血清γ-谷氨酰转肽酶与冠状动脉病变严重程度的相关性

目的探讨血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)与冠状动脉病变严重程度之间的关系,评估血清GGT与急性冠状动脉综合征(ACS)传统危险因素之间的相互作用。方法顺序选取413名ACS行冠状动脉造影患者,采用Gensini积分法评估病变累及血管支数及狭窄程度。分别检测血清GGT、丙氨酸转氨酶(ALT)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血脂、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、脑钠尿肽(BNP)。结果 Gensini积分高分组血清GGT明显升高(P<0.05);多因素回归分析显示,logGGT与冠状动脉病变支数密切相关,且与2型糖尿病、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、hs-CRP呈正相关(P<0.05),与年龄呈负相关(P<0.05),其中TC对GGT影响最强。进一步研究Gensini积分与血清GGT及冠心病危险因素的关系,显示logGensini与GGT、ALT、年龄、病变血管支数呈显著正相关(P<0.05)。结论血清GGT参与冠状动脉粥样斑块的发生发展,检测GGT对评估冠状动脉病变的严重程度具有临床应用价值。

瘤胃微生物体外利用赖氨酸对有关酶和尿素氮的影响

为了测定体外培养条件下瘤胃微生物的赖氨酸消化率及赖氨酸降解过程中谷氨酸脱氢酶(GDH)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和尿素氮(UN)的变化及其相关关系,经瘤胃瘘管取成年山羊瘤胃液混匀后分装至12个血清瓶中,每瓶40 mL,同时每瓶加入淀粉20 mg;血清瓶随机均分为2组,其中一组每瓶再注入8 mL0.25 mmol/L的L-赖氨酸作为赖氨酸组,另一组每瓶再注入等体积的去离子水作为对照,一并放入39℃培养箱培养16 h,并于培养的0,8和16 h取培养液测定GDH、γ-GT、GOT、GPT、UN和游离氨基酸。结果表明,底物中添加赖氨酸时,培养液中UN浓度可保持稳定,否则培养16 h后的UN浓度极显著升高;GDH活性在赖氨酸的降解代谢过程中随培养时间的延长而增加;培养时间的长短显著影响GDH、γ-GT活性及UN的含量(P≤0.05)。在不添加赖氨酸的条件下,培养16 h的γ-GT与16 h的GPT和UN均呈极显著正相关(R=0.95;R=0.92)。当底物中添加赖氨酸时,培养0 h的GDH与培养8 h的γ-GT显著相关(R=0.88);而培养8 h的γ-GT又与8 h的UN显著相关(R=0.86);培养0,8和16 h的赖氨酸浓度与培养0 h的GDH呈负相关,与培养8 h的GDH呈极显著负相关(R=-0.94)。对照组培养8和16 h的赖氨酸消化率分别为31.64%和63.59%,赖氨酸组培养8和16h的赖氨酸消化率则分别为49.24%和74.55%,均极显著高于对照组培养8 h的消化率。提示在氮源缺乏的条件下,瘤胃微生物可能通过γ-GT、GPT和GOT的共同作用增加尿素氮的积累以维持生长,瘤胃微生物的赖氨酸降解本质上属于酶解。

乳糖诱导γ-ggt基因在大肠杆菌中的表达

以重组大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET28/γ-ggt)作为研究对象,借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物的表达规律进行了优化研究。分析比较了诱导的起始阶段、所需的乳糖浓度和诱导持续时间等参数对重组产物表达的影响。实验结果表明,对于T7lac启动子控制的重组目的产物,乳糖可以作为诱导剂;在对诱导条件进行优化控制的前提下,乳糖诱导目的产物的绝对表达量虽然不及IPTG,但相对成本却比IPTG低得多,且没有毒性。研究结果为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶工业化生产提供了一定的参考。