莪术油化学成分、抗肿瘤作用及制剂研究进展

莪术油是从莪术中提取的挥发油,化学成分主要以单萜(包括α-蒎烯、β-蒎烯等)、倍半萜(包括β-榄香烯、莪术醇、莪术二酮等)为主,对卵巢癌、宫颈癌、结直肠癌、肺癌、肝癌等多种恶性肿瘤具有较好的治疗作用。莪术油主要通过调控血管内皮生长因子、核因子κB、信号转导及转录激活因子3等信号通路,发挥抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、阻滞细胞周期等作用。目前,莪术油因难溶于水、稳定性差等缺点限制了其在临床上的应用,现代制剂研究则采用新技术将其制备成脂质体、微球、微乳/纳米乳等,从而改善了莪术油的溶解性和稳定性。本文归纳总结了国内外近年来莪术油化学成分、抗肿瘤作用及制剂研究进展,可为莪术油在抗肿瘤方面的应用及制剂研发提供理论依据。

莪术挥发油的提取、成分分析及抗植物病原真菌活性研究

通过水蒸气蒸馏法从莪术叶中提取莪术挥发油(ZTO),利用GC-MS仪对其化学成分进行分析,并采用菌丝生长速率法测试了ZTO对水稻纹枯病菌、黄瓜炭疽病菌、玉米弯孢菌、小麦赤霉病菌、苹果腐烂病菌和辣椒疫霉6种植物病原菌的抑制活性;通过透射电镜和激光共聚焦显微镜观察了ZTO对水稻纹枯病菌菌丝超微结构的影响,并分析了ZTO对水稻纹枯病菌生理学和防御酶活性的影响。结果表明:ZTO中含有28种有效成分,其中石竹素3.27%、莪术烯5.69%、桉叶油醇5.73%、蓝桉醇6.27%、莪术酮高达38.16%,其余均低于3%;ZTO对水稻纹枯病菌具有较好的抑制效果,其半数致死浓度(EC50)为14.784 mg/L,略低于阳性对照丙环唑(EC50值为10.521 mg/L);相比空白组,ZTO处理后水稻纹枯病菌菌丝的鲜质量和干质量分别降低了48.47%和62.86%,菌丝的可溶性蛋白质量分数降低了26.32%,180 min时相对电导率值上升了16.68%,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)酶活均有一定程度的下降,其中SOD和CAT的酶活分别降低37.82%和54.02%。分析表明:ZTO对菌丝细胞膜和细胞壁具有一定的破坏作用,导致菌丝体内电解质大量外泄,ZTO进入菌丝体后对SOD和CAT产生一定的抑制作用,致使菌丝体内的活性氧(ROS)不能得到有效的清除,ROS大量累积,进而造成菌丝体的生理生化功能紊乱,并最终阻碍了菌丝的生长。

Study on Treatment of Primary Hepatic Carcinoma by Arterial Perfusion Embolization with Zedoary Turmeric Oil

To evaluate the effect, side-effect and prospect of hepatic arterial perfusion embolization (HAPE) with Zedoary turmeric oil (ZTO) in treating primary hepatic carcinoma (PHC).Methods: Clinical study was carried out by administration of 1-3 ml ZTO through arterial catheter to induce embolism in 32 patients of PHC, and compared with 32 patients treated by hepatic arterial perfusion embolization with chemical agents (HAPE-C) in the control group. The Chinese herbal medicine was given orally to both groups according to Syndrome Differentiation of TCM. In the experimental study, transplantation hepatic carcinoma model was established in 40 rats. They were randomly divided into the treated group and the control group, 20 in each group, and were perfused with 10 mg/kg ZTO and 0.2-0.3 ml normal saline respectively to observe the effect of treatment.Results: The effect of treatment in the ZTO group was CR in 1 case and PR in 13 cases, the total effective rate being 43.75%, with AFP negative reversed in 7 cases, titer decreased in 7; while in the control group it was PR in 10 cases, the total effective rate being 31.25%, AFP negative reversed in 5, titer decreased in 2, and the difference of therapeutic effect between the two groups was insignificant (P>0.05). The post-perfusion thrombotic syndrome occurrence, with the symptoms of fever, abdominal pain, vomiting, etc. in the two groups was similar, but no bone marrow inhibition occurred in the ZTO group, which was different from the control group (P<0.01, P<0.05). The mean survival time, median survival time, 1-, 2-, 3- and 4-year survival rate in the ZTO group was 13.84 months, 10 months, 37.5%, 18.87%, 9.70% and 6.4% respectively, and in the control group, 8.03 months, 6 months, 15.6%, 6.27%, 0% and 0% respectively, the mean survival time, median survival time and 1-year survival rate in the ZTO group were significantly superior to those in the control group (P<0.05). Experimental study showed that the effect in the treated group was better than that in the control group in tumor growth inhibition with the tumor growth rate as 10.8±4.5%% vs 20.6±12.7%, P<0.05, tumor necrosis degree (P<0.01) and survival time prolonged (14.8±3.4 days vs 11.7±1.9 days, P<0.05).Conclusion: HAPE-ZTO in treating PHC showed the therapeutic effect similar to that of HAPE-C, but superior to the latter in survival time prolongation and bone marrow inhibition.

保妇康栓致异常子宫出血1例分析

目的通过对病例追踪观察和文献分析,提出保妇康栓临床使用药学建议。方法追踪1例慢性宫颈炎患者的治疗经过,对其用药后出现异常子宫出血分析发生原因,并检索相关文献进行分析。结果患者因慢性宫颈炎、阴道炎使用保妇康栓后突然出现异常子宫出血,停用保妇康栓并口服氨甲环酸片后阴道出血干净,再次使用保妇康栓后又出现大量阴道出血并伴有子宫内膜样物质,月经周期异常,停用保妇康栓后,连续观察半年,未再次出现异常子宫出血,月经周期及月经量均恢复至用保妇康栓之前的状态。结论建议临床应辨证与辨病相结合,对于没有严重瘀血凝滞,又素体脾胃虚弱、气血两虚的患者应慎用保妇康栓,以免造成崩漏及月经紊乱,对于有明显气滞血瘀且正气足脾胃健的患者可以选用,但不宜长期使用,以免损伤正气。

莪术油联合顺铂与多西他赛治疗晚期非小细胞肺癌的效果分析

目的:探讨莪术油联合顺铂与多西他赛治疗晚期非小细胞肺癌的效果。方法:选取2018年1月—2020年12月阳新县中医医院肿瘤内科收治的160例晚期非小细胞肺癌患者作为研究对象,根据随机数字表法分为治疗组与对照组,各80例。对照组给予顺铂与多西他赛化疗,治疗组在对照组基础上联合莪术油注射液辅助治疗。比较两组血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平、治疗效果、不良反应发生情况、中位生存期。结果:治疗前,两组VEGF水平比较,差异无统计学意义(P=0.25);治疗7、14、30、60 d后,治疗组VEGF水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组bFGF水平比较,差异无统计学意义(P=0.45);治疗7、14、30、60 d后,治疗组bFGF水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P=0.02)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P=0.47)。治疗组中位生存期高于对照组,差异有统计学意义(P=0.03)。结论:莪术油联合顺铂与多西他赛治疗晚期非小细胞肺癌的效果显著,可延长患者生存期,且不会增加不良反应。

复方莪术油乳膏对IMQ诱导小鼠银屑病疗效观察及其对ICAM-1和NO的影响

目的 观察复方莪术油乳膏对咪喹莫特乳膏(IMQ)诱导小鼠银屑病皮损的治疗作用及其对细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和一氧化氮(NO)的影响。方法 将44只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、IMQ模型组、乳膏基质对照组、5%莪术油组和10%莪术油组,除IMQ模型组12只外,其余每组8只。除空白对照组涂抹凡士林外,其他4组连续14 d涂抹62.5 mg 5%IMQ,诱导小鼠银屑病皮损模型,于第7天分别给予凡士林、乳膏基质、5%和10%莪术油乳膏治疗。根据银屑病面积、严重程度指数评分和皮肤厚度评估皮损炎症严重程度,通过苏木精-伊红染色分析银屑病小鼠皮损组织学变化,观察脾脏形态并计算脾指数。通过酶联免疫吸附试验测定第8、11天IMQ模型组小鼠,以及第15天各组小鼠血清ICAM-1、NO水平。结果 复方莪术油乳膏明显降低IMQ诱导的银屑病样小鼠表皮增厚、炎性细胞浸润,并减轻IMQ诱导的小鼠脾脏肿大,明显抑制血清ICAM-1水平,诱导NO释放,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 复方莪术油乳膏可能通过抑制ICAM-1介导的炎性细胞黏附,同时,上调NO水平促进表皮屏障修复,改善IMQ诱导的小鼠银屑病皮损。

莪术油-β-环糊精包合物的制备工艺及稳定性的考察

目的 考察莪术油 - β-环糊精包合物的制备工艺及稳定性。方法 制备工艺采用饱和水溶液法 ,稳定性实验采用光照、加温加速实验法。结果 搅拌时间增加可提高莪术油 - β-环糊精包合物的收率 ;加速实验结果表明 ,包合物胶囊在 40℃、相对湿度 75 %条件下存放 3个月 ,其相对含量仍在 90 %以上。结论 莪术油

莪术油明胶微球用于肝动脉栓塞

目的 制备符合肝动脉栓塞要求的莪术油明胶微球 (ZT GMS)。方法 用正交设计优化了微球的制备工艺 ,对微球的制备工艺、粉体学性质、体外释药、初步稳定性和初步药效进行了研究。结果 球径在 40～ 16 0 μm的微球占 97 16 % ,平均产率为 89 73 % ,平均含药量为 2 13 % ,平均包封率为 19 36 % (均以莪术醇计 )。体外释药 12h达 80 % ,符合一级动力学模型 ,释药机理为溶蚀加扩散。稳定性考察实验结果表明其稳定性较好。肝动脉栓塞荷瘤大鼠实验结果表明大鼠平均生存率显著延长 (P <0 0 1) ,肿瘤体积显著减小 (P <0 0 1)。结论 微球的制备工艺及粒径分布较好 ,体外释药有明显的缓释作用 。

莪术油喷雾剂的研制及抗病毒作用的实验研究

目的:研制莪术油喷雾剂,并对其抗病毒作用进行实验研究。方法:对莪术油葡萄糖注射液进行剂型改革,确定莪术油喷雾剂的处方和制备工艺,用HPLC法测定莪术醇和=牛儿酮的含量,同时进行了莪术油喷雾剂体内外抗病毒实验。结果:制备的莪术油喷雾剂质量可控,对流感病毒,副流感病毒Ⅰ、Ⅲ,呼吸道合胞病毒,3、7型腺病毒有轻微抑抑制作用,对副流感Ⅱ型病毒有较强的抑制作用。结论:本莪术油喷雾剂制备简单易行,给药方便,具有一定的抗病毒作用。

莪术挥发油中莪术二酮、吉马酮在大鼠体内的药动学研究

目的研究莪术挥发油中莪术二酮、吉马酮在大鼠体内的药动学特征。方法采用水蒸汽蒸馏法提取莪术中挥发油灌胃大鼠并采集血样。选用EliteHypersilODS2色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），乙腈一水为流动相进行梯度洗脱，体积流量1．0mL／min，检测波长214nm。结果血浆样品中莪术二酮、吉马酮无干扰，分别在1．073—68．64μg／mL、0．1972—12．62μg／mL范围内呈现良好的线性关系，精密度、稳定性、回收率均符合生物样品测定要求。结论所建测定方法操作，适用于莪术二酮、吉马酮在大鼠体内血药浓度的测定及药动学两者均符合二室模型。

反相HPLC法测定莪术油葡萄糖注射液中莪术醇和吉马酮的含量

目的:建立莪术油葡萄糖注射液中莪术醇和吉马酮的含量测定方法。方法:高效液相色谱法。大连依利特HypersilODS2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈水梯度洗脱:乙腈:0～3min,45;3～30min,45→65;30～38min,65;38～45min,65→90;45～55min,90→100;55～65min,100。流速:1.0mL·min-1,柱温:25°C,检测波长:214nm。结果:莪术醇在0.26μg～6.5μg范围内线性良好(r=0.9999),吉马酮在0.1125μg～2.8125μg范围内线性良好(r=1.0000),两者的加样回收率分别为102.1、98.8(n=5)。结论:反相HPLC法能同时测定莪术油葡萄糖注射液中莪术醇和吉马酮的含量,方法简便,结果准确,可用于其质量控制。

莪术油药学研究进展

莪术油是一种具有发展前景的抗肿瘤、抗病毒药物.现将莪术油已取得的研究成果进行整理,为莪术油的进一步深入研究和开发提供参考.根据文献报道,主要从莪术油的提取方法、化学成分、质量控制、药理研究等方面对其进行概述.

莪术油微球的含量测定

目的研究建立莪术油固体化微球的含量测定方法。方法将莪术油固体化微球溶剂超声提取,用香草醛浓硫酸液显色后,采用可用可见分光光度法对制剂中莪术油进行含量测定;采用HPLC法运用二极管阵列检测器同时测定提取液莪术油中3种有效成分含量。结果运用可见分光光度法测定5批微球包油率均在60以上;运用HPLC法测定微球中含莪术二酮、莪术醇、吉玛酮平均分别为6.88、0.95、5.0。结论方法学考察可知两种方法准确、可靠;可见分光光度法简便,适用于微球中总油的含量测定,HPLC法则适用于本制剂化学成分的定性定量分析。

莪术油纳米脂质载体给药系统的制备及其评价

目的研制莪术油纳米脂质载体系统。方法采用熔融超声-低温固化法制备莪术油纳米质脂载体系统,考察载药纳米粒的形态、粒径、Zeta电位等理化性质;用HPLC测定药物的包封率及体外释放特性;采用肝内隧道植入法,在小鼠H-22移植瘤模型上观察两种莪术油制剂的体内抑瘤活性。结果制得的纳米粒在透射电镜下均呈圆球形,平均粒径为(82·26±3·63)nm,Zeta电位为-(23·53±1·29)mV,制剂中吉玛酮的质量浓度为(0·972±0·021)g·L-1,包封率为(94·95±1·87)%。结论熔融超声-低温固化法应用于莪术油等挥发油类药物纳米分散给药系统的制备是可行的,对小鼠体内H-22肉瘤株有显著的抑制效果。

莪术油洗脱支架防治犬冠状动脉支架术后再狭窄的实验研究

目的观察莪术油洗脱支架防治犬冠状动脉支架术后再狭窄的安全性及疗效。方法将裸支架、聚甲基丙烯酸丁酯/纳米二氧化硅涂层支架、莪术油洗脱支架(药物含量100μg/支架)随机置入犬冠状动脉回旋支或前降支,术后4周冠脉造影后处死分析支架段血管组织形态学变化。结果光镜下可见裸支架组和单涂层组支架段血管内膜增厚,莪术油组内膜较薄,均未见内膜下出血和中膜、外膜坏死,无附壁血栓和炎性细胞浸润;扫描电镜观察各组内皮完整。组织形态学分析结果显示:与裸支架和涂层支架比较,莪术油洗脱支架显著减少了新生内膜厚度、新生内膜面积、管腔面积狭窄率(P<0·01),增加了管腔面积(P<0·01);裸支架组与单涂层组比较,差异无统计学意义(P>0·05)。结论莪术油洗脱支架安全可行,显著抑制了犬冠状动脉支架术后内膜增生,具有防治再狭窄作用。

莪术醇的分离鉴定及含量测定

目的:研究从莪术油中提取莪术醇的方法,建立莪术醇含量分析的新方法。方法:以莪术油为原料,进行减压蒸馏,收集208～216℃的馏分经重结晶得到产品,将其和对照品作差示量热光谱、红外光谱、核磁共振和质谱对比分析确定莪术醇;用高效液相色谱法测定其含量,色谱柱为ODS柱;以乙腈∶水(15∶85,V∶V)为流动相;流速为1.0mL/min;检测波长为210nm;柱温为25℃;以外标两点法计算含量。结果:经差示扫描量热光谱、红外光谱、核磁共振、质谱分析鉴定提取的产物是莪术醇,高效液相分析其浓度在10～70μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999(n=7);精密度试验RSD为0.92%(n=6);平均回收率为99.86%,RSD=0.76%,含量为98.9%,RSD=0.89%(n=3)。日内日间差异实验RSD均小于0.78%,表明样品稳定性良好。结论:减压蒸馏法提取莪术醇的工艺流程简单,适合大规模生产,而且纯度高;高效液相色谱法测定莪术醇含量的方法简便、准确、快速,可用于莪术醇及其制剂的质量控制。

莪术油注射液致人卵巢癌SKOV_3细胞胀亡形态变化研究

目的研究莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞形态学改变的影响。方法以不同的药物浓度作用人卵巢癌SKOV3细胞株后,采用光学显微镜和透射电镜观察卵巢癌SKOV3细胞形态学变化。结果光镜下可见莪术油低浓度组部分细胞体积开始变大,细胞胞浆空泡化,胞浆内出现致密颗粒,细胞核开始变形。细胞胞浆出现大面积的空泡,细胞核变形明显,细胞质出现颗粒脱落,出现细胞质空泡,核内染色质分散。高浓度组细胞肿胀,胞浆减少,核浆比例增加,细胞质大量颗粒脱落,细胞质空泡明显,有胞膜崩解、细胞核溶解;电镜下可见卵巢癌SKOV3细胞胀亡,且呈浓度依赖性。结论莪术油注射液诱导SKOV3细胞胀亡是其抑制肿瘤细胞生长的机制之一。

莪术油明胶微球剂的含量测定

目的 :研究莪术油明胶微球的含量测定方法。方法 :莪术油明胶微球用胰酶 超声法消解 ,硫酸 香草醛显色后 ,用可见 分光光度法进行测定。结果 :胰酶的用量 ,超声时间 ,消解时间 ,对测定均有影响。结论 :所建立的方法准确 ,可靠 ,适用于莪术油明胶微球剂的含量测定。

莪术油在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的研究莪术油及其部分活性单体在Caco-2体外细胞吸收模型中的吸收机制,并比较各成分以单体形式及以总油形式在细胞模型上透过的异同。方法应用Caco-2体外细胞吸收模型,分别考察莪术油(Zedoary Turmeric oil,ZTO)及其部分单体,包括莪术二酮(curdione)、吉马酮(germacrone)、呋喃二烯(furanodiene)、莪术醇(curcumol)在不同方向,不同浓度下的转运情况,并比较各单体与挥发油中相应成分在同一浓度下的转运情况。采用高效液相色谱法测定药物浓度,计算其表观渗透系数。结果莪术二酮、吉马酮、莪术醇有很高的表观渗透系数,且不随转运方向及给药浓度影响(P>0.05);而呋喃二烯及挥发油中的其他高脂溶性成分[包括呋喃二烯、莪术烯(curzerene)、β-榄香烯(β-elemene)]在Caco-2细胞模型上不透过;挥发油中其他成分不影响莪术二酮、吉马酮在细胞模型上的透过(P>0.05);莪术油及其活性单体透过Caco-2单层细胞膜后并无代谢产物可被检测。结论莪术油及其部分单体在Caco-2细胞模型中的转运机制为被动扩散,莪术油中高脂溶性成分及呋喃二烯由于被单层细胞膜摄取而不透过Caco-2细胞,挥发油中其他成分对单体成分的透过无影响。

莪术油注射液配合常规化疗对早期卵巢癌患者生活质量的影响

目的探讨莪术油注射液配合常规化疗对早期卵巢癌患者生活质量的影响。方法 2010年9月-2012年12月收集早期卵巢癌患者62例,均经病理组织或细胞学确诊,随机分为观察组和对照组各31例。2组患者均采用多烯紫杉醇联合顺铂治疗方案,即在化疗第1天、第8天和第15天静脉滴注多烯紫杉醇75 mg/m^2;第1~3天静脉滴注顺铂30 mg/m^2,21 d为1个周期;观察组在上述治疗的基础上配合应用莪术油注射液400 mg加入500 ml0.9%氯化钠溶液,静脉滴注,每天1次。观察2组患者的食欲、体质量及Karnofsky评分改变,并记录不良反应、结果观察组食欲增加18例(58.1%),体质量增加21例(67.8%),Karnofsky评分升高10分以上者17例(54.8%);对照组食欲增加7例(22.6%),体质量增加7例(22.6%),Karnofsky评分升高10分以上者7例(22.6%),2组比较差异有显著意义(P<0.05)。观察组胃肠道反应、骨髓抑制发生率低于对照组(58.07%vs.67.74%,19.36%vs.29.03%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论莪术油注射液可明显减轻化疗的不良反应,提高卵巢癌患者的生活质量。