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基于IYPT的YPT评价模式以及培养学生创新思维的认识与探索 被引量:7
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作者 张一驰 陆建隆 《大学物理》 北大核心 2016年第8期55-60,共6页
创新思维的培养历来是教育的重点和难点.本文从近年引入中国的IYPT的赛制出发,结合作者参加CUPT以及JSYPT相关工作经历,在梳理YPT评价模式、探讨其特点基础上对培养学生创新思维的实施进行了探索.并以2014年JSYPT决赛"磁制动"... 创新思维的培养历来是教育的重点和难点.本文从近年引入中国的IYPT的赛制出发,结合作者参加CUPT以及JSYPT相关工作经历,在梳理YPT评价模式、探讨其特点基础上对培养学生创新思维的实施进行了探索.并以2014年JSYPT决赛"磁制动"比赛分析为例探讨了YPT评价模式用于培养学生创新思维的实践策略. 展开更多
关键词 Iypt ypt评价模式 创新思维 实践策略
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酿酒酵母中Tca17经Rab蛋白Ypt31参与囊泡运输和细胞自噬的研究 被引量:2
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作者 刘岩 邹珅珅 +1 位作者 陈永 梁永恒 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期1-8,共8页
为了探讨蛋白质转运颗粒(TRAPP)复合体相关蛋白Tca17通过何种Rab蛋白参与囊泡运输和细胞自噬过程,用绿色荧光蛋白(GFP)标记野生型和TCA17敲除突变体中囊泡运输标志蛋白Snc1后,检测菌株生长和GFP-Snc1运输缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对... 为了探讨蛋白质转运颗粒(TRAPP)复合体相关蛋白Tca17通过何种Rab蛋白参与囊泡运输和细胞自噬过程,用绿色荧光蛋白(GFP)标记野生型和TCA17敲除突变体中囊泡运输标志蛋白Snc1后,检测菌株生长和GFP-Snc1运输缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对突变体的生长和GFP-Snc1运输缺陷的抑制情况。相应地,用GFP标记野生型和TCA17敲除突变体中细胞自噬标志蛋白Atg8后,检测菌株生长和在营养缺乏条件下GFP-Atg8的运输和降解缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对突变体的生长和GFP-Atg8的运输及降解缺陷的抑制情况。结果表明:敲除TCA17导致菌株高温敏感,Snc1运输受阻以及Atg8运输和降解异常,过量表达Rab蛋白Ypt31能够抑制TCA17敲除突变体的囊泡运输和细胞自噬缺陷表型,而Rab蛋白Ypt1不具有类似功能,这说明Tca17通过Rab蛋白Ypt31参与囊泡运输和细胞自噬过程。 展开更多
关键词 囊泡运输 细胞自噬 TRAPP复合体 Tca17 ypt31 ypt1
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以Ypt1基因为靶标的致病疫霉菌Phytophthora infestans的分子检测 被引量:2
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作者 孟军 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期46-53,共8页
三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白基因(Ypt1)是一个与原癌基因Ras(Rat sarcoma)相关的基因,在酵母中,该基因编码一个与Ras相关GTP结合蛋白。为了研究以Ypt1基因为分子靶标的致病疫霉菌(P.infestans)检测技术,比较了30种卵菌Ypt1基因的序列,以该... 三磷酸鸟苷(GTP)结合蛋白基因(Ypt1)是一个与原癌基因Ras(Rat sarcoma)相关的基因,在酵母中,该基因编码一个与Ras相关GTP结合蛋白。为了研究以Ypt1基因为分子靶标的致病疫霉菌(P.infestans)检测技术,比较了30种卵菌Ypt1基因的序列,以该序列为靶标设计了1对针对P.infestans的特异性PCR引物Pi1/Pi2。试验结果表明,在供试的55种不同疫霉菌和真菌的144个菌株中,利用这1对引物只能从P.infestans基因组DNA中分别扩增出1条分子量为369 bp的特异性条带,这1对引物的检测灵敏度为100 pg。以疫霉菌Ypt1通用引物Yph1F/Yph2R结合这1对特异引物进行套式PCR扩增,使引物Pi1/Pi2的检测灵敏度提高了10倍,检测到10 pg的基因组DNA。通过套式PCR,引物Pi1/Pi2对游动孢子和卵孢子的检测灵敏度分别为3个游动孢子和1个卵孢子;以Pi1/Pi2引物,分别采用单轮PCR和套式PCR可检测马铃薯发病组织和病田土壤的致病疫霉。以上结果证明Ypt1基因适合作为疫霉菌分子检测靶标。采用以这1对特异引物建立的以PCR技术为基础的分子检测方法,可对田间土壤和发病植物组织中的P.infestans进行快速、灵敏的检测。 展开更多
关键词 致病疫霉 ypt1基因 分子检测
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Evaluating the benefit of adjuvant chemotherapy in patients with ypT0-1 rectal cancer treated with preoperative chemoradiotherapy
4
作者 Ye Won Jeon In Ja Park +7 位作者 Jeong Eun Kim Jin-Hong Park Seok-Byung Lim Chan Wook Kim Yong Sik Yoon Jong Lyul Lee Chang Sik Yu Jin Cheon Kim 《World Journal of Gastrointestinal Surgery》 SCIE 2021年第9期1000-1011,共12页
BACKGROUND Adjuvant chemotherapy(ACTx)is recommended in rectal cancer patients after preoperative chemoradiotherapy(PCRT),but its efficacy in patients in the early post-surgical stage who have a favorable prognosis is... BACKGROUND Adjuvant chemotherapy(ACTx)is recommended in rectal cancer patients after preoperative chemoradiotherapy(PCRT),but its efficacy in patients in the early post-surgical stage who have a favorable prognosis is controversial.AIM To evaluate the long-term survival benefit of ACTx in patients with ypT0–1 rectal cancer after PCRT and surgical resection.METHODS We identified rectal cancer patients who underwent PCRT followed by surgical resection at the Asan Medical Center from 2005 to 2014.Patients with ypT0–1 disease and those who received ACTx were included.The 5-year overall survival(OS)and 5-year recurrence-free survival(RFS)were analyzed according to the status of the ACTx.RESULTS Of 520 included patients,413 received ACTx(ACTx group)and 107 did not(no ACTx group).No significant difference was observed in 5-year RFS(ACTx group,87.9%vs no ACTx group,91.4%,P=0.457)and 5-year OS(ACTx group,90.5%vs no ACTx group,86.2%,P=0.304)between the groups.cT stage was associated with RFS and OS in multivariate analysis[hazard ratio(HR):2.57,95%confidence interval(CI):1.07–6.16,P=0.04 and HR:2.27,95%CI:1.09–4.74,P=0.03,respectively].Furthermore,ypN stage was associated with RFS and OS(HR:4.74,95%CI:2.39–9.42,P<0.00 and HR:4.33,95%CI:2.20–8.53,P<0.00,respectively),but only in the radical resection group.CONCLUSION Oncological outcomes of patients with ypT0–1 rectal cancer who received ACTx after PCRT showed no improvement,regardless of the radicality of resection.Further trials are needed to evaluate the efficacy of ACTx in these group of patients. 展开更多
关键词 Rectal neoplasm Adjuvant chemotherapy ypt0-1 Radical resection Local excision
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中低位直肠癌新辅助放化疗后ypT_(0)病人的预后分析 被引量:2
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作者 郑阔 金路 +8 位作者 于冠宇 朱晓明 楼征 郝立强 王颢 龚海峰 高显华 白辰光 张卫 《腹部外科》 2023年第2期102-108,138,共8页
目的探讨中低位直肠癌新辅助放化疗(neoadjuvant chemoradiotherapy,nCRT)后达到ypT_(0)病人的临床病理特征和影响预后的因素。方法回顾性分析2011年1月至2021年12月海军军医大学第一附属医院接受长程新辅助治疗、术后病理证实ypT_(0)... 目的探讨中低位直肠癌新辅助放化疗(neoadjuvant chemoradiotherapy,nCRT)后达到ypT_(0)病人的临床病理特征和影响预后的因素。方法回顾性分析2011年1月至2021年12月海军军医大学第一附属医院接受长程新辅助治疗、术后病理证实ypT_(0)的中低位直肠癌病人的临床病理资料,采用Cox比例风险模型检验分析无病生存率(disease-free survival,DFS)和总生存率(overall survival,OS)的影响因素。结果共入组132例病人,接受局部切除术病人26例(19.7%),术后病理提示ypN0和ypN+的病人分别为98例(74.2%)和8例(6.1%),接受辅助治疗的病人79例(59.8%)。中位随访时间为43.5个月,全组5年DFS和OS分别为84.4%和90.4%。多因素Cox回归分析显示,新辅助治疗前癌胚抗原(CEA)水平升高(HR=3.540,P=0.029)和糖类抗原(CA)19-9水平升高(HR=4.982,P=0.020),以及ypN+/ypNx(HR=8.821/7.379,P=0.002/0.008)是DFS的独立危险因素;未发现OS的独立影响因素。结论中低位直肠癌nCRT后达到ypT_(0)的病人肿瘤学结局良好,nCRT前CEA、CA19-9水平升高及术后病理淋巴结状态为ypN+/ypN_(x)的病人应加强术后治疗和随访。 展开更多
关键词 中低位直肠癌 新辅助放化疗 ypt0 局部切除术 辅助化疗
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谈“YPT”理念下的中学物理教育教学活动课程的建设 被引量:2
6
作者 潘志民 《物理教师》 北大核心 2017年第2期31-34,共4页
“YPT”教育理念的核心就是提高青年学生的创新意识、科研素质、综合实践和表达能力以及团队合作精神等方面的综合素质.“YPT”类的活动课程在中学里的推广为这些素质的培养提供了有效的途径,必将有利于我国培养创新型的国际化优秀科技... “YPT”教育理念的核心就是提高青年学生的创新意识、科研素质、综合实践和表达能力以及团队合作精神等方面的综合素质.“YPT”类的活动课程在中学里的推广为这些素质的培养提供了有效的途径,必将有利于我国培养创新型的国际化优秀科技人才.本文就“YPT”理念下中学物理教育教学的实践活动做了梳理与总结思考. 展开更多
关键词 ypt”理念 创新精神 科学素养 综合素质 ypt”活动课程
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依托“YPT实验”提高学生探究能力的实践探索 被引量:6
7
作者 张一驰 陈晨 陆建隆 《物理教师》 北大核心 2016年第10期27-31,共5页
YPT实验是基于IYPT(国际青年物理学家锦标赛)赛题,让学生自主探究的一类物理实验,其最大的特点在于探究性强、开放程度高、更具真实性.YPT实验对学生科学探究能力的培养有着重要的教育价值,特别是在猜想假设和实验设计环节,对培养学... YPT实验是基于IYPT(国际青年物理学家锦标赛)赛题,让学生自主探究的一类物理实验,其最大的特点在于探究性强、开放程度高、更具真实性.YPT实验对学生科学探究能力的培养有着重要的教育价值,特别是在猜想假设和实验设计环节,对培养学生多因素分析和多样化实验方案设计的能力具有重要的促进作用.本文根据笔者参加和指导CUPT(中国大学生物理学术竞赛)的比赛经历,在科学探究的视角下对YPT实验的探究过程进行分析,重点探讨猜想假设和实验设计环节,提出了4点提高学生科学探究能力的建议:(1)重视实验的开放性,培养学生对实验探究多因素分析的能力;(2)重视实验方案设计多样化,提高学生实验设计能力;(3)重视实验基本技能(操作、实验结果记录、实验数据分析),提高学生动手操作能力;(4)重视学生针对实验结果,应用所学知识合理解释实验结果的方法与能力. 展开更多
关键词 ypt实验 多因素分析 实验设计 科学探究能力
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基于Ypt1靶标的大豆疫霉环介导等温扩增技术的研究 被引量:1
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作者 戴婷婷 郑小波 吴小芹 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期576-584,共9页
大豆疫霉侵染大豆引起的根腐病是大豆生产上的毁灭性病害之一。本研究以Ypt1基因作为靶标,利用环介导等温扩增(LAMP)技术,设计了特异性检测体系,整个过程仅需60 min,即可通过肉眼直接目测检测结果。反应后经浊度仪验证浊度变化、琼脂糖... 大豆疫霉侵染大豆引起的根腐病是大豆生产上的毁灭性病害之一。本研究以Ypt1基因作为靶标,利用环介导等温扩增(LAMP)技术,设计了特异性检测体系,整个过程仅需60 min,即可通过肉眼直接目测检测结果。反应后经浊度仪验证浊度变化、琼脂糖凝胶进行电泳验证和在扩增前加入染料HNB(羟基蔡酚蓝)作为反应指示剂验证扩增结果。特异性检测中,111个大豆疫霉菌株均能产生浊度曲线和扩增到梯形状的条带,同时HNB显色观察到天蓝色的阳性反应,而其它疫霉、腐霉和真菌供试菌株中均没有观察到这些现象;在灵敏度检测中,PsYpt1-LAMP技术最低检测限达到100 pg·μL^(-1),比普通PCR技术的最低检测限高出10倍;在田间应用方面,PsYpt1-LAMP检测技术明显提高了检测效率。本研究建立的LAMP检测体系可用于口岸和田间对大豆疫霉的快速检测。 展开更多
关键词 大豆疫霉 环介导等温扩增技术 ypt1基因 羟基萘酚蓝
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“画出来的导线”--IYPT赛题的过程分析及对中学物理实验教学的启示
9
作者 陈纪好 徐晓梅 《中学物理教学参考》 2022年第12期16-19,共4页
针对普通高中物理课程标准提出主动、多样化的实验学习方式的要求及现阶段中学物理实验教学存在的实验方案单一的问题,通过分析IYPT赛题一“画出来的导线”,探讨通过引入IYPT赛题,IYPT比赛模式做辅助教学和弥朴教学的现实意义,探析IYPT... 针对普通高中物理课程标准提出主动、多样化的实验学习方式的要求及现阶段中学物理实验教学存在的实验方案单一的问题,通过分析IYPT赛题一“画出来的导线”,探讨通过引入IYPT赛题,IYPT比赛模式做辅助教学和弥朴教学的现实意义,探析IYPT在实验教学中的应用方式。将IYPT实验融入中学物理实验教学,能很好地满足断课标的要求,并为中学物理实验教学的改革深化提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 1ypt赛题 中学物理实验教学 Iypt实验
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TRAPP复合物与自噬关系的研究进展
10
作者 田超 张文婷 +3 位作者 宋嘉宁 姬翠翠 MUHAMMAD Tahir 王娟 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第1期84-91,共8页
转运蛋白颗粒(TRAPP)是一种高度保守的多亚基蛋白复合物,参与囊泡运输、细胞自噬等过程.细胞自噬是真核生物中高度保守的降解和循环通路,在维持细胞稳态和应对环境压力中起着重要作用.近年来,TRAPP复合物与自噬关系的研究较为广泛,研究... 转运蛋白颗粒(TRAPP)是一种高度保守的多亚基蛋白复合物,参与囊泡运输、细胞自噬等过程.细胞自噬是真核生物中高度保守的降解和循环通路,在维持细胞稳态和应对环境压力中起着重要作用.近年来,TRAPP复合物与自噬关系的研究较为广泛,研究表明多个TRAPP复合物亚基参与自噬过程,且TRAPP复合物不同亚基的突变或缺失也与多种人类疾病有关.对TRAPP复合物参与调控细胞自噬机制的深入研究有助于了解一些人类疾病的发生和发展. 展开更多
关键词 TRAPP复合物亚基 细胞自噬 ypt1 疾病
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应用探针式电容传感器检测发动机润滑油品质的研究 被引量:4
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作者 于战果 王宝光 +1 位作者 王海山 郑义忠 《润滑与密封》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期171-173,共3页
应用探针式电容传感器测量润滑油中固体颗粒含量的原理,是根据固、液体混合物在电容器两极板之间介质的介电常数变化而使电容发生变化。应用该原理设计出了一套润滑油油品监测系统,简称为YPT系统。应用该系统,对发动机润滑油中的铁、硅... 应用探针式电容传感器测量润滑油中固体颗粒含量的原理,是根据固、液体混合物在电容器两极板之间介质的介电常数变化而使电容发生变化。应用该原理设计出了一套润滑油油品监测系统,简称为YPT系统。应用该系统,对发动机润滑油中的铁、硅固体微粒含量变化与电容变化的相互关系进行了初步探讨,并建立起来了一种新的润滑油品质YPT评价标准。这个新的评定标准,为确定发动机润滑油的更换周期及预测发动机的使用寿命等方面的研究,提供了一种比较简便实用的科学依据。 展开更多
关键词 探针式电容传感器 发动机润滑油 固体含量 ypt评价值
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玉米Rab1B基因功能的初步研究 被引量:2
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作者 李定琴 汪萌 张家明 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第4期304-308,共5页
在酿酒酵母中,GTP结合蛋白YPTl调节蛋白质从内质网到高尔基体的运输.YPT1温敏突变株ASY01等在26℃能正常生长,但在高温(37℃)条件下,细胞死亡.经鉴定,YPT1温敏突变是由于第136位的丙氨酸突变为天冬氨酸.克隆一个玉米Rab基因,分子进化研... 在酿酒酵母中,GTP结合蛋白YPTl调节蛋白质从内质网到高尔基体的运输.YPT1温敏突变株ASY01等在26℃能正常生长,但在高温(37℃)条件下,细胞死亡.经鉴定,YPT1温敏突变是由于第136位的丙氨酸突变为天冬氨酸.克隆一个玉米Rab基因,分子进化研究表明它是一个Rab1基因,命名为ZmRab1B.与酵母YPT1温敏突变体的功能互补实验结果表明,ZmRab1B基因能恢复酵母YPT1温敏突变株的正常生长,说明ZmRab1B基因的功能是调节蛋白质从内质网到高尔基体的运输. 展开更多
关键词 GTPASES ZmRab1B ypt1 功能互补
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基于Ypt1靶标的非洲菊隐地疫霉TaqMan探针实时荧光定量PCR检测
13
作者 王丽花 孙爱青 +2 位作者 张艺萍 许凤 杨秀梅 《微生物学通报》 CAS 2024年第9期3658-3672,共15页
【背景】隐地疫霉(Phytophthora cryptogea P.)是一种可危害多种植物且危害症状较为严重的检疫性病原卵菌,在世界范围内危害严重。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高且能定量分析P.cryptogea携带情况的高效检测方法。【方法】根据隐... 【背景】隐地疫霉(Phytophthora cryptogea P.)是一种可危害多种植物且危害症状较为严重的检疫性病原卵菌,在世界范围内危害严重。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高且能定量分析P.cryptogea携带情况的高效检测方法。【方法】根据隐地疫霉Ypt1基因的保守序列设计并筛选实时荧光定量PCR的特异性引物和探针,在优化引物浓度、探针浓度和退火温度的基础上获得最优反应体系和条件,利用最优反应条件构建标准曲线及检测体系,并验证检测体系的特异性、灵敏性和重复性。【结果】综合考虑Cq值、最终荧光信号值(relative fluorescence units,RFU)和经济角度,优化后的隐地疫霉荧光定量PCR最佳退火温度为60℃,上、下游引物浓度均为20μmol/L,探针浓度为10μmol/L;所建立的标准曲线为y=−3.323x+40.767,相关系数(R^(2))为0.998,扩增效率(E)为99.9%,相关性好、扩增效率高;对其他8种常见卵菌及真菌均无扩增曲线,表明所设计的引物探针组合特异性强;灵敏度检测结果显示最低检出限为1 copy,最低稳定检出限为10 copies,较常规PCR技术的灵敏度提高了10−100倍;同浓度批组内和批组间重复性试验Cq值标准差为0.04−0.13,变异系数(coefficient of variation,CV)为0.20%−0.58%,重复性及稳定性好、可靠性高。【结论】基于Ypt1靶标建立了非洲菊隐地疫霉TaqMan实时荧光定量PCR检测技术体系,可高效特异地鉴别出疫霉属中广泛侵染非洲菊的隐地疫霉病菌,对于口岸通关和田间隐地疫霉的快速高效检测,尤其是原原种、原种等核心材料的痕量病原菌的检测鉴定和病害早期精准诊断,以及有效防控意义重大,应用前景广阔。 展开更多
关键词 非洲菊 隐地疫霉 ypt1基因 实时荧光定量PCR TaqMan探针
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拟南芥Rab1家族基因的克隆和功能研究
14
作者 伍祚斌 孙雪飘 张家明 《生命科学研究》 CAS CSCD 2008年第1期35-39,共5页
Ypt1蛋白是酵母唯一的Rab1 GTP酶,调控囊泡从内质网到高尔基体的运输.酵母温敏突变株ASY01是一个Ypt1基因功能部分缺失菌株,在26℃可以正常生长,但在37℃不能生长.拟南芥有4个Rab1基因,分别是AtRab1A1、AtRab1B1、AtRab1B2、AtRab1C1.... Ypt1蛋白是酵母唯一的Rab1 GTP酶,调控囊泡从内质网到高尔基体的运输.酵母温敏突变株ASY01是一个Ypt1基因功能部分缺失菌株,在26℃可以正常生长,但在37℃不能生长.拟南芥有4个Rab1基因,分别是AtRab1A1、AtRab1B1、AtRab1B2、AtRab1C1.克隆了所有4个AtRab1基因,构建酵母表达载体,转化温敏突变型酵母ASY01.温度敏感性实验结果表明,所有转基因菌株在37℃都恢复正常生长.说明拟南芥4个Rab1基因都与酵母Ypt1基因功能互补,都具有调节囊泡从内质网到高尔基体运输的功能. 展开更多
关键词 小G蛋白 GTP酶 Rab1 ypt1 功能互补
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Phosphatidylinositol 3-kinase CB association with preoperative radiotherapy response in rectal adenocarcinoma 被引量:5
15
作者 Wei-Dong Yu Yi-Fan Peng +3 位作者 Hong-Da Pan Lin Wang Kun Li Jin Gu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第43期16258-16267,共10页
AIM: To examine the correlation of phosphatidylinositol 3-kinase (PIK3) CB expression with preoperative radiotherapy response in patients with stage II/III rectal adenocarcinoma.
关键词 Phosphatidylinositol 3-kinase CB Tumor regression grade ypt stage Disease-free survival Therapeutic target Rectal cancer Preoperative radiotherapy
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源于学术研究论文的中学生物理学术竞赛题的命制探索 被引量:1
16
作者 苏俊 王维国 +1 位作者 陈晨 陆建隆 《物理教师》 北大核心 2018年第9期95-96,F0003,共3页
本文分析了IYPT赛题的来源及特点,提出从物理学术论文中命制新YPT赛题的思路和方法,并列举了赛题命制的3个案例以供参考.相关主办单位可以针对不同层次的参赛对象命制合适的YPT赛题,在增加活动趣味性的同时,彰显YPT竞赛的本土化特色.
关键词 Iypt竞赛 ypt赛题命制 物理学术竞赛 物理课题研究
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基于环介导等温扩增技术检测雪松疫霉根腐病菌 被引量:5
17
作者 纪睿 曾丹丹 +3 位作者 廖太林 郑小波 张正光 周锐 《植物检疫》 北大核心 2017年第1期42-47,共6页
雪松疫霉根腐病菌(Phytophthora lateralis Tucker et Milbrath)是一种重要的毁灭性植物病原菌,也是我国进境植物检疫性有害生物。目前,我国未有该病害发生的报道,为了防止P.lateralis的传入和扩散,需对其进行快速、准确的检测。本文利... 雪松疫霉根腐病菌(Phytophthora lateralis Tucker et Milbrath)是一种重要的毁灭性植物病原菌,也是我国进境植物检疫性有害生物。目前,我国未有该病害发生的报道,为了防止P.lateralis的传入和扩散,需对其进行快速、准确的检测。本文利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),以Ypt1基因为靶标序列,设计LAMP特异性引物,建立LAMP反应体系,并对灵敏度和特异性进行检测。结果表明:整个检测过程仅需80 min,即可通过肉眼观察直接判定检测结果。在特异性检测中,P.lateralis菌株都能观察到天蓝色的阳性反应,而其他疫霉菌和真菌供试菌株均呈阴性反应。在灵敏度检测中,最低检测限为100 pg/μL。该方法的建立为P.lateralis的检疫鉴定及其所致病害的快速诊断提供了新技术。 展开更多
关键词 雪松疫霉根腐病菌 ypt1 环介导等温扩增 羟基萘酚蓝 检测
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芋疫霉重组聚合酶扩增结合侧流层析试纸条快速检测方法的建立及应用 被引量:1
18
作者 王荣波 陈姝樽 +3 位作者 赵玉梅 李本金 刘裴清 陈庆河 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1654-1662,共9页
为建立芋疫霉Phytophthora colocasiae快速准确的分子检测方法,基于Ypt1基因特异序列,设计芋疫霉的特异性引物与探针,建立一种快速、准确、可视化的芋疫霉重组聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification-later... 为建立芋疫霉Phytophthora colocasiae快速准确的分子检测方法,基于Ypt1基因特异序列,设计芋疫霉的特异性引物与探针,建立一种快速、准确、可视化的芋疫霉重组聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification-lateral flow dipstick,LFD-RPA)检测方法,对该检测方法进行优化,评估其特异性与灵敏度,并对田间疑似样品进行检测。结果表明,优化后的芋疫霉LFD-RPA检测方法最适反应条件为39℃恒温反应30 min。LFD-RPA检测方法能够特异性地检测出芋疫霉,而对其他卵菌近缘种和常见植物病原真菌均未检出,且该检测方法对芋疫霉DNA的检测灵敏度达到1 pg/μL。对田间带病组织检测发现,LFD-RPA检测方法能够快速准确地从田间自然发病植株中检测出芋疫霉。表明本研究所建立的芋疫霉LFD-RPA快速可视化检测方法特异性好、灵敏度高、简单快捷,可用于芋疫病的田间快速诊断。 展开更多
关键词 芋疫霉 重组聚合酶扩增结合侧流层析试纸条 ypt1基因 快速检测
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三种猕猴桃根腐病致病菌多重实时定量PCR检测技术的建立及应用 被引量:6
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作者 毕晓琼 高菡 +2 位作者 郭倩 崔浪军 李明珠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期311-321,共11页
[背景]近年来,随着猕猴桃种植面积的不断扩大,病害的频繁发生已逐渐影响猕猴桃的产量和品质。恶疫霉(Phytophthora cactorum)、樟疫霉(P.cinnamomi)和雪松疫霉(P.lateralis)是一类可以引起猕猴桃根腐病的致病疫霉菌。[目的]建立并优化... [背景]近年来,随着猕猴桃种植面积的不断扩大,病害的频繁发生已逐渐影响猕猴桃的产量和品质。恶疫霉(Phytophthora cactorum)、樟疫霉(P.cinnamomi)和雪松疫霉(P.lateralis)是一类可以引起猕猴桃根腐病的致病疫霉菌。[目的]建立并优化可以同时检测3种致病疫霉的多重实时定量检测技术,并调查猕猴桃主要产区的致病菌分布情况。[方法]基于Ypt1 (ras-related protein gene)基因设计恶疫霉、樟疫霉和雪松疫霉的特异性TaqMan探针和引物,建立并优化多重实时荧光定量PCR检测体系。利用近缘种检验检测体系特异性并进行灵敏度测试,应用该检测体系分析猕猴桃主要产区根际土壤中3种致病疫霉的Yt1基因含量。[结果]供测试的11个恶疫霉近缘种、11个樟疫霉近缘种、13个雪松疫霉近缘种及非目标菌种DNA样品中均无荧光信号,反应结果为阴性,而在恶疫霉、樟疫霉和雪松疫霉DNA样品中分别检测出HEX、FAM和ROX荧光信号,反应结果为阳性。三种疫霉的检测灵敏度均达到100fg。此外,通过对猕猴桃主产区陕西省周至县和眉县果园共166份土壤样品的检测发现,恶疫霉的分布最广泛且Ypt1基因含量最高,樟疫霉和雪松疫霉则相对较少。[结论]建立的猕猴桃根腐病致病疫霉多重实时定量检测体系特异性强、灵敏度高,适合于恶疫霉、樟疫霉和雪松疫霉的检测及定量分析。该技术可为猕猴桃疫霉病害的早期诊断、监测及预防提供指导。 展开更多
关键词 猕猴桃 恶疫霉 樟疫霉 雪松疫霉 ypt1基因 多重实时定量PCR
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