黄鱼鱼鳔肽分离及其诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的机制

为探讨黄鱼鱼鳔肽诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的作用机制,从黄鱼鱼鳔酶解产物中分离纯化得到鱼鳔肽,鉴定其氨基酸序列。采用CCK-8法检测鱼鳔肽作用后DU-145细胞抑制率的变化;AO/EB法检测DU-145细胞凋亡情况;流式细胞术检测DU-145细胞凋亡率和周期;免疫印记法检测DU-145细胞凋亡蛋白表达。结果表明,分离得到的鱼鳔肽YCSB-1c中包含Ser-Pro-Ser-Pro和Gly-Pro-Ala-Arg两条寡肽。与空白组相比,YCSB-1c组中凋亡细胞明显增多,且呈质量浓度依赖性;流式细胞仪检测得出YCSB-1c组中存活细胞明显减少,晚期凋亡细胞明显增多。YCSB-1c将DU-145细胞的细胞周期阻滞在G0/G1期,上调Bax、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达,诱导DU-145细胞凋亡。YCSB-1c能有效诱导DU-145细胞凋亡,其作用机制与细胞周期停滞和线粒体介导的凋亡途径有关。

响应面优化黄鱼胶酶解工艺及其基本成分分析

在评价黄鱼胶营养价值的基础上。以水解度(Degree of hydrolysis,DH)为评价指标,对酶解时间、酶解温度、酶解pH值、复合酶比例和酶添加量分别进行单因素试验,进而以响应面优化得出其最佳的酶解工艺条件。结果表明:黄鱼胶基本成分蛋白质、脂肪、多糖、灰分的含量分别为82.2%、2.00%、0.22%、0.83%。黄鱼胶中水解氨基酸含量高达81.7%,其中甘氨酸占总水解氨基酸的24.72%。制备鱼胶原蛋白肽的最佳酶解工艺为酶解时间4.67 h、酶解温度56.73℃、酶解pH值8.02、中性蛋白酶和碱性蛋白酶的复合比例1:3、酶添加量1.5%,此时鱼胶的水解度可达39.94%。综上,黄鱼胶的胶原蛋白含量丰富,研究可为黄鱼胶的复合酶解工艺提供参考。