临床酵母样真菌的感染特点及耐药性研究

目的了解临床酵母样真菌的感染类型、分布以及耐药情况,为临床诊断治疗提供合理的用药依据。方法采用常规方法进行真菌培养,用科玛嘉显色培养基联合法国生物梅里埃API 20C AUX鉴定条进行鉴定,药敏试验采用微量稀释法。结果864株酵母样真菌中,白色念珠菌619株(71.6%),其次为热带念珠菌116株(13.4%)和克柔念珠菌47株(5.4%),非白色念珠菌感染的比例逐年上升(21.5%)。其中,呼吸道标本酵母样真菌检出率最高,达79.7%,其次是消化道为8.8%,泌尿道为4.7%。科室分布依次为干部科、呼吸科、急诊内科、血液科等;白色念珠菌对两性霉素B、5氟-胞嘧啶高度敏感,达90%以上,对氟康唑和伊曲康唑的敏感性有所降低。结论酵母样真菌的检出率与患者基础疾病密切相关;对氟康唑等药物的敏感性有下降的趋势,未发现对4种药物同时耐药的菌株,提示在治疗中,药敏监测是非常必要的。

MALDI-TOF-MS技术在酵母样真菌鉴定中的临床应用评价

目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time Of FlightMass Spectrometry,MALDI-TOF-MS）技术对酵母样真菌鉴定的临床应用价值。方法将2015年6月-2016年6月临床检出的142株酵母样真菌标本同时采用MALDI-TOF-MS技术和传统真菌培养方法进行鉴定,记录结果并对结果进行对比分析。结果两种方法对于常见的白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和新生隐球菌的鉴定率很高（100%）,符合率较高（100%）;对于少见的葡萄牙念珠菌、解脂念珠菌、产朊念珠菌,两种方法的符合率较低,分别为25.00%、00.00%、00.00%。结论 MALDI-TOF-MS技术对酵母样真菌的鉴定率较高,操作简便快速,是传统真菌培养鉴定的有力补充,可将其推广应用于酵母样真菌的早期快速鉴定。

儿童酵母样真菌的培养分离及其耐药性分析

目的探讨引起医院感染酵母样真菌的类型及其耐药性,指导临床合理用药。方法对1777份住院患儿的各种标本分离出的196株酵母样真菌,采用科玛嘉念珠显色培养基培养菌,用API-20CAUX酵母样真菌鉴定试条进行鉴定,用念珠菌药敏试条ATB-FUNGUS进行药敏试验。结果酵母样真菌196株中白色假丝酵母菌150株(76.5%),近平滑假丝酵母菌12株(6.13%),新型隐球菌、光滑假丝酵母菌各11株(5.62%),热带假丝酵母菌7株(3.58%),克柔假丝酵母菌3株(1.53%),葡萄牙假丝酵母菌2株(1.02%)。以呼吸内科、血液科所占比例较高。150株白色假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶(5-FC)、二性霉素B(AMB)、氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)的敏感率分别为100%、100%、99.3%、88.6%。结论引起患儿真菌感染的念珠菌仍以白色假丝酵母菌为主,临床用药应依据药敏结果合理选用。

MALDI-TOF-MS技术快速鉴定临床酵母样真菌的应用评价

目的评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)在快速鉴定临床分离的酵母样真菌中的应用价值。方法收集临床分离的酵母样真菌135株,分别用VITEK MS、API20C和CHROMargar显色培养同时进行鉴定与比较,χ2检验分析VITEK MS和API及显色培养基鉴定结果的准确率,以真菌内转录间隔区(ITS)基因测序作为鉴定结果的金标准,同时比较各种方法在临床使用中的优缺点。结果 VITEK MS、API20C和显色培养基鉴定的准确率分别为98.5%(133/135)、78.5%(106/135)、59.3%(80/135),经χ2检验分析,差异有统计学意义(χ2=51.996,P<0.05)。结论 MALDI-TOF-MS可将酵母样真菌快速、准确地鉴定到种。

儿童患者标本中分离的酵母样真菌的分布及药敏试验

目的了解儿童患者标本中分离出的酵母样真菌的临床分布及其耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法收集2008年1月至12月临床分离的266株酵母样真菌,采用科玛嘉念珠显色培养基和API-20CAUX酵母样真菌鉴定试条鉴定,用假丝酵母菌药敏试条ATB-FUNGUS药敏板测定酵母菌对5氟-胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的敏感性,并以WHONET 5.3软件进行结果分析。结果在临床分离的266株酵母样真菌中,白色假丝酵母菌215株(80.8%),其他酵母菌51株(19.2%)。主要分布在下呼吸道。白色假丝酵母菌对5氟-胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑敏感率分别为99.5%、99.5%、94.9%、90.2%。结论酵母样真菌感染中以白色假丝酵母菌为主。5氟-胞嘧啶、两性霉素B对白色假丝酵母菌有很高的敏感率,应加强对白色假丝酵母菌感染与耐药性情况的监测,以指导临床合理使用抗生素。

自动尿液分析仪用于酵母样真菌筛查的临床及实验室评价

目的评估UF-1000i全自动尿沉渣分析仪对尿液中酵母样真菌检测能力。方法回顾性分析145例临床尿培养标本中酵母样真菌检测阳性且同时检测尿液常规分析的病例,以培养结果为标准,评估UF-1000i自动分析仪器对酵母样真菌的检测效果。结果 UF-1000i尿液自动分析仪器对尿液真菌总体检出率为55.2%,对临床最常见的白色念珠菌检出率最低(30.9%),热带念珠菌检出率较高(75.8%),对不同念珠菌检出效果差异显著。在一定浓度范围内,红细胞假阳性程度与念珠菌在尿液中的含量呈正比。结论 UF-1000i对酵母样真菌的检测能力有限,且容易造成尿液红细胞计数假性增高。

酵母样真菌感染及对氟康唑药敏结果分析

目的 了解酵母菌引起的深部真菌感染菌种分布 ,用氟康唑对其进行药物敏感监测。方法 选择氯化三苯四氮唑 (TTC)培基上不同颜色菌落 ,用API2 0AUX做菌种鉴定 ;用纸片扩散法与微量稀释法测定分离菌对氟康唑的敏感性。结果 2 95株酵母样真菌中 ,白色念珠菌 179株、热带念珠菌 5 1株、近平滑念珠菌 4 2株 ,三者占酵母样真菌分离率的 92 % ,药敏结果显示 ,氟康唑除对 3株光滑念珠菌全部耐药外 ,对其余菌株MIC值均在0 12 5～ 4 μg/ml之间。结论 目前临床深部真菌感染以白色念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌等为主 ,且对氟康唑有较好的体外抗菌活性。

酵母样真菌致医院内感染的危险因素及耐药性

目的:分析酵母样真菌致医院内感染的危险因素及其耐药性,为合理使用抗真菌药物,控制医院内感染提供方法学依据。方法:采用系统回顾性调查研究方法,对我院2 0 0 2年～2 0 0 4年由酵母样真菌引起的医院内感染的6 5 8例病例进行分析。结果:主要内源性危险因素是抗生素滥用、严重基础疾病、年龄>5 5岁、住院时间>2 0d、激素应用、化疗、免疫抑制剂使用;外源性危险因素是介入治疗、病室内环境、温度和湿度等。酵母样真菌主要以白假丝酵母菌(6 9 4 % )、热带假丝酵母菌(19 2 % )、近平滑假丝酵母菌(6 8% )、克柔假丝酵母菌(2 % )等为主;2 0 0 2年～2 0 0 4年酵母样真菌致医院内感染所占医院感染率呈逐年增高趋势,分别为10 2 %、18 2 %和2 5 6 %。酵母样真菌对5 -氟胞嘧啶(95 5 % )、两性霉素B (97 3% )、制霉菌素(96 4 % )、氟康唑(94 2 % )有较高的敏感率,对咪康唑(14 2 % )、酮康唑(14 2 % )、益康唑(14 2 % )有相对比较高的耐药率。结论:为有效控制酵母样真菌的医院内感染,应考虑酵母样真菌致医院内感染的各种危险因素,严格消毒管理制度,合理使用抗真菌药物。

Sysmex UF-1000i尿流式分析仪检测住院患者尿标本类酵母菌的临床评价

目的评价Sysmex UF-1000i尿流式分析仪检测尿标本类酵母菌的分析性能。方法应用尿流式分析仪检测我院住院患者尿标本,对仪器检测类酵母菌阳性尿标本进行镜检、培养鉴定;同时随机选择同期仪器检测阴性标本作对照。结合临床,判断患者尿路类酵母菌定植或感染。结果 2010年10月-2010年12月间共检测6019份尿标本,尿流式分析仪检测类酵母菌阳性127份,经培养证实82份为真阳性。同期仪器检测阴性标本121份中有12份培养阳性。以培养作为金标准,尿流式分析仪分析尿中类酵母菌试验敏感性为87.23%、特异性为70.78%、准确度为77.02%、阳性预测值为64.57%,阴性预测值为90.08%。菌种前三位的是以光滑念珠菌(43.40%)、白念珠菌(21.69%)、热带念珠菌(14.15%)。阿萨希毛孢子菌也存在一定比例(5.66%)。尿中类酵母菌真阳性患者多数患有多种基础疾病,以2型糖尿病(25.61%)、慢性泌尿系统疾病(18.29%)和颅脑脊髓损伤(17.07%)为主;实施的医疗措施以抗细菌药物(52.44%)、留置导尿管(35.37%)多见(P<0.05)。尿流式分析仪检测阴性而培养阳性12例患者均为尿路念珠菌定植。尿流式分析仪检测阳性并且培养阳性82例患者中,69例(84.15%)为类酵母菌尿路定植;13例(15.85%)为尿路感染,其中1(1.22%)例发展为热带念珠菌血症。结论 Sysmex UF-1000i尿流式分析仪对尿标本类酵母菌有较强的筛查价值。实验室应对仪器类酵母菌检测阳性标本进行镜检后确认。临床医师应对类酵母菌检测阳性患者结合其临床表现,采取不同的治疗措施。

酸奶自然发酵剂“西藏灵菇”菌体微观丝状物的培养与鉴定

对西藏灵菇菌体研磨液进行了分离及纯化培养,发现西藏灵菇菌体是由酵母菌、乳酸杆菌、乳酸球菌、醋酸菌等共同构成的共生菌系,是一种自然的微生物固定化现象产生的菌胶团。西藏灵菇菌的菌悬液在显微镜下可观察到数目众多的不规则丝状物,经形态学特征和培养性鉴定,该丝状物是由假丝酵母菌产生的假菌丝,且可分离培养。

近两年我院浅部真菌分布和深部酵母样真菌药敏情况分析研究

目的分析我院皮肤科浅部真菌的分布情况和ICU深部真菌药敏结果及其菌种分布情况,为临床合理选用抗真菌药物提供依据。方法对我院2011年07月-2013年06月从皮肤科送检标本分离的浅部真菌的分布情况和从ICU分离的深部真菌分布情况及其药敏试验结果进行回顾性分析。结果皮肤科浅部真菌感染以毛癣菌属为主。ICU分离的深部真菌以白色酵母样真菌为主;未发现对两性霉素B和卡泊芬净耐药的酵母样真菌;白色酵母样真菌对5-氟胞嘧啶的敏感性达90.5%,对氟康唑、伊曲康唑和沃尔康唑的敏感性也都在80%以上;而非白色酵母样真菌对氟康唑敏感率为58.8%,而伊曲康唑的敏感率仅为41.2%。结论浅部真菌感染以毛癣菌属为主,深部真菌感染以白色酵母样真菌为主;白色酵母样真菌的药物敏感性高于非白色酵母样真菌。

Rosco纸片扩散法检测酵母样真菌的药敏试验

目的探讨Rosco纸片扩散法检测酵母样真菌对抗真菌药物的敏感性。方法临床标本分离出酵母样真菌92株,采用VITEK-60YBC卡结合科码嘉念珠菌显色培养基(CHROMager)进行鉴定分型,用Rosco纸片扩散法进行药敏试验。结果92株酵母样真菌中以白色念珠菌为主,占69.6%。分离菌株对氟康唑(FCZ)、酮康唑(KTC)、伊曲康唑(ITC)、两性霉素B(AMB)、5-氟胞嘧啶(5-FC)的敏感率分别为95.7%、96.7%、100%、100%、93.5%。结论广谱抗生素、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛应用,增加了酵母菌感染和耐药菌株出现的机会,加强真菌的检测和耐药性监测已具有越来越重要的意义。

一种快速提取酵母样真菌DNA方法的研究

对一种提取酵母样真菌染色体DNA方法进行实验,试图找到一种快速简便提取酵母样真菌的方法,并对提取结果进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增等方法的鉴定。结果表明:用此方法提取的酵母样真菌基因组DNA浓度为395.5ng/μL,OD260/OD280比值为1.58~1.66,可满足PCR特异性扩增捡验酵母样真菌的需要。

纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑药敏试验及临床应用

目的探讨纸片扩散法在酵母样真菌药敏试验中的临床应用价值。方法应用纸片扩散法和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法,测定临床分离的113株不同酵母样真菌菌株对氟康唑的药敏状况,并以3株标准菌株作质量控制。结果两种方法符合率为89.4%。结论纸片扩散法可以代替NCCLS推荐的微量肉汤稀释法在临床推广应用。

阴道感染酵母样真菌的鉴定及耐药性分析

目的了解妇科引起阴道炎真菌的分布及耐药性分析。方法对常规涂片法检出的酵母样真菌用科玛嘉念珠菌显色培养基初步鉴定,通过形态学和AP1 20CAUX真菌鉴定条进一步证实,Rosco纸片扩散法进行药敏分析。结果 401份标本中共检出89株酵母样真菌,其中白色念珠菌占60．7％,热带念珠菌占20．2％,光滑念珠菌占3．3％,啤酒念珠菌占7．9％,克柔念珠菌占6．7％,近平滑念珠菌占1．1％;耐药性较高的是灰黄霉素(100％)、氟胞嘧啶(87．5％),耐药性较低的药物为游霉素(0％)、制霉菌素(4．5％)、两性霉素 B(5．6％)、伊曲康唑(18．0％)。结论酵母样真菌在阴道分泌物中的分布已发生变化,白色念珠菌比例有所下降,非白色念珠菌比例增加,酵母样真菌对常用的抗真菌药物除游霉素、两性霉素、制霉菌素敏感性较高外,其它有所降低,临床医生应根据药敏结果来合理用药。

酵母样真菌3104株鉴定及耐药性分析

目的对引起感染的酵母样真菌的类型及其耐药特性进行研究,以指导临床合理用药。方法从2002年1月-2008年12月中山市博爱医院及清远市人民医院临床送检标本中,常规培养和分离酵母样真菌,用法国生物梅里埃API-20CAUX系统对酵母样真菌进行鉴定,用ATB-FUNG药敏试条进行药敏试验。结果共分离到3104株酵母样真菌,其中白色假丝酵母菌占82.5%,光滑假丝酵母菌占9.54%,热带假丝酵母菌占5.06%,克柔假丝酵母菌占0.86%,其他酵母菌占1.96%。酵母样真菌对制霉菌素、两性霉素B敏感,对5-氟胞嘧啶、咪康唑、益康唑、酮康唑存在不同程度的耐药。结论临床需要加强真菌送检培养,合理使用抗真菌药物,尽量避免单纯经验用药,以减少耐药菌株的出现。

一种快速提取新生隐球菌及其他酵母样真菌DNA方法

目的寻找一种快速提取酵母样真菌DNA的方法。方法使用酶溶解法提取新生隐球菌及其他酵母样真菌DNA,并对提取的DNA通过特异性引物进行PCR,所得产物进行酶切验证。结果用此方法提取的新生隐球菌基因组DNA浓度为280～395ng/μL,OD260/OD280比值为1.6～1.8,所提取的DNA可用于PCR的扩增检测特异性酵母样真菌。结论该方法可以用于提取新生隐球菌及其他酵母样真菌。

酵母样真菌液体培养药敏试剂盒的研制

目的为酵母样真菌药敏提供操作简便、经济实用、准确可靠的体外液体药敏试剂盒,给临床用药提供参考依据。方法参照美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A方案,根据药物MIC值,参照文献建立高低两个药敏浓度的液体培养药敏试剂盒;用标准参考菌株(c.p,ATCC22019、c.k,ATCC6258)为试验菌株测定试剂盒的重复性和稳定性;用221株临床分离株与ATB FUNGUS3药敏试剂盒进行比较。结果批内MIC符合率为97.50%,批间MIC符合率为95.83%;试剂盒在-20℃保存6个月内稳定,MIC符合率都在90.00%以上;与ATB FUNGUS3药敏试剂盒一致性较好,Kappa>0.7,P<0.05。结论酵母样真菌培养药敏试剂盒可以满足临床检验需求,值得推广应用。

Sysmex UF1000i尿沉渣分析仪对酵母样细胞异常提示的应用分析

目的：分析尿液酵母样细胞异常提示的实用性。方法：收集住院和门诊病人做尿常规检查提示酵母样细胞异常并同时留尿做真菌培养的病例213例，进行尿沉渣镜检并跟踪培养结果；另一方面，对尿真菌培养阳性同时有做尿常规检查的样本192例进行分析。结果：仪器对酵母样细胞提示异常的镜检复查结果：真菌占28.2%，酵母样红细胞占8.9%，畸形红细胞占15.0%，结晶占12.2%，细菌占30.0%，精子占1.8%，其它占3.7%；酵母样细胞异常提示的病人标本真菌培养阳性的标本有65例（占30.5%）。真菌培养阳性的192例病人的尿液中仪器提示酵母样细胞异常的有115例（占59.9%）。结论：通过对酵母样细胞异常提示的标本进行复检分析，把准确的信息反馈给医生以协助诊断。此外，对仪器没提示的标本也不容忽视。

医院感染酵母样真菌分布及耐药性分析

目的了解医院感染酵母样真菌分布及耐药性性况,供临床借鉴。方法采用回顾性资料分析2005年4月～2006年11月间,从我院各临床标本中分离到的酵母样真菌菌种及其耐药性情况。结果从各临床标本中分离出219株酵母样真菌,其中白色念珠菌占41.5%,葡萄牙念珠菌15.1%,热带念珠菌12.4%,白珠拟酵母菌9.6%,酵母样真菌对多烯类药的两性霉素B和制毒菌素有高度敏感性,分别是97.6%和96.5%;对5-氟胞嘧啶和酮康唑敏感性低,分别是33.4%和37.9%。结论医院感染酵母样真菌主要是白色念珠菌,各种酵母样真菌对唑类各核苷类抗真菌药有不同程度耐药,应引起临床关注。