大鼠急性心肌缺血zif/268蛋白表达及其意义

目的 探讨急性心肌缺血早期不同时间不同区域心肌细胞内原癌基因蛋白zif/268的表达变化,为心肌早期缺血死后诊断提供新指标。方法 建立心肌早期缺血模型,大鼠分为正常、缺血组。采用免疫组化SABC法研究心肌细胞核蛋白zif/268的累积情况。结果 缺血 60min后,缺血区大鼠心肌细胞有部分心肌细胞核呈弱阳性着色,以后随缺血时间延长核阳性增强。正常和缺血30min组及未缺血区心肌细胞核未见有阳性反应。HE染色无明显病理改变。结论 免疫组化染色法检测心肌细胞核zif/268的表达对急性心肌缺血的死后诊断是一种有价值有意义的手段。

Zif268基因突变体的克隆与真核表达载体的构建

以小鼠转录因子Zif2 68的三锌指DNA结合区为模板 ,利用重叠 (Overlap)PCR技术 ,获得Zif2 68关键氨基酸位点同时突变的三锌指突变体ZF1 2 3、2ZF1 2 3。以ZF1 2 3、2ZF1 2 3为模板 ,PCR扩增获得TAT -ZF1 2 3 ,TAT- 2ZF1 2 3序列。构建表达质粒pET- 2 8-a+ -TAT-ZF1 2 3 ,pET - 2 8-a+ -TAT - 2ZF1 2 3。为利用HIVTAT蛋白的跨膜功能 ,实现ZF1 2 3、2ZF1 2

不同视觉经验中zif268基因的表达模式

ｉｆ２６８基因编码一转录因子ＺＩＦ２６８．在发育的视皮层中，ｚｉｆ２６８基因的表达模式受发育的调节．在具有正常视觉经验的视皮层中，ｚｉｆ２６８基因有较高水平的表达．视觉废置后，视皮层内该基因的表达水平显著降低．通过视觉刺激可显著增强该基因的表达．

大鼠颞叶癫痫点燃后海马zif268mRNA及其蛋白的时空表达变化

目的探讨海马zif268mRNA及其蛋白的时空表达变化与颞叶癫痫脑损伤的关系。方法将雄性Wistar大鼠随机分为3组:其中正常组6只,假手术对照组(Sham组)和海人酸(KA)颞叶癫痫点燃组(TLE组)各36只,后两组按点燃后6h、24h、3d、7d、14d、21d时间点各分为6小组,每小组6只。采用KA杏仁核点燃建立经典颞叶癫痫模型,应用原位杂交和免疫组织化学方法分别检测海马神经元zif268mRNA及其蛋白的表达。结果TLE组zif268mRNA表达在总体上和点燃后远期21d海马CA1、CA3区和齿状回(DG)均高于Sham组(P<0.05)。TLE组Zif268蛋白表达在总体上和远期21d海马DG表达低于Sham组(P<0.05)。回归分析提示颞叶癫痫与海马zif268mRNA表达呈正相关(β=0.286,P<0.001),与Zif268蛋白表达呈负相关(β=-0.153,P<0.001)。结论颞叶癫痫大鼠海马zif268mRNA及其蛋白的时空表达变化可能参与颞叶癫痫发病及其脑损伤过程。

Zif/268在冠心病猝死案例病理分析中的应用研究

目的:观察冠心病猝死(sudden coronary death,SCD)尸检和正常尸检心脏标本心肌局部Zif/268的表达,为法医中冠心病猝死案例病理分析提供客观指标。方法:采用免疫组织化学法和图像分析及统计学处理系统,对80例冠心病猝死(猝死组)和30例正常尸检(对照组)心脏标本心肌局部细胞核Zif/268的累积情况进行对比研究。结果:80例冠心病猝死心脏标本心肌局部有部分心肌细胞核呈阳性着色,阳性表达率几乎达到100%,对照组标本仅3例心肌细胞核散在阳性;图像定量分析结果显示两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫组化染色法检测心肌细胞核Zif/268的表达有望成为法医中冠心病猝死案例病理分析的一种有价值、有意义的手段。

ZIF-8递送生物大分子的研究进展

类沸石咪唑酯骨架-8(zeolitic imidazolate framework-8,ZIF-8)是一种由Zn^(2+)和2-甲基咪唑组成的新型金属有机骨架材料,它具有孔隙率高、比表面积大、化学和热稳定性好、表面性质可调及pH诱导生物降解性等优点,这些优点赋予了ZIF-8多种功能,使其能广泛应用于气体吸附与分离、催化、药物传递等领域。近年来,研究人员通过原位合成的方法使ZIF-8可包封蛋白质、酶、核酸等生物大分子,生物大分子主要通过交联、键合与ZIF-8骨架结合,并包埋在ZIF-8晶体内部或位于其表面。ZIF-8作为运载体可递送蛋白质和酶以保持其生物学活性,提高其功能表现和稳定性;同时,ZIF-8亦可负载核酸药物使其在胞内表达用于基因治疗。综述了这些方面的研究进展和应用,并对ZIF-8在相关生物医学领域的应用进行了展望。

药物成瘾记忆再巩固过程中脑内Zif268的激活

目的探讨药物成瘾记忆再巩固过程中的具体分子机制，阐明其中的关键分子。方法成年雄性SD大鼠30只按照随机数字表法分为生理盐水组（n=8）和可卡因组（n=22）；有效建立可卡因条件位置偏爱模型后，将可卡因组已明显成瘾的大鼠（n=151按照随机数字表法分成对照组（n=7）和成瘾记忆再巩固刺激组（n=8）。免疫组化染色检测3组大鼠脑内Zif268在可卡因诱导的成瘾记忆再巩固刺激后的表达情况。结果可卡因诱导的成瘾记忆再巩固刺激后大脑内侧前额叶皮质（mPFC）、伏隔核（NAcl、海马、杏仁核及乳头体上核（SUM）部位Zif268被激活，这些脑区表达Zif268的神经细胞数量比对照组显著升高，差异有统计学意SL（tmerC=12．640，tn=18．460，tNAc-corre=18．470，tNAc-shell=19．860，tCA1=17．860，tCA2=15．360，tcm=6．671，t杏仁核=15．570，tsar=20．380，P=-0．000）。结论大脑内侧前额叶皮质、伏隔核、海马、杏仁核及乳头体上核部位Zif268在药物成瘾记忆再巩固刺激后被显著激活，成瘾相关环路上的Zif268参与介导了药物成瘾记忆再巩固的过程。

Zif/268免疫组化在心性猝死诊断中的应用研究

目的 观察猝死和非猝死组尸检心脏标本心肌局部Zif/2 68的表达 ,为心肌早期缺血死后诊断提供客观指标。 方法 采用免疫组化SABC法和图像分析与统计学处理系统 ,对 18例猝死和 18例非猝死组尸检心脏标本心肌局部细胞核蛋白Zif/2 68的累积情况进行研究。 结果 18例心性猝死心脏标本心肌局部有部分心肌细胞核呈阳性着色 ,阳性表达率达 10 0 %。 18例对照组标本仅 2例心肌细胞核散在阳性。图像定量分析结果显示两组差异显著。 结论 说明免疫组化染色法检测心肌细胞核Zif/2 68的表达有望成为急性心肌缺血死后诊断的一种有价值有意义的手段。

强啡肽对纹状体内D_1多巴胺受体反应的调节

用6-羟多巴胺破坏黑质纹状体通路，使大鼠多巴胺耗竭后，应用原位杂交组织化学方法测量D1多巴胺受体对即早基因c－fos和zif268诱导反应，分析强啡肽对突触前、后调节作用。先用D1多巴胺受体激动剂SKF－38393反复处理动物，促进纹状体内强啡肽表达，在伏隔核强啡肽表达增加，同时伴随着即早基因c-fos和zif268的减少．在纹状体的背部和两侧，强啡肽表达虽大量增加，而D1多巴胺受体反应仍然维持原水平．在中央纹状体区，即早基因的表达处于中间水平。结果提示，纹状体内强啡肽起着调节多巴胺输入到纹状体黑质神经元的作用，包括突触前、后位置；并且调节作用在纹状体的腹。

可卡因环境相关奖赏记忆提取激活伏隔核中央核和杏仁核基底外侧核神经元

奖赏刺激和伴药环境之间的强烈关联记忆,使得成瘾者在戒除药物数月或数年后暴露于类似环境即可诱发复吸。研究成瘾记忆的神经生物学基础有重要意义。本研究以可卡因条件位置偏爱(conditioned place preference,CPP)实验为行为学模型模拟分析药物与环境之间关联的建立。c-Fos、Zif268是常用的反映神经元活动增加的即早基因标记物。本文旨在通过采用免疫组织荧光染色方法,对可卡因环境相关的奖赏记忆提取后小鼠各脑区c-Fos、Zif268表达进行定量,比较分析它们的表达差异,以此来观察环境相关奖赏记忆提取时不同脑区神经元的激活情况。C57BL/6小鼠分为三组:生理盐水提取组、可卡因环境相关奖赏记忆提取组以及可卡因未提取组。后两组均接受CPP训练(一侧为伴可卡因侧,另一侧为伴生理盐水侧),训练结束后可卡因环境相关奖赏记忆提取组提取相关记忆,可卡因未提取组不提取。生理盐水提取组在放入CPP箱两侧前均腹腔注射生理盐水。结果显示,在药物成瘾相关脑区伏隔核核部,可卡因环境相关奖赏记忆提取组c-Fos、Zif268蛋白表达量显著高于生理盐水提取组。可卡因环境相关奖赏记忆提取组杏仁核基底外侧核Zif268蛋白表达量显著高于生理盐水提取组。在中脑边缘多巴胺系统的其他相关脑区如前额叶皮层、海马等,各组间c-Fos、Zif268蛋白表达量并未观察到明显的差异。以上结果表明伏隔核中央核和杏仁核基底外侧核在可卡因环境相关奖赏记忆提取过程中被激活,这提示伏隔核中央核和杏仁核基底外侧核脑区内激活的神经元是可卡因环境相关奖赏记忆的重要神经基础,为进一步解析药物成瘾记忆机制打下了基础。