共存于载脂蛋白C-Ⅰ基因和伪基因之多态性Ile-11Met

目的：探讨可能存在于载脂蛋白 ＣⅠ（ａｐｏ ＣⅠ） 的基因突变或多态性及其频率和表型。方法：通过基因特异性引物和致突变分离聚合酶链反应（ Ｍ Ｓ Ｐ Ｃ Ｒ） 技术分离和扩增ａｐｏ ＣⅠ基因和伪基因片段，采用固相荧光直读法分别对其进行 Ｄ Ｎ Ａ 序列分析；对来自德国、意大利和日本人群的 Ｄ Ｎ Ａ 库样品进行基因型和表型及其相互关系的对比研究。结果：在受检者中首次发现ａｐｏ ＣⅠ基因一多态性位点，即其编码信号肽第１１ 位密码子的第３ 个核苷酸胞嘧啶突变为鸟嘌啶（ Ｃ→ Ｇ） ，从而导致该位置野生型的异亮氨酸突变为蛋氨酸（ Ｉｌｅ１１ Ｍｅｔ） 。该ａｐｏ ＣⅠ基因多态性的等位基因频率在德国和意大利人群中显著不同（１ ．６５ ％ ｖｓ ２ ．２８ ％ ， Ｐ＜ ０ ．０１） ，但在日本人 Ｄ Ｎ Ａ 库中未检出。该多态性还以高频率出现在ａｐｏ ＣⅠ伪基因中，但无论是存在于ａｐｏ ＣⅠ基因或伪基因之多态性 Ｉｌｅ１１ Ｍｅｔ，其杂合子或纯合子携带者的血脂参数与野生型比较均无明显改变。结论 揭示共存于ａｐｏ ＣⅠ基因和伪基因的多态性 Ｉｌｅ１１ Ｍｅｔ 在不同人群中的等位基因频率差异显著，但对血脂代谢无明显影响。

普安银鲫早期发育中载脂蛋白B、总胆固醇和甘油三酯的含量及葡萄糖和维生素C对其影响

为探究普安银鲫早期发育中载脂蛋白B、甘油三酯和总胆固醇的含量变化及葡萄糖溶液和维生素C溶液分别浸泡对它们的影响,采用生化方法测定分析了普安银鲫早期发育中载脂蛋白B、总胆固醇和甘油三酯的含量变化特点。结果显示:载脂蛋白B、总胆固醇和甘油三酯的含量在整个早期发育中均呈"下降-上升"趋势。从受精卵到外源营养期,葡萄糖组载脂蛋白B、总胆固醇和甘油三酯含量呈"上升-下降-上升"趋势,且从原肠中期到内源营养期,葡萄糖组载脂蛋白B和甘油三酯含量显著高于对照组,而总胆固醇含量从原肠中期到混合营养期显著高于对照组(P<0.05)。维生素C组载脂蛋白B和总胆固醇含量呈"下降-上升"趋势,甘油三酯含量均呈"上升-下降-上升"趋势,且载脂蛋白B含量从原肠中期到内源营养期显著高于对照组,同时在外源营养期也显著高于对照组,甘油三酯含量从原肠中期至外源营养期显著高于对照组(P<0.05),而总胆固醇含量在整个发育中仅稍高于对照组。研究表明,载脂蛋白B、总胆固醇和甘油三酯参与普安银鲫早期发育中能量代谢和各器官、组织膜物质的构建,同时适宜水平的葡萄糖溶液、维生素C溶液均能促进普安银鲫早期发育中载脂蛋白B、总胆固醇和甘油三酯的合成。

直接测定HDL—C的方法学评价

作者通过一系列实验,从稳定性,特异性,线性和回归分析,干扰物分析及方法比较等方面对HDL-C的无标本预处理的直接测定法进行了讨论。HDL-C重复测定的最大CV为5.7％,直接法与磷钨酸镁沉淀法有很好的相关性,Y=0.00256X+0.045mmol/L,r=0.970。当TG=2.2时,HDL-C的浓度仅增加2％,Hb对结果有明显的干扰作用,而胆红素却使HDL-C的结果偏低。实验表明,HDL-C的直接测定法具有操作简单,一定条件下结果稳定,准确,能够应用于全自动分析的特点,该方法对于人群血脂代谢的筛查工作,及时发现和预防心血管疾患的危险致病因素提供了相当便利的条件。

血管紧张素Ⅱ对培养乳鼠心肌细胞 Bcl-2和c-myc基因转录的调控作用

目的：研究血管紧张素对心肌细胞 Ｂｃｌ┐２ 和 ｃ┐ｍｙｃ 基因转录的调控作用及其受体机制。 方法：分离纯化培养的乳鼠心肌细胞，分别加入血管紧张素或／和氯沙坦（血管紧张素的 Ｉ型受体特异性拮抗剂）处理，然后提取总 Ｒ Ｎ Ａ，用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交检测 Ｂｃｌ┐２ 和 ｃ┐ｍｙｃ 基因的转录水平。结果分析时，以正常乳鼠心肌细胞中 Ｂｃｌ┐２ ｍ Ｒ Ｎ Ａ ／ １８ Ｓ或 ｃ┐ｍｙｃｍ Ｒ Ｎ Ａ ／ １８ Ｓ的比值定为 １００ ％ 。结果：血管紧张素 １０－ ５ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １ 处理 ２４ 小时使 Ｂｃｌ┐２ 基因转录水平下调至正常的２６ ％ （ Ｐ＜ ０．０１， ｎ＝ ３ ）。血管紧张素的处理时间短至 １２ 小时或血管紧张素浓度为 １０－ ７ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １ 或 １０－ ６ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １ 时均无此作用，表明血管紧张素使心肌细胞 Ｂｃｌ┐２ 基因转录下调具有时间和剂量依赖性。氯沙坦 １０－ ５ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １能完全取消 １０－ ５ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １ 血管紧张素对心肌细胞 Ｂｃｌ┐２ 基因转录下调的作用（１０３±４ ％ ， Ｐ＜ ０．０１， ｎ＝ ３ ），单独用 １０－ ６ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １ 或 １０－ ５ ｍ ｏｌ· Ｌ－ １

反义寡核苷酸对丙型肝炎病毒调控基因表达的体外抑制活性研究

为探讨反义寡核苷酸（ Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎｓ） 对丙型肝炎病毒（ Ｈ Ｃ Ｖ） 的抑制活性，研究和开发新型抗 Ｈ Ｃ Ｖ 药物。采用 Ｈ Ｃ Ｖ ５′ Ｎ Ｃ Ｒ 调控荧光素酶基因的稳定表达细胞株 Ｈｅｐ Ｇ２９７０６ ，评价了３ 条针对 Ｈ Ｃ Ｖ 调控基因的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ，即 Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 、 Ｈ Ｃ Ｖ３４９ 及 Ｈ Ｃ Ｖ２７９ 。将 Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ 包封的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 与 Ｈｅｐ Ｇ２９７０６ 细胞株每天作用５ 小时，连续３ 天后检测荧光素酶活性。结果提示，在 Ｈｅｐ Ｇ２９７０６细胞中，三种 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎｓ 均具有特异性的剂量依赖性抑制活性。浓度在０５μｍｏｌ／ Ｌ 时， Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 、 Ｈ Ｃ Ｖ３４９ 及 Ｈ Ｃ Ｖ２７９ 对 Ｈ Ｃ Ｖ５′ Ｎ Ｃ Ｒ 调控荧光素酶表达抑制率分别为６１ ％ 、５５ ％ 及４８ ％ 。 Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 连续作用８ 天，其抑制率可达８１ ％ 。上述资料论证了 Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 、 Ｈ Ｃ Ｖ３４９ 及 Ｈ Ｃ Ｖ２７９ 在 Ｈ Ｃ Ｖ５′ Ｎ Ｃ Ｒ 调控荧光素酶基因的稳定表达细胞中对 Ｈ Ｃ Ｖ 调控基因具有明显的抑制活性。

股骨头缺血性坏死100例患者的血脂观察与探讨

目的:进一步探讨股骨头缺血性坏死的致病因素及病理机制。方法:结合临床对100例股骨头缺血性坏死病人进行系列血脂及载脂蛋白化验分析,并与健康对照组对比,进行统计学处理,分析血脂对该病形成的影响。结果:股骨头缺血性坏死病人血脂含量增高,其中甘油三酯(TG)、脂蛋白(a)[Lp(a)]、载脂蛋白B(apoB)明显增高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显减低(P<0.01)。应用激素组TG显著高于非激素组(P>0.01),Lp(a)、apoB、HDL-TC两组无显著性差异(P>0.01)。结论:股骨头缺血性坏死与脂类代谢密切相关,并与遗传因素有关,Lp(a)血浆浓度的增高是股骨头缺血性坏死的危险因素,可导致终末小动脉的动脉粥样硬化及血栓形成。为及早发现或判断该病的发生趋势,达到有效防治目的,Lp(a)水平的检测具有重要临床意义。