基于生境可获得性的完达山地区马鹿(Cervus elaphus xanthopygus)冬季生境选择

于2004～2005年冬季研究了完达山地区马鹿的生境利用和选择。在野外调查的基础上，获取了研究地区马鹿种群水平上的生境利用数据；利用地理信息系统和遥感技术，从区域尺度上测度了各类生境因子的可获得性。通过比较被利用生境与可获得生境，测度了马鹿冬季对各类生境或生态因子的选择。结果表明，马鹿对植被类型、海拔、坡向、NDVI等级、到公路距离表现出非比例利用，对坡度的利用与其可获得性则没有显著性差异。马鹿选择采伐迹地，低郁闭度生境（第2、3NDVI等级），200～300m海拔区间，南坡，距离公路600～700m的区间。马鹿采食生境和卧息生境对各类因子具有不同的选择性，表现出不同功能生境分离的特征。对于采食生境，马鹿选择采伐迹地、阔叶疏林，低郁闭度（第2、3NDVI等级），南坡；对于卧息生境，马鹿仅选择采伐迹地，低郁闭度（第2、3、4NDVI等级）。根据马鹿活动样点的出现与否，建立了马鹿冬季生境选择的逻辑斯谛回归模型。模型回判结果表明，该模型对马鹿活动样方与对照样方的总体正确预测率为74．4％，对马鹿活动样方的正确预测率为84．2％，对对照样方的正确预测率为62．4％，能够较好的预测生境利用概率。

基于最大熵模型的森林‑草原交错区野生东北马鹿分布区预测与参数优化研究

利用最大熵模型(MaxEnt)对内蒙古高格斯台罕乌拉国家级自然保护区内的东北马鹿Cervus elaphus xan‑thopygus潜在分布区和适宜生境进行预测,比较基于默认参数和优化参数的预测结果,探讨参数优化对东北马鹿种群潜在分布区和适宜生境预测结果的影响。研究结果表明:优化参数模型的特征组合选择线性、二次型、片段化、成积型和阈值型特征,调控倍率为4时,模型的拟合度和复杂度得到改善;优化参数建模下,温度季节性、距道路距离、距草地距离、最冷季平均温度、等温性、海拔和距河流距离是影响东北马鹿分布的主要环境因子;2种模型预测结果表明,东北马鹿均主要分布于保护区东北部,适宜生境面积分别为36.04 km^(2)和126.67 km^(2),占总面积的3.5%和12.6%。研究表明,使用MaxEnt模型进行濒危珍稀物种潜在适宜生境预测时,需根据影响物种分布的关键环境因子选择最合理的参数设置。

基于粪便DNA的东北马鹿遗传多样性

东北马鹿(Cervus canadensis xanthopygus)为国家二级重点保护野生动物,近些年其种群数量急剧下降、分布区不断退缩、种群基因交流受阻,很多地区更是难觅其踪迹。亟需对其种群的遗传变化,特别是遗传多样性和近交衰退等种群遗传信息开展进一步评价,增强保护与管理的针对性。本研究在大、小兴安岭和长白山脉的6个重点研究区域,共收集409份疑似马鹿粪便样本。首先基于mtDNA Cyt b基因测序技术进行物种鉴定,并对鉴定为马鹿的阳性样本利用微卫星技术进行个体识别。结果共识别出172只东北马鹿个体;Cyt b基因序列共检测出14个变异位点和11个单倍型,单倍型多样性为0.849(0.105~0.732),核苷酸多样性为0.678%(0.099%~0.775%)。10个微卫星位点检测出种群平均等位基因数为5.7(5.2~7.2),有效等位基因数为3.3(2.5~4.1),观测杂合度为0.687(0.644~0.725),期望杂合度为0.619(0.564~0.689),近交系数为-0.113(-0.160~-0.037)。结果表明,东北马鹿种群遗传多样性处于中等水平,其中双河和铁力种群最高,高格斯台和黄泥河种群次之,方正和穆棱种群最低。种群历史数量的下降与分布区的隔离影响着各局域种群的遗传多样性格局。种群内高比例的稀有单倍型和等位基因显示,东北马鹿种群未来存在遗传多样性下降的风险。高格斯台和黄泥河种群单倍型与核苷酸多样性水平的差异,为种群历史数量下降后快速增长的结果。东北马鹿各局域种群的近交系数均为负值,非杂合度不足,提示种群尚无近交风险。建议对东北马鹿稀有单倍型和等位基因个体重点监测和保护,并促进与附近区域个体的交流,恰当时期考虑圈养种群野外放归,以提高野外个体间基因交流和快速种群恢复。

大兴安岭南麓东北马鹿种群遗传多样性分析

由于人类活动干扰及自然环境变化,东北马鹿(Cervus elaphus xanthopygus)的生存面临诸多问题。为掌握东北马鹿遗传多样性现状,进而为马鹿种群的健康状况提供评估依据,利用线粒体Cyt b基因和微卫星2种分子标记对内蒙古大兴安岭南麓高格斯台罕乌拉国家级自然保护区内的东北马鹿进行种群遗传多样性评估。结果表明:246份新鲜马鹿粪便隶属于182只个体;微卫星标记表明平均期望杂合度为(0.729±0.016),平均观测杂合度为(0.768±0.029),线粒体标记表明单倍型多样性为(0.347±0.035),核苷酸多样性为(0.248±0.025)%,种群存在较高比例的稀有单倍型(33.33%)。该地区马鹿种群遗传多样性处于中等偏低水平,未来可能存在单倍型丢失的风险。因此,为避免出现遗传多样性下降的风险,建议该地区加强对马鹿种群的管理与保护,并促进与邻近区域马鹿个体的基因交流。

东北马鹿微卫星CM41S16和CM12S18遗传标记的群体遗传学参数分析

目的利用东北马鹿微卫星DNA遗传标记用于鹿药材的生物鉴别。方法采用微卫星识别工具(MISA)对欧洲马鹿和中亚马鹿基因组进行生物信息学分析,获得东北马鹿同源微卫星DNA 20个遗传标记;随机选择2个具有一定多态性的微卫星遗传标记,对随机抽取的48头东北马鹿血样DNA进行PCR-STR扩增、电泳分离和分型、等位基因测序及群体遗传学参数调查。结果CM41S16和CM12S18基因座具有高度多态性,群体遗传学参数显示CM41S16和CM12S18基因座均有5个等位基因及15种基因型,等位基因频率分布范围分别为0.0417~0.3333和0.0729~0.3333,多态性信息量(PIC)为0.6206和0.7212,个体识别率(DP)分别为0.8396和0.9035。结论CM41S16和CM12S18具有高度多态性,可以用于鹿药材生物鉴别。

黑龙江省老爷岭南部穆棱林区马鹿种群分布数量及生境适宜性评价

开展野生动物种群分布数量和生境适宜性评价研究是制定物种科学保护决策的基础和关键。以东北马鹿(Cervus canadensis xanthopygus)为研究对象,于2015—2020年在黑龙江省老爷岭南部穆棱林区,采用大样方调查方法收集马鹿在雪地留下的足迹信息分析马鹿种群数量;通过相机监测、足迹链跟踪和大样方调查3种方法综合收集马鹿活动点信息,利用最大熵(MaxEnt)建模分析马鹿生境适宜性。马鹿种群分布数量研究结果表明,穆棱林区马鹿种群密度为(0.0645±0.009)只/km^(2),种群数量为47—61只,主要分布在研究地区南部的和平、龙爪沟和共和林场。生境分析结果表明:人为干扰因子中,居民区对MaxEnt模型的贡献率为44%,马鹿主要在距居民区距离约5 km和10—15 km的区域活动,在偏僻的林间小道和乡村道路马鹿生境适宜性较高,其对模型贡献率分别为16.8%和10.2%;植被因子中,在距常绿针叶林和针阔混交林距离4 km范围内,随距离增加马鹿生境适宜性逐渐降低。生境适宜性分析结果表明,研究地区马鹿适宜生境和次适宜生境面积为87.09 km^(2),仅占研究区域的10.39%,主要集中分布于研究区域的东南部,而西北部的适宜生境较少,且破碎化严重。研究认为,老爷岭南部穆棱林区马鹿种群密度低、数量少主要受马鹿种群基数小和适宜生境面积少两方面的限制。因此,在未来马鹿种群保护恢复的过程中,应有针对性地加强对马鹿重点分布区域西南部和西北部的生境恢复,西南部生境修复有利于研究地区与吉林省天桥岭林区2个隔离分布区之间马鹿种群进行基因交流,西北部生境修复有利于增加马鹿种群恢复需求的适宜生境面积。对穆棱林区马鹿种群实施保护和对关键区域不适宜生境进行修复意义重大,亦为满足该区域分布的东北虎(Panthera tigris altaica)和东北豹(Panthera pardus orientalis)对猎物资源的需求有着重要意义。

基于粪便DNA的马鹿种群数量和性比

为分析黑龙江省完达山林区马鹿种群生存状态,制定科学有效地保护措施,从分子水平研究了种群数量和性比。2006、2007两年冬季跟踪马鹿足迹链,于五泡林场共搜集210份粪便,以成功提取DNA的167份作为分析样本。通过多态性较高的7个微卫星位点进行了基因分型分析,显示167份粪便DNA分属66只个体。基于非损伤性标志重捕法,统计出林场内马鹿数量2a平均47(39—60)只,密度0.302(0.251—0.386)只/km2,与2002年大样方法调查结果相比有减无增。SRY基因性别鉴定显示,种群雌雄性比1.00∶2.00(22♀,44♂),存在较多雄性个体,分析认为偷猎是导致性比失衡的最主要原因。数量的持续下降和性比失衡提示完达山林区马鹿种群数量的恢复需要更好地保护工作。

东北马鹿脾脏T、B淋巴细胞及真DNA和RNA分布规律的研究

用核酸的组织化学方法，对东北马鹿脾脏Ｔ、Ｂ淋巴细胞及其ＤＮＡ和ＲＮＡ的分布进行研究。结果表明：东北马鹿脾脏Ｂ－淋巴细胞主要分布在脾索中；Ｔ－淋巴细胞分布在脾小结外周、动脉周围淋巴鞘、边缘区和椭球内。ＤＮＡ存在于Ｔ、Ｂ淋巴细胞核内．ＲＮＡ存在于胞浆中。东北马鹿脾脏白髓不发达，脾小结未见生发中心。红髓发达，脾窦宽大。椭球数量较少，但体积较大。脾小梁丰富。

通过粪球形态快速鉴定马鹿性别的方法与分子鉴定

通过SRY基因扩增,对76份野生东北马鹿粪便DNA进行了性别鉴定,其中雄性49份,雌性27份。观察发现粪球形态可分两类:子弹状、枣核状。子弹状呈短粗型,长宽比较小;枣核状呈细长型,长宽比较大。对76份样品进行分类:子弹状51份、枣核状25份。并以样品长、宽平均值的比值(R)为指标快速聚类,并建立了判别方程。统计指出判别结果与实际性别吻合率79.71%;形态分类与实际性别吻合率90.56%,即子弹状为雄性,枣核状为雌性。结果提示今后的野外研究可直接利用粪球形态判定粪样性别,长宽比判别方程可作为辅助。

黑龙江完达山东部林区偷猎对野生马鹿种群的影响

2004年和2005年冬季,在黑龙江省完达山林区,通过实地调查、发放调查表和走访当地居民等方法,初步确定了该林区偷猎活动的主要方式及其对野生马鹿种群繁殖率和存活率的影响,并根据实际调查状况和存在的问题,提出了相应的保护和管理建议。结果表明:研究地区造成马鹿死亡的因素主要包括枪打、下套和下药,此外也存在狗咬、自然灾害和疫病等。在研究地区各林场的偷猎频率和强度各不尽相同,但高频率和高强度偷猎活动是引起马鹿种群数量急剧下降的最主要原因。

马鹿臼齿磨损率与年龄关系的研究

1991～ 1 994年 ,在黑龙江省东部完达山林区随机收集到野生马鹿下颌骨 95个样本。采用Robinette等提出的下臼齿测量方法 ,测量了其中 72个样本 (年龄≥ 2 5龄 ) ,并提出了马鹿臼齿磨损率 (MR)的计算公式 :MR =Σ3i=1wi/Σ3i=1hi (其中 ,wi=第i个下臼齿咀嚼面的最大宽度平均值 ;hi=第i个下臼齿舌侧牙龈线至齿尖或最高点的高度平均值 )。通过MR与牙齿齿轮年龄鉴定法确定的鹿年龄之间的比较与数理统计分析 ,探讨了二者之间的关系 ,并给出了根据MR划分马鹿年龄或年龄组的定量指标及置信区间。

黑龙江东部马鹿集群行为的初步观察

本文根据野外观察到的112群马鹿,初步研究了马鹿的集群行为。野生鹿群大小范围为2—19头,平均群内头数为3.55,鹿群在各季节具有明显的变化。通过对3种类型鹿群的观察分析,发现母仔群是主要的鹿群类型,该类型在各季节中所占比例较大(26％—53％),且在产仔期和哺乳期群内分化较高。而在妊娠期群内分化较低。公鹿群在全年比较稳定,混合群在各季节变化较大,每群平均数4.58头,为3种鹿群类型中最大者。

半散放东北马鹿人工授精技术

人工授精技术的关键是母鹿的发情鉴定。半散放母鹿的发情表现分为 3种类型 :隐性发情、表现发情和发情 ,表现类型不同 ,受孕率也不同。发情母鹿的受孕率为 95 0 0 % ;表现发情母鹿的受孕率为 71 43 % ,隐性发情母鹿的受孕率为 5 0 0 0 %。人工授精输精率为 85 5 8% ,受孕率为 78 65 %。同自然繁殖的母鹿相比 ,受孕率提高近 3 0 %。

东北马鹿鹿心血中营养成分研究

目的研究东北马鹿鹿心血中的各种营养物质。方法对东北马鹿鹿心血中的氨基酸、蛋白质、粗脂肪及各种营养元素进行测定分析。结果东北马鹿鹿心血中含有氨基酸、蛋白质等营养物质。结论东北马鹿鹿心血中营养成分的研究数据,为其医用价值提供理论依据。

黑龙江省完达山东部林区马鹿种群遗传多样性的微卫星分析

黑龙江省完达山东部林区是东北马鹿(Cervus elaphus xanthopygus)种群密度较高的分布区之一,本文对2年冬季采集的167份马鹿粪便进行了7个微卫星座位的个体识别,评价了马鹿种群遗传多样性,并分析近期马鹿数量的急剧下降对种群遗传结构的影响。结果表明:167份粪便DNA分属66只个体;种群平均等位基因数9.00±2.77;平均有效等位基因数3.97±0.99;平均多态信息含量0.69±0.09;平均期望杂合度0.74±0.08;平均观察杂合度0.69±0.08。整个种群显著偏离Hardy-Weinberg平衡,但种群固定系数Fis为0.060,没有显著偏离零。可见,完达山东部林区马鹿种群遗传多样性较高,数量的急剧下降近期还没有表现在种群遗传结构上。

塔里木马鹿特异性PCR及PCR-RFLP鉴定

目的:建立能够快速、准确地进行塔里木马鹿的基因鉴定方法。方法:采用通用引物对L1091/H1478调出3种不同马鹿的线粒体12S rRNA片段进行比对分析,根据差异片段设计能够鉴别出塔里木马鹿的特异性引物对进行PCR鉴别,并寻找出一个能够识别差异片段的限制性内切酶进行酶切鉴别。结果:使用设计的特异性引物对CEYS/CEYA进行PCR,只有塔里木马鹿的基因组DNA可以获得扩增条带,可以很好的鉴别出塔里木马鹿;限制性内切酶PshBⅠ可以识别塔里木马鹿与其它马鹿的差异序列,只有塔里木马鹿的12S rRNA片段可以被切成2个小片段,可以鉴别是否为塔里木马鹿。结论:本实验建立的特异性PCR及PCR-RFLP可以作为塔里木马鹿的基因鉴定方法。