基因表达

为探讨肝阳上亢、肝阳化风两证的分子机理，应用信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）差异显示技术，研究了两证患者与正常受试者的基因表达情况。结果显示：使用１５种不同的引物组合，聚丙烯酰胺凝胶电泳，放射自显影后，有２８条区带呈现不同的表达。其中，肝阳上亢患者与正常受试者之间有１４条区带表现不同的表达，肝阳化风患者与正常受试者之间有１１条区带表达具有差异，而肝阳上亢患者与肝阳化风患者有６条区带表现不同的基因表达。在肝阳上亢患者、肝阳化风患者与正常受试者之间，大部分不同表达的基因其表达为降低。这些结果初步表明，肝阳上亢患者、肝阳化风患者与正常受试者之间存在基因表达的改变；肝阳上亢患者与肝阳化风患者之间也存在基因表达的差别。

陈大舜教授辨治桥本氏脑病学术思想及临床经验

桥本氏脑病以心肝火旺、气郁痰结为基本病机,以痰热内扰、风火相煽、阳亢为标,热毒痰浊,夹风上犯,药毒叠加,脑窍壅闭,以致神机障碍。陈大舜教授以热毒痰浊闭窍证、肝阳化风夹痰证、气郁痰结火旺证为基础,以主证定主方,选用菖蒲郁金汤加减、镇肝熄风汤加减、清痰汤加减。在用药方面主张辨症与辨证相参合,并对含碘中药黄药子、浙贝母、海藻、昆布、牡蛎、海浮石、夏枯草等,和毒性中药枯矾、朱砂等的运用见解独到,体现了辨证相结合以及和法论治的学术思想,临床获满意疗效。

肝阳化风证实验诊断指标的初步研究

为探讨肝阳化风证的实验诊断指标，选择ＣＴ、ＮＥ、Ｅ、Ｆ及Ｔ３ 进行检测，并与阴虚风动证、气虚血瘀证及健康人组进行对照，结果显示：肝阳化风证血ＮＥ、Ｅ及Ｆ含量显著升高，而Ｔ３ 明显降低；ＣＴ扫描结果显示：脑出血以肝阳化风证多见、脑梗塞以阴虚风动证常见，脑出血部位及脑梗塞部位均以基底节区为主，两证型无明显差异。认为以上指标可作为肝阳化风证诊断参考指标。

脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证蛋白质组学比较研究

目的建立脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清双向凝胶电泳图谱,初步分析其差异蛋白质表达情况。方法双向凝胶电泳(2-DE)分离脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清标本,考马斯亮兰染色,PD-QUEST图像分析系统分析,从凝胶中选取分离较好的蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质,对差异蛋白质进行组间对比。结果获得了分辨率较好的脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证双向凝胶电泳图谱,质谱分析了29个差异蛋白质点,获取了87张肽质量指纹图谱,通过查询数据库鉴定了29个蛋白质,其中部分蛋白质与肝阳化风证及阴虚风动证发生发展有关。结论建立了脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清双向凝胶电泳图谱,并应用质谱技术鉴定了部分差异蛋白质点,为脑梗死肝阳上亢证与阴虚风动证与正常组血清双向凝胶电泳图谱血清蛋白质组数据库的建立提供了有意义的数据,并认为蛋白质组学能在脑梗死不同证型具有代表意义。

加味千金龙胆汤治疗小儿多发性抽动症临床观察

目的研究加味千金龙胆汤治疗小儿多发性抽动症的临床疗效。方法选取小儿多发性抽动症患儿78例,按随机数字表法分为2组,各39例。治疗组选用加味千金龙胆汤来进行治疗,对照组给予泰必利治疗。疗程30 d,1个疗程后观察疗效。结果治疗组治愈12例;显效18例,无效9例,总有效率达到76.92%(30/39)。优于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味千金龙胆汤为治疗小儿多发性抽动症的有效方药,安全可靠。

天麻钩藤饮加味结合西医常规疗法治疗脑出血肝阳化风证临床研究

目的评价天麻钩藤饮加味结合西医常规疗法治疗脑出血肝阳化风证的疗效。方法将本院2017年5月-2019年12月收治的120例脑出血肝阳化风证患者采用随机数字表法分为2组,每组60例。对照组给予西医常规疗法治疗,观察组在对照组基础上服用天麻钩藤饮加味治疗。分别于治疗前后进行中医症状评分,采用ELISA法检测血清去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、肾上腺素、多巴胺(dopamine,DA)及血清MDA,采用比色法检测血清SOD,采用全自动免疫分析仪以荧光偏振免疫分析法检测血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、内皮素(endothelin,ET);采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institudes of Health Stroke Scale,NIHSS)评估神经功能受损程度,采用Barthel指数评估日常生活活动能力;观察并记录治疗期间的再出血情况,评价临床疗效。结果观察组总有效率为90.0%(54/60)、对照组为70.0%(42/60),2组比较差异有统计学意义(χ^(2)=7.500,P=0.006)。治疗后3、6周,观察组中医症状评分低于对照组(t值分别为10.670、14.022,P值均<0.001)。治疗组治疗后NIHSS评分低于对照组(t=5.736,P<0.01),Barthel指数评分高于对照组(t=10.559,P<0.01)。治疗后,观察组血清NE[(2897.51±241.65)pmol/L比(6309.25±394.16)pmol/L,t=57.160]、肾上腺素[(1352.45±234.15)pmol/L比(4131.20±431.55)pmol/L,t=43.839]、DA[(623.59±45.61)pmol/L比(950.61±51.39)pmol/L,t=36.866]水平,SOD[(4.08±1.05)C/μg·mgHb比(3.16±1.02)C/μg·mgHb,t=4.868]、MDA[(3.15±1.41)μmol/L比(5.86±1.31)μmol/L,t=10.907]水平,Hcy[(12.98±2.41)μmol/L比(17.68±2.26)μmol/L,t=11.019]、ET[(51.36±5.29)ng/L比(79.58±7.65)ng/L,t=23.502]水平均低于对照组(P<0.01);血清NO[(63.19±3.87)μmol/L比(51.26±3.59)μmol/L,t=17.506]水平高于对照组(P<0.01)。观察组再出血发生率为1.7%(1/60)、对照组为15.0%(9/60),2组比较差异有统计学意义(χ^(2)=6.982,P=0.008)。结论天麻钩藤饮加味结合西医常规疗法可较好保护脑出血肝阳化风证患者的神经功能,改善脑出血后继发缺血性脑损伤,提高临床疗效。