ZNF488通过PI3K/AKT通路促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭并抑制其凋亡

目的探讨锌脂蛋白488(zinc finger protein 488,ZNF488)是否通过PI3K/AKT通路调控胰腺癌Capan-1细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。方法体外培养胰腺癌Capan-1细胞,分为对照siRNA(si-NC)组、si-ZNF488组、si-ZNF488加PI3K/AKT通路激活剂740Y-P(si-ZNF488+740Y-P)组。TCGA在线数据库分析ZNF488的表达水平以及生存率,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测ZNF488、凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3(C-Caspase-3)和Bax、EMT相关蛋白E-cadherin和vimentin、以及PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT的表达。结果TCGA在线数据库分析结果显示,胰腺癌组织中ZNF488表达高于正常组,ZNF488低表达组的总生存期(overall survival,OS)优于ZNF488高表达组;与si-NC组相比,si-ZNF488组的细胞增殖、迁移和侵袭活性下降,且E-cadherin、p-PI3K和p-AKT下调,si-ZNF488组的细胞凋亡率、C-Caspase-3、vimentin和Bax增加;与siZNF488组相比,si-ZNF488+740Y-P组的细胞增殖、迁移、侵袭活性及E-cadherin、p-PI3K和p-AKT水平上升,而细胞凋亡率、C-Caspase-3、vimentin和Bax谁水平减少。结论干扰ZNF488的表达可通过PI3K/AKT通路抑制胰腺癌Capan-1细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。

锌指蛋白488基因对肝细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探讨锌指蛋白488(ZNF488)基因对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法筛选稳定敲除ZNF488基因的HepG2细胞(pLL3.7-ZNF488 shRNA-ZNF488组),同时将转染pLL3.7-ZNF488 shRNA空载质粒的HepG2细胞(pLL3.7-ZNF488 shRNA组)和正常的HepG2细胞(HepG2组)作为对照。采用CCK8法检测细胞增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况和细胞周期分布,采用Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测ZNF488蛋白及磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白的表达情况。结果pLL3.7-ZNF488 shRNA-ZNF488组HepG2细胞中ZNF488蛋白相对表达量低于HepG2组和pLL3.7-ZNF488 shRNA组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。培养48、72 h,pLL3.7-ZNF488 shRNA-ZNF488组HepG2细胞光密度(OD)值均低于HepG2组和pLL3.7-ZNF488 shRNA组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。pLL3.7-ZNF488 shRNA-ZNF488组HepG2细胞凋亡率、G2期细胞所占百分比均高于HepG2组和pLL3.7-ZNF488 shRNA组,侵袭细胞数目、迁移细胞数目及磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白相对表达量均低于HepG2组和pLL3.7-ZNF488 shRNA组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论ZNF488通过PI3K/AKT信号通路调控HCC细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移过程,有望成为HCC治疗的潜在靶点。