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禽脑脊髓炎病毒Luminex xTAG检测方法的建立
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作者 张孟迪 朱海波 +5 位作者 朱余军 伍妙梨 练月晓 黄碧洪 葛叶 丛锋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期54-58,共5页
为了建立一种灵敏快速检测禽脑脊髓炎病毒(AEV)的Luminex xTAG技术方法,本试验针对AEV高度保守的VP 1基因设计了1对特异性引物,在上游引物的5′端通过Spacer18间隔添加Tag序列,下游引物的5′端标记生物素,进行反转录-聚合酶链式反应(RT-... 为了建立一种灵敏快速检测禽脑脊髓炎病毒(AEV)的Luminex xTAG技术方法,本试验针对AEV高度保守的VP 1基因设计了1对特异性引物,在上游引物的5′端通过Spacer18间隔添加Tag序列,下游引物的5′端标记生物素,进行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,构建质粒标准品,通过优化反应体系建立Luminex xTAG检测方法。用所建立的Luminex xTAG方法进行特异性、敏感性和重复性试验,并与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法同时对45份脑组织临床样品进行检测。结果显示,所建立AEV Luminex xTAG检测方法与传染性法氏囊病毒、禽传染性贫血病病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、传染性喉气管炎病毒、禽白血病病毒、马立克病毒和禽传染性支气管炎病毒无交叉反应;灵敏度可达1×10^(2)copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于4.0%;对45份临床样品的Luminex xTAG检测结果与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测结果一致。结果表明,所建立的AEV Luminex xTAG检测方法特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好,可用于AEV的快速检测。 展开更多
关键词 禽脑脊髓炎病毒(AEV) Luminex xtag 检测
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成人疑似病毒性脑炎、脑膜炎患者xTAG脑脊液病毒多重检测结果分析 被引量:3
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作者 伊洁 关鸿志 +2 位作者 倪安平 范思远 徐英春 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第1期14-16,21,共4页
目的分析xTAG脑脊液病毒多重检测试剂盒(cerebral spinal fluid viral panels,xTAG CSFVP)对成人疑似病毒性脑炎、脑膜炎病原体检测结果。方法收集2014年10月~2016年9月就诊于北京协和医院的115例疑似病毒性脑炎或脑膜炎的成人患者脑... 目的分析xTAG脑脊液病毒多重检测试剂盒(cerebral spinal fluid viral panels,xTAG CSFVP)对成人疑似病毒性脑炎、脑膜炎病原体检测结果。方法收集2014年10月~2016年9月就诊于北京协和医院的115例疑似病毒性脑炎或脑膜炎的成人患者脑脊液标本115例,使用xTAG CSFVP进行检测并对结果进行分析。结果 115例脑脊液标本中,有28例检测出病毒,阳性率为24.3%,其中单纯疱疹病毒1型的检出率最高(7.8%),水痘-带状疱疹病毒和EB病毒检出率次之(均为6.1%)。共检出病毒30例,其中单一感染占92.86%(26/28),混合感染占7.14%(2/28)。xTAG CSFVP阳性和阴性患者的临床症状和脑脊液生化指标差异无统计学意义(均P>0.05)。结论成人病毒性脑炎脑膜炎患者xTAG脑脊液病毒检出率最多的病原体为单纯疱疹病毒1型,水痘-带状病毒和EB病毒,检出2例混合感染。 展开更多
关键词 脑炎 脑膜炎 病毒性 xtag脑脊液病毒多重检测技术
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猪口蹄疫病毒MFIA xTAG检测方法的建立 被引量:1
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作者 崔雨葳 《养殖与饲料》 2020年第5期82-84,共3页
为了提高猪口蹄疫病毒诊断准确性,针对口蹄疫病毒的3D基因建立了FMDV的xTAG检测方法。根据3D基因序列设计特异引物,上游引物5’端加TAG序列,下游引物5’端加生物素,进行PCR扩增,扩增产物与荧光编码微球和SA-PE杂交,在Luminex 200检测仪... 为了提高猪口蹄疫病毒诊断准确性,针对口蹄疫病毒的3D基因建立了FMDV的xTAG检测方法。根据3D基因序列设计特异引物,上游引物5’端加TAG序列,下游引物5’端加生物素,进行PCR扩增,扩增产物与荧光编码微球和SA-PE杂交,在Luminex 200检测仪上读数。用所建立的MFIA xTAG检测方法进行特异性、灵敏度、重复性及病料样品的检测。结果表明,该方法的特异性强;检测的敏感性可达1×10~2 copies/μL;批内、批间的变异系数都在3%以下;检测结果与SYBR Green I荧光PCR方法100%相符。表明建立的液相基因芯片方法特异性好、灵敏度高、重复性好,可用于猪口蹄疫病毒的检测。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3D基因 xtag检测方法
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沙门菌H抗原的xTAG法鉴定 被引量:4
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作者 郑之北 郑伟 +3 位作者 濮小英 文艳苹 潘劲草 汪皓秋 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期942-947,共6页
目的利用Luminex xTAG技术,建立能高通量鉴别沙门菌H抗原的xTAG悬浮芯片法,用于沙门菌的血清型别鉴定。方法以沙门菌编码H抗原的fliC和fljB基因为目标基因,选取其保守片段设计上游通用引物,选取可变片段设计下游特异性引物;合成时... 目的利用Luminex xTAG技术,建立能高通量鉴别沙门菌H抗原的xTAG悬浮芯片法,用于沙门菌的血清型别鉴定。方法以沙门菌编码H抗原的fliC和fljB基因为目标基因,选取其保守片段设计上游通用引物,选取可变片段设计下游特异性引物;合成时上游引物的5′端用生物素标记,下游引物的5′端连接特定的TAG序列;标本经多重PCR扩增并标记生物素和TAG序列后,与含anti-TAG序列的编码磁珠混合液杂交分型,通过生物素与链霉亲和素-藻红蛋白的反应报告结果。利用建立的xTAG悬浮芯片法鉴定145株沙门菌日常分离株的H抗原,并与传统的血清凝集试验比较。结果31种沙门菌H抗原经多重PCR扩增后,与xTAG磁珠杂交后可鉴别分型,各H抗原间无交叉反应,且重复性良好,与大肠埃希菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌及志贺菌DNA等亦无交叉反应。对145株沙门菌进行H抗原鉴定,与传统的血清凝集试验比较,其敏感度为95.1%,特异度为100%。结论利用xTAG悬浮芯片法鉴定沙门菌H抗原,特异准确,可在4~5 h内完成90多株常见血清型沙门菌的H抗原鉴定。 展开更多
关键词 沙门菌 H抗原 xtag技术
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疑似病毒性肺炎住院患者xTAG呼吸道病毒多重检测结果分析 被引量:3
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作者 尹洁 徐志鹏 徐英春 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第34期2799-2801,共3页
目的 分析疑似病毒性肺炎住院患者xTAG呼吸道病毒多重检测技术(xTAG RVP)的检测结果.方法 将2013年1月至2014年12月北京协和医院133例疑似病毒性肺炎住院患者分为中青年组(17 ~ 49岁)42例和中老年组(50~88岁)91例,采集患者的深... 目的 分析疑似病毒性肺炎住院患者xTAG呼吸道病毒多重检测技术(xTAG RVP)的检测结果.方法 将2013年1月至2014年12月北京协和医院133例疑似病毒性肺炎住院患者分为中青年组(17 ~ 49岁)42例和中老年组(50~88岁)91例,采集患者的深部痰或支气管肺泡灌洗液,利用xTAG RVP试剂盒对标本进行核酸检测,并对结果进行分析.结果 133例标本中,有50例可以检测出病毒,阳性率为37.6%;阳性标本中混合感染占12.0%.其中甲型流感病毒和鼻病毒检出率最高(45.0%和16.7%).中青年组感染率显著高于中老年组(73.8%比31.9%,P<0.001).春夏秋冬四季呼吸道病毒阳性检出率分别为25.0%、6.7%、20.0%、38.3%,差异无统计学意义(P=0.257).结论 疑似病毒性肺炎住院患者xTAG RVP检测的常见病原体为甲型流感病毒和鼻病毒,中青年患者感染率高于中老年患者。 展开更多
关键词 呼吸道感染 肺炎 病毒性 xtag呼吸道病毒多重检测技术
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xTAG液相芯片技术检测多种食源性致病菌方法的研究 被引量:1
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作者 彭延 余波 +1 位作者 张静玲 邹文菁 《公共卫生与预防医学》 2022年第5期54-56,共3页
目的建立一种基于xTAG微球标记技术,同时快速检测4种食源性致病菌的方法。方法分别针对沙门氏菌的invA基因、副溶血性弧菌的toxR基因、单核细胞增生李斯特菌的hly基因、金黄色葡萄球菌的Sa442基因,设计标记有MagTAG微球Taq的引物,建立多... 目的建立一种基于xTAG微球标记技术,同时快速检测4种食源性致病菌的方法。方法分别针对沙门氏菌的invA基因、副溶血性弧菌的toxR基因、单核细胞增生李斯特菌的hly基因、金黄色葡萄球菌的Sa442基因,设计标记有MagTAG微球Taq的引物,建立多重PCR实验方法,将PCR产物与带有反向Taq序列的微球杂交,使用Luminex200检测仪检测杂交结果,并对检测方法的灵敏度、特异性进行评价。结果该方法能同时检出4种食源性致病菌,特异性好。副溶血性弧菌toxR、单核细胞增生李斯特菌hly、沙门氏菌invA检测的灵敏度为100CFU/mL;金黄色葡萄球菌Sa442的灵敏度为1×10^(3)CFU/mL。结论此研究建立的方法能够快速、准确、特异性的同时检测沙门氏菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌。 展开更多
关键词 液相芯片 食源性致病菌 MagTAG微球 LUMINEX
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应用xTAG液相芯片法检测非小细胞肺癌患者TBNA细胞学标本EGFR基因突变
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作者 陈桂阳 荣福 《国际呼吸杂志》 2015年第22期1681-1685,共5页
目的观察xTAG液相芯片技术检测经支气管针吸活检术(TBNA)细胞学标本及配对组织学标本中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变情况,比较两者有无差别。方法收集非小细胞肺癌组织标本及配对TBNA细胞学标本,两组样本分别用xTAG液相芯片技... 目的观察xTAG液相芯片技术检测经支气管针吸活检术(TBNA)细胞学标本及配对组织学标本中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变情况,比较两者有无差别。方法收集非小细胞肺癌组织标本及配对TBNA细胞学标本,两组样本分别用xTAG液相芯片技术进行EGFR基因(19和21)突变分析。结果EGFR外显子19在非小细胞肺癌组织学标本中的突变率为30.0%(9/30),在TBNA细胞学标本的突变率为26.7%(8/30);EGFR外显子21在非小细胞肺癌组织标本中的突变率为13.3%(4/30),在TBNA细胞学标本的突变率为13.3%(4/30)。在13例患者肿瘤组织中检测出外显子19或21突变,其中12例TBNA细胞学标本中也检测出外显子19或21突变。组织学标本为EGFR野生型,其配对的TBNA细胞学标本也均为野生型,肿瘤组织学标本和配对TBNA细胞学标本的EGFR突变检测结果总符合率为79%。结论TBNA细胞学是一种诊断肺癌及其纵隔淋巴结转移的准确、敏感和特异的方法。用xTAG液相芯片技术可以有效地检测TBNA细胞学标本中EGFR基因突变状态。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 经支气管针吸活检术 表皮生长因子受体 xtag液相芯片技术 细胞学标本
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食源性沙门氏菌携带质粒介导的喹诺酮类耐药基因的液相芯片检测技术研究
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作者 杜强 黎俊宏 +5 位作者 严程 赵莹 屠博文 毛旭健 董昕 张露杰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第9期287-295,共9页
目的:建立应用新型液相芯片技术检测食源性沙门氏菌携带的质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因中4种基因:qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB的方法。方法:针对食源性沙门氏菌携带的qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB四种PMQR基因,设... 目的:建立应用新型液相芯片技术检测食源性沙门氏菌携带的质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因中4种基因:qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB的方法。方法:针对食源性沙门氏菌携带的qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB四种PMQR基因,设计对应引物和微球,采用液相芯片技术对7株标准菌株进行特异性实验;对4株各含1种PMQR基因的食源性沙门氏菌进行重复性和灵敏度实验;然后检测来自食源性风险监测的71株耐喹诺酮类沙门氏菌,和普通PCR进行对比实验。结果:成功建立了液相芯片技术检测食源性沙门氏菌携带的qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB四种PMQR基因的方法,携带qnrS基因的耐药株检出限为5 CFU/mL、携带aac(6')-Ib-cr基因的耐药株检出限为25 CFU/mL、携带oqxA和oqxB基因的耐药株检出限为10 CFU/mL。所有阳性判定结果荧光中位值(MFI)均≥5倍阴性对照组。重复性实验变异系数(CV)均小于5%,特异性实验结果特异性100%,阴性菌株无阳性信号反应。qnrS检出率29.6%(21/71)、aac(6')-Ib-cr 35.2%(25/71)、oqxA 28.2%(20/71)、oqxB 23.9%(17/71),方法比对的结果符合率为100%。结论:实验建立的液相芯片技术检测食源性沙门氏菌质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrS、aac(6')-Ib-cr、oqxA、oqxB的方法具有灵敏度高、特异性好、稳定性强、结果准确的特点,可以为食源性沙门氏菌PMQR基因的检测以及耐药性的监控提供技术支撑。 展开更多
关键词 液相芯片技术 xMAP xtag PMQR 食源性沙门氏菌
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多重荧光定量PCR和液态芯片技术对下呼吸道病毒检测的应用比较 被引量:9
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作者 伊洁 徐英春 窦亚玲 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第7期544-547,共4页
目的比较荷兰Patho Finder公司多重荧光定量PCR技术(Respi Finder 2SMART试剂盒,简称Respi Finder检测)和加拿大Luminex公司液态芯片技术(呼吸道病毒检测试剂盒,简称x TAG RVP)对下呼吸道标本病毒检测的结果。方法收集2015年1至12月于... 目的比较荷兰Patho Finder公司多重荧光定量PCR技术(Respi Finder 2SMART试剂盒,简称Respi Finder检测)和加拿大Luminex公司液态芯片技术(呼吸道病毒检测试剂盒,简称x TAG RVP)对下呼吸道标本病毒检测的结果。方法收集2015年1至12月于北京协和医院疑似病毒性肺炎住院患者100例下呼吸道标本,分别利用Respi Finder和x TAG RVP检测试剂进行常见呼吸道病毒核酸检测,并全部进行PCR及测序分析,比较两种方法的敏感性和特异性。结果 100份下呼吸道标本经Respi Finder和x TAG RVP方法检测,阳性率分别为60.0%和51.0%,混合感染率均为8.0%。两种方法结果一致率为80.0%。以PCR及测序结果为准,经Respi Finder和x TAG RVP方法检测的敏感性分别为97.9%和94.3%,特异性分别为74.5%和97.9%,阳性预测值分别为78.3%和98.0%,阴性预测值分别为95.0%和93.9%,两法检测特异性及阳性预测值差异有统计学意义(P<0.05)。结论与Respi Finder方法相比,x TAG RVP对常见呼吸道病毒检测的特异性较好,敏感性相当,对呼吸道病毒的检测性能优于Respi Finder检测。 展开更多
关键词 多重荧光定量PCR Respi FINDER 液态芯片技术 xtag RVP 呼吸道病毒
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大鼠细小病毒检测技术研究进展
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作者 吴定宇 吕瑞青 彭芳 《实验动物科学》 2019年第1期80-84,共5页
大鼠细小病毒是一种DNA病毒,存在多种血清型,分为不同毒株。该病毒可自然感染实验大鼠和野鼠,不同毒株感染后临床症状不一。该病毒可对大鼠的组织或器官造成影响,导致大鼠生理生化参数改变,直接影响实验结果。因此,对感染大鼠的筛选鉴... 大鼠细小病毒是一种DNA病毒,存在多种血清型,分为不同毒株。该病毒可自然感染实验大鼠和野鼠,不同毒株感染后临床症状不一。该病毒可对大鼠的组织或器官造成影响,导致大鼠生理生化参数改变,直接影响实验结果。因此,对感染大鼠的筛选鉴定至关重要。本文旨在系统阐述大鼠细小病毒检测技术的研究情况,对比不同的方法,提出了问题和展望,为实验动物质量控制提供帮助。 展开更多
关键词 大鼠细小病毒 ELISA PCR xtag
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Virus profile in children with acute respiratory infections with various severities in Beijing, China 被引量:10
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作者 Zhu Runan Song Qinwei Qian Yuan Zhao Linqing Deng Jie Wang Fang Sun Yu 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2014年第21期3706-3711,共6页
Background Acute respiratory infection (ARI) is one of the most common infectious diseases in infants and young children globally.This study aimed to determine the virus profile in children with ARI presenting with ... Background Acute respiratory infection (ARI) is one of the most common infectious diseases in infants and young children globally.This study aimed to determine the virus profile in children with ARI presenting with different severities.Methods Clinical specimens collected from children with ARI in Beijing from September 2010 to March 2011 were investigated for 18 respiratory viruses using an xTAG Respiratory Viral Panel Fast (RVP Fast) assay.The Pearson chisquare analysis was used to identify statistical significance.Results Of 270 cases from three groups of ARI patients,including Out-patients,In-patients and patients in the intensive care unit (ICU),viruses were detected in 176 (65.2%) specimens with the RVP Fast assay.The viral detection rate from the Out-patients group (50.0%) was significantly lower than that from the In-patients (71.1%) and ICU-patients (74.4%) groups.The virus distribution was different between the Out-patients group and the other hospitalized groups,while the virus detection rate and distribution characteristics were similar between the In-patients and ICU-patients groups.The coinfection rates of the Out-patients group,the In-patients group,and the ICU-patients group were 15.6%,50.0% and 35.8%,respectively.In addition to respiratory syncytial virus (RSV) and adenovirus (ADV),human rhinovirus (HRV) was frequently detected from children with serious illnesses,followed by human metapneumovirus (hMPV),human bocavirus (HBoV) and coronaviruses.Parainfluenza virus 3 (PIV3) was detected in children with lower respiratory illness,but rarely from those with serious illnesses in the ICU-patient group.Conclusion In addition to so-called common respiratory viruses,virus detection in children with ARI should include those thoucht to be uncommon respiratory viruses,especially when there are severe ARI-related clinical illnesses. 展开更多
关键词 respiratory viruses acute respiratory infections CO-INFECTION CHILDREN xtag Respiratory Viral Panel Fast assay
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Luminex液相芯片在微生物多重检测中的应用 被引量:8
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作者 温来欣 《职业与健康》 CAS 2014年第16期2355-2358,共4页
液相芯片作为一种新的生物芯片技术,以不同荧光编码微球作为反应及信号检测载体,流式细胞术作为光学检测手段,在液相反应体系中实现蛋白质、核酸等多种生物大分子多重检测。它既保持了生物芯片高通量的特性,又具有高速度、低成本、准确... 液相芯片作为一种新的生物芯片技术,以不同荧光编码微球作为反应及信号检测载体,流式细胞术作为光学检测手段,在液相反应体系中实现蛋白质、核酸等多种生物大分子多重检测。它既保持了生物芯片高通量的特性,又具有高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便等优势。该文对此技术的原理、特点及其在疾控机构微生物多重检测中的应用进行综述。 展开更多
关键词 液相芯片 LUMINEX xMAP技术 xtag技术
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