Wnt5a基因在骨关节炎中作用机制的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是由于关节软骨退变丢失导致的一种临床常见慢性退行性疾病,给患者及国家带来沉重医疗负担,对其机制深入研究有利于临床加强对OA的治疗。近年研究发现,无翅型MMTV整合位点家族成员5A(Wnt5a)基因在OA的发病及进展中有重要作用,其可以影响OA的独立发病因素如衰老、代谢所致肥胖、创伤等参与OA的发病,并可以通过经典(Wnt/β-catenin)及非经典(Wnt/Ca^(2+)和Wnt/Planar polarity等)Wnt通路参与OA的调控。本文就Wnt5a基因在OA中的作用及机制作一综述,为相关研究提供便利。

Wnt5a基因与AECOPD患者中医证型相关性研究

目的通过检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期(Acute Exacerbation of Chronicobstr-Uctive Pulmonary Disease,AECOPD)患者血液中的Wnt5a基因表达量,比较AECOPD患者不同中医证型血液中Wnt5a基因表达量差异,尝试探讨Wnt5a基因与AECOPD部分中医相关证型的关系,尝试为COPD中医证型诊断提供客观标准。方法收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者45例,参考肺胀证型诊断标准,将慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者分为痰浊壅肺证、痰热郁肺证、肺肾气虚证三个组;患者入院时同步进行肺功能检测及抽取静脉血,运用RT-PCR检测AECOPD各中医证型患者血液中Wnt5a的表达量,并选取15例健康人作为对照组进行对比观察。结果痰浊壅肺组、痰热郁肺组、肺肾气虚组AECOPD患者血液中Wnt5a基因表达量分别为1.45±0.54、1.70±0.71、2.11±0.92,均高于正常组(1±0.05),P <0.01,具有显著统计学意义;三组证型间Wnt5a基因表达量:痰浊壅肺<痰热郁肺<肺肾气虚(P <0.01),具有显著统计学意义。Wnt5a基因mRNA相对表达量与COPD中医证型之间存在直线线性相关关系,且呈正性相关(P <0.01)。结论Wnt5a基因mRNA的相对表达量在AECOPD中医证型中存在显著差异,能够给慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的中医证型诊断提供一定的客观标准,并揭示其疾病严重程度。

慢性粒细胞白血病患者Wnt5a基因及NPM1基因的表达及其意义

目的:通过检测慢性粒细胞白血病的骨髓细胞中Wnt5a基因及NPM1基因的表达,探讨其相关性及意义。方法:选择在本院住院的慢性粒细胞白血病患者60例作为实验组,包括急变期、加速期、慢性期各20例,良性血液病患者60例作为对照组,培养骨髓细胞,通过RT-PCR方法进行检测,分析Wnt5a基因及NPM1基因的表达及其意义。结果:实验组三个亚组与对照组比较,Wnt5amRNA半定量均值、阳性率均较低,NPM1mRNA阳性率、中位表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);实验组三个亚组中,急变期与加速期、慢性期间比较,Wnt5amRNA半定量均值、阳性率均较低,NPM1mRNA阳性率、中位表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);Wnt5a、NPM1的表达水平与患者的白细胞计数、骨髓原始细胞数相关,差异有统计学意义(P<0.05);与年龄、血红蛋白含量、血小板计数无关,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Wnt5a基因及NPM1基因与慢性粒细胞白血病的发生、发展有一定的相关性,Wnt5a基因可能抑制其发生,而NPM1基因阳性促进其进展,这可能成为慢性粒细胞白血病诊断、治疗、分析预后的新方式,为临床提供理论依据。

绵羊WNT5A基因克隆及其组织表达分析

WNT5A(Wnt family member 5A)参与了多种细胞的增殖、凋亡和分化等生物学过程,在乳腺形态发生、毛囊发育等方面发挥了重要作用。该试验利用RT-PCR获得绵羊WNT5A基因的CDS区,分析WNT5A蛋白的结构特征并利用RT-qPCR检测WNT5A基因在9个组织中的表达情况。绵羊WNT5A基因的CDS区全长1062 bp,编码353个氨基酸。该蛋白的二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,β转角、延伸链贯穿于整个蛋白质结构中。String分析结果表明,WNT5A与卷曲蛋白受体、低密度脂蛋白相关蛋白和受体酪氨酸激酶有相互作用。RT-qPCR研究结果表明,WNT5A基因表达具有组织特异性及品种特异性。WNT5A基因在绵羊心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、卵巢、背最长肌、乳腺和皮肤9个组织中均广泛表达,其中在皮肤中的表达量高于其他组织(P<0.05),而在脾脏中表达量较低。它在甘肃高山细毛羊皮肤、乳腺、背最长肌、肾脏、肺脏、脾脏和肝脏中的表达量高于小尾寒羊(P<0.05),而在甘肃高山细毛羊卵巢中的表达量低于小尾寒羊(P<0.05),在心脏中该基因的表达量无差异(P>0.05)。该结果为深入研究绵羊WNT5A基因的功能提供了重要依据,同时也丰富了绵羊基因组内容。

WNT5A基因rs566926多态性与中国苏皖地区部分人群非综合征性唇腭裂的相关性

目的探讨WNT5A基因rs566926位点多态性与中国苏皖地区部分人群非综合征性唇腭裂的相关研究。方法选取100例非综合症性唇腭裂(NSCLP)患儿为实验组,100例正常儿童作为对照组,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测WNT5A基因rs566926多态性。采用病例对照研究方法进行统计分析并依据临床病理类型进行分类分析。结果两组基因型频数分布有明显差异(P<0.05)。结论 WNT5A基因rs566926位点多态性与中国苏皖地区部分人群NSCLP的发生有相关性,可能是该人群NSCLP发生的易感因素之一。

WNT5A基因对卵巢颗粒细胞胰岛素反应性和胰岛素抵抗的调控作用

目的探讨WNT5A基因过表达与颗粒细胞胰岛素抵抗发生的相关性。方法选取3周龄(n=15只)和6周龄(n=16只)雌性昆明小鼠,采用免疫组织化学和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Wnt5a在小鼠卵巢颗粒细胞中的表达特征;通过Forskolin+pma模拟促黄体生成素(LH)峰处理人的卵巢颗粒细胞系24 h,检测LH峰作用后颗粒细胞的WNT5A表达对胰岛素反应性的影响;利用p-EGFP-N1-WNT5A转染KGN细胞系,检测过表达WNT5A与颗粒细胞胰岛素抵抗发生的相关性。结果与动情前期相比,Wnt5a在6周小鼠动情期(n=3,F=8.874,P=0.017)和动情后期(n=3,F=8.874,P=0.001)的卵巢中mRNA转录水平升高,在成熟卵泡颗粒细胞中蛋白表达水平升高。与未促排卵处理相比,促排卵处理可促进卵巢颗粒细胞Wnt5a mRNA转录水平升高(n=3,F=12.093,P=0.003),抑制KGN细胞的胰岛素反应性,而WNT5A则改善其胰岛素反应性。与转染质粒空载处理相比,过表达WNT5A导致胰岛素通路反应性降低,乳酸代谢降低(n=3,F=15.281,P<0.001)。结论卵巢排卵过程中WNT5A的表达水平升高,有利于增强颗粒细胞对胰岛素的反应性;而类似在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中WNT5A表达异常升高时,可能会引起PCOS相关的胰岛素抵抗的发生。

Wnt5a基因与COPD急性加重期患者中医证型相关性研究

目的 尝试探讨AECOPD患者血细胞中Wnt5a基因与AECOPD部分中医相关证型的关系,尝试为COPD中医证型诊断提供客观标准。方法 收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者45例,将其分为痰浊壅肺证、痰热郁肺证、肺肾气虚证三个组;患者入院时同步进行肺功能检测及抽取静脉血,运用RT-PCR检测AECOPD各中医证型患者血液中Wnt5a的表达量。结果 痰浊壅肺组、痰热郁肺组、肺肾气虚组AECOPD患者血液中Wnt5a基因表达量分别为(1.45±0.54)、(1.70±0.71)、(2.11±0.92),均高于正常组(1±0.05),P<0.01,具有显著差异;三组证型间Wnt5a基因表达量:痰浊壅肺<痰热郁肺<肺肾气虚(P<0.01),具有显著差异。结论 Wnt/Ca信号通路中Wnt5a基因与中医证型存在相关性,且与中医病位深浅相关。

Wnt5a在肺鳞癌和腺癌中的表达及意义

目的探讨Wnt5a基因及蛋白在肺鳞癌和腺癌中的表达水平及其临床意义。方法用Northern blot及Westernblot分析对43例肺鳞癌和腺癌癌组织及10例非肺癌正常肺组织的Wnt5a基因及蛋白的表达进行检测。结果Wnt5a在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,有淋巴结转移的肺癌组织Wnt5a表达高于无转移的肺癌组织。结论Wnt5a与肺鳞癌和腺癌的转移与恶化密切相关。

示-环指长比与6个指骨发育相关基因多态性的关联性

目的探讨6个指骨发育相关基因,即成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)、印度刺猬信号分子(IHH)、Msh同源盒1(MSX1)、Runx家族转录因子2(RUNX2)、SRY盒转录因子9(SOX9)及Wnt家族成员5A(WNT5A)13个位点单核苷酸多态性(SNP)与人类示-环指长比(2D∶4D)的关联性。方法采用数码相机拍摄宁夏地区731名在校大学生(男性358名,女性373名)手部正面照片,采用GraphPad Prism 8.0图像分析软件标记解剖点并测量示(2)指及环(4)指指长;多重PCR法进行6个基因13个SNP位点(rs1047057、rs755793、rs41258305、rs3731881、rs3100776、rs12532、rs3821949、rs45585135、rs3749863、rs1042667、rs12601701、rs1829556和rs3732750)的基因分型;单因素方差分析或独立样本t检验间接评估2D∶4D与13个SNP位点间的关联性。结果宁夏大学生女性左手和右手2D∶4D均显著高于男性(均P<0.01);13个SNP位点基因型、等位基因频率在不同性别间的差异均无显著统计学意义(均P>0.05);不同性别中,男性左手2D∶4D与SOX9基因rs12601701位点基因型显著关联(P<0.05),右手2D∶4D与WNT5A基因rs1829556位点基因型显著关联(P<0.05);女性右手2D∶4D与MSX1基因rs12532(P<0.01)和rs3821949(P<0.05)位点基因型显著关联。结论SOX9(rs12601701)、WNT5A(rs1829556)、MSX1(rs12532和rs3821949)基因多态性可能与宁夏地区人群2D∶4D的形成有关。