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双拷贝和x基因缺失HBV DNA质粒的构建及其细胞转染
1
作者
宋玉
万谟彬
+3 位作者
李闻捷
陈坚
方超平
薛惠斌
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第9期979-981,共3页
目的 :构建双拷贝和x基因缺失的HBV真核细胞复制表达质粒 ,并研究其在Hep3B肝癌细胞株中对HBV的复制表达效果。 方法 :利用含HBVDNA(adrⅠ )的质粒 ,酶切出HBVDNA片段 ,克隆入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3,构建双拷贝HBVDNA的真核表达质...
目的 :构建双拷贝和x基因缺失的HBV真核细胞复制表达质粒 ,并研究其在Hep3B肝癌细胞株中对HBV的复制表达效果。 方法 :利用含HBVDNA(adrⅠ )的质粒 ,酶切出HBVDNA片段 ,克隆入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3,构建双拷贝HBVDNA的真核表达质粒 pcDNA3 ES HBV2 ;将原始质粒通过插入人工合成DNA片段和基因重组破坏乙肝病毒x基因区 ,再克隆入pcDNA3,构建成 pcDNA3 KN F1F2真核表达质粒 ;用两质粒分别转染Hep3B肝癌细胞株 ,进行G4 1 8筛选的同时用荧光定量PCR法检测细胞培养上清液HBVDNA。 结果 :(1 )成功构建了x基因缺失的HBV真核表达质粒 pcDNA3 KN F1F2及含双拷贝HBVDNA的真核表达质粒 pcDNA3 ES HBV2 ;(2 )对两质粒成功进行细胞转染后 ,测得第 3、6、1 4天细胞培养上清液中HBVDNA均高表达 ,两质粒之间差别不明显。 结论 :构建的质粒可在Hep3B细胞株中表达并引起HBV的复制及分泌 ;
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关键词
双拷贝
x基因缺失
HBVDNA
质粒
构建
细胞转染
肝癌
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职称材料
X基因缺失的乙型肝炎病毒转基因鼠中的病毒复制
2
作者
朱晨林
刘建磊
《国外医学(微生物学分册)》
2003年第2期41-42,共2页
已知乙型肝炎病毒(HBV)X基因高度保守,体外实验表明X基因的产物对于HBV复制和病毒体输出并不重要,但在体内是否如此尚不清楚。作者构建了两种末端延长的HBV基因组结构用于建立转基因小鼠,一种与以前用于建立HBV转基因小鼠的结构和序列相...
已知乙型肝炎病毒(HBV)X基因高度保守,体外实验表明X基因的产物对于HBV复制和病毒体输出并不重要,但在体内是否如此尚不清楚。作者构建了两种末端延长的HBV基因组结构用于建立转基因小鼠,一种与以前用于建立HBV转基因小鼠的结构和序列相同,另一种X基因阅读框架中发生一个从C到T的突变。
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关键词
x基因缺失
乙型肝炎病毒
转
基因
鼠
病毒复制
免疫组化方法
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职称材料
肺癌产生化疗抗性之成因
3
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2006年第11期1249-1249,共1页
据美国BIOCOMPARE科技新闻网(2006/10/16)报道,约翰霍普金斯的科学家Shyam Biswal发现detox基因缺失如何导致肺癌的患者对于化疗产生抵抗性。这个基因编码的蛋白质为NRF2,可以保护细胞免受环境污染物的伤害,例如香烟和汽车的烟...
据美国BIOCOMPARE科技新闻网(2006/10/16)报道,约翰霍普金斯的科学家Shyam Biswal发现detox基因缺失如何导致肺癌的患者对于化疗产生抵抗性。这个基因编码的蛋白质为NRF2,可以保护细胞免受环境污染物的伤害,例如香烟和汽车的烟雾,并有助于细胞排出这些污染物。另外有一种基因KEAP1编码的产物,可以阻止这个细胞自清的过程停止,但是肺癌细胞会破坏这些基因表现,并阻断化疗药物的攻击。
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关键词
肺癌细胞
化疗药物
抵抗性
x基因缺失
环境污染物
成因
基因
编码
科技新闻
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职称材料
题名
双拷贝和x基因缺失HBV DNA质粒的构建及其细胞转染
1
作者
宋玉
万谟彬
李闻捷
陈坚
方超平
薛惠斌
机构
第二军医大学长海医院感染科
第二军医大学长海医院中心实验室
第二军医大学海军医学系军队卫生学教研室
第二军医大学东方肝胆外科研究所
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第9期979-981,共3页
基金
上海市重大医学发展重点课题 ( 99ZDI0 0 1)
文摘
目的 :构建双拷贝和x基因缺失的HBV真核细胞复制表达质粒 ,并研究其在Hep3B肝癌细胞株中对HBV的复制表达效果。 方法 :利用含HBVDNA(adrⅠ )的质粒 ,酶切出HBVDNA片段 ,克隆入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3,构建双拷贝HBVDNA的真核表达质粒 pcDNA3 ES HBV2 ;将原始质粒通过插入人工合成DNA片段和基因重组破坏乙肝病毒x基因区 ,再克隆入pcDNA3,构建成 pcDNA3 KN F1F2真核表达质粒 ;用两质粒分别转染Hep3B肝癌细胞株 ,进行G4 1 8筛选的同时用荧光定量PCR法检测细胞培养上清液HBVDNA。 结果 :(1 )成功构建了x基因缺失的HBV真核表达质粒 pcDNA3 KN F1F2及含双拷贝HBVDNA的真核表达质粒 pcDNA3 ES HBV2 ;(2 )对两质粒成功进行细胞转染后 ,测得第 3、6、1 4天细胞培养上清液中HBVDNA均高表达 ,两质粒之间差别不明显。 结论 :构建的质粒可在Hep3B细胞株中表达并引起HBV的复制及分泌 ;
关键词
双拷贝
x基因缺失
HBVDNA
质粒
构建
细胞转染
肝癌
Keywords
hepatitis B virus
x
gene
vector
HBV replication
gene transfection
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
X基因缺失的乙型肝炎病毒转基因鼠中的病毒复制
2
作者
朱晨林
刘建磊
出处
《国外医学(微生物学分册)》
2003年第2期41-42,共2页
文摘
已知乙型肝炎病毒(HBV)X基因高度保守,体外实验表明X基因的产物对于HBV复制和病毒体输出并不重要,但在体内是否如此尚不清楚。作者构建了两种末端延长的HBV基因组结构用于建立转基因小鼠,一种与以前用于建立HBV转基因小鼠的结构和序列相同,另一种X基因阅读框架中发生一个从C到T的突变。
关键词
x基因缺失
乙型肝炎病毒
转
基因
鼠
病毒复制
免疫组化方法
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
肺癌产生化疗抗性之成因
3
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2006年第11期1249-1249,共1页
文摘
据美国BIOCOMPARE科技新闻网(2006/10/16)报道,约翰霍普金斯的科学家Shyam Biswal发现detox基因缺失如何导致肺癌的患者对于化疗产生抵抗性。这个基因编码的蛋白质为NRF2,可以保护细胞免受环境污染物的伤害,例如香烟和汽车的烟雾,并有助于细胞排出这些污染物。另外有一种基因KEAP1编码的产物,可以阻止这个细胞自清的过程停止,但是肺癌细胞会破坏这些基因表现,并阻断化疗药物的攻击。
关键词
肺癌细胞
化疗药物
抵抗性
x基因缺失
环境污染物
成因
基因
编码
科技新闻
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
双拷贝和x基因缺失HBV DNA质粒的构建及其细胞转染
宋玉
万谟彬
李闻捷
陈坚
方超平
薛惠斌
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
下载PDF
职称材料
2
X基因缺失的乙型肝炎病毒转基因鼠中的病毒复制
朱晨林
刘建磊
《国外医学(微生物学分册)》
2003
0
下载PDF
职称材料
3
肺癌产生化疗抗性之成因
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2006
0
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职称材料
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