升麻鳖甲汤对急性髓系白血病模型小鼠骨髓线粒体分裂及自噬相关蛋白表达的影响

目的探讨升麻整甲汤治疗急性髓系白血病(AML)的可能作用机制。方法48只NSG免疫缺陷小鼠随机分为空白组、模型组、升麻鳖甲汤全方组、升麻鳖甲汤拆方组,每组12只。除空白组外,其余各组小鼠采用小动物辐照仪予200cGy^(60)Co全身照射后,尾静脉注射对数生长期的KG-la细胞1×10^(6)个(0.2ml),建立AML小鼠模型。1周后模型组和空白组小鼠予生理盐水每次0.1ml灌胃,升麻整甲汤全方组小鼠予浓度为1.73g/ml的升麻整甲汤药液每次0.1ml灌胃,升麻鳖甲汤拆方组小鼠予浓度为1.43g/ml的升麻鳖甲汤拆方药液每次0.1ml灌胃,各组均每日灌胃2次,连续28天。每日观察小鼠一般情况,每隔两日记录各组小鼠生存情况。干预28天后检测外周血象(包括白细胞绝对值、血红蛋白、血小板计数);采用HE染色法观察小鼠肝、脾、骨髓组织病理变化;分别采用Western Blot法、免疫荧光染色法检测骨髓中线粒体分裂相关蛋白动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)及线粒体自噬相关蛋白PTEN诱导激酶1(Pink1)、E3泛素连接酶(Parkin)表达水平。结果空白组小鼠生存率为83.33%(10/12),模型组为25.00%(3/12),升麻整甲汤全方组为66.67%(8/12),升麻整甲汤拆方组为41.67%(5/12),差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组小鼠骨髓、脾脏、肝脏组织中可见白血病细胞浸润,脾脏组织结构破坏,肝脏组织可见散在局灶性变性坏死。各药物干预组小鼠骨髓、脾脏及肝脏组织中白血病细胞浸润均有所减轻,脾脏组织结构轻度破坏,其中升麻鳖甲汤全方组改善更为显著。与空白组比较,其余各组小鼠外周血白细胞绝对值升高,血红蛋白、血小板计数以及骨髓Drpl、Fis1、Pink1、Parkin蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,升麻整甲汤全方组白细胞绝对值降低,血红蛋白、血小板计数以及骨髓Drpl、Fis1、Pink1、Parkin蛋白表达升高;升麻鳖甲汤拆方组白细胞绝对值降低,血红蛋白、血小板计数以及骨髓Fis1、Parkin蛋白表达升高(P<0.05)。升麻整甲汤全方组白细胞绝对值低于升麻整甲汤拆方组,骨髓Drpl、Pink1蛋白表达高于升麻鳖甲汤拆方组(P<0.05)。结论升麻鳖甲汤能够改善AML模型小鼠生存状态和生存时间,改善肝脏、脾脏、骨髓组织病理损伤,且升麻整甲汤全方相较于拆方的治疗作用更加显著,其机制可能与调高线粒体动力学分裂、诱导细胞自噬有关。