辣木MoGAD基因克隆及表达分析

【目的】鉴定辣木中MoGAD基因,并对其进行克隆、生物信息学分析和表达水平分析,为探究辣木MoGAD基因的功能与γ-氨基丁酸(GABA)生物合成的关系奠定基础。【方法】以拟南芥(NP_197235.1)和葡萄(XP_002285268.1)GAD蛋白序列为参考,通过本地BLAST方法,利用TBtools软件在辣木转录组数据中挖掘MoGAD家族基因,采用PCR技术对其进行克隆,并通过生物信息学在线分析网站和分子对接技术分析MoGAD蛋白的理化性质和催化活性位点,采用实时荧光定量RT-qPCR技术分析MoGAD基因在不同组织中的表达水平。【结果】在转录组数据中挖掘到4个MoGAD基因并成功对其进行克隆,测序的CDS区长度分别为:1494、1212、1470和942 bp;MoGAD1、MoGAD3和MoGAD4蛋白不存在跨膜结构域,属于膜外蛋白。其中MoGAD2蛋白序列在第5~27和60~82氨基酸位置存在跨膜结构,此段序列编码蛋白为分泌蛋白;系统发育分析显示MoGAD1基因家族所在分支基因Motif数量最多;分子对接表明4个MoGAD蛋白存在磷酸吡哆醛(PLP)和L-谷氨酸结合位点,且每个蛋白有多个氨基酸残基与PLP,L-谷氨酸形成氢键;荧光定量分析显示MoGAD1和MoGAD2基因在嫩叶、成熟叶和花中的表达量显著高于MoGAD3和MoGAD4基因,但这些基因在茎中表达量较低,推测MoGAD酶主要参与辣木叶部位GABA的生物合成。【结论】本研究成功克隆了辣木的MoGAD基因,并分析其编码蛋白的理化性质及与底物结合的功能活性位点,为进一步研究MoGAD基因的功能提供了理论依据。

辣木籽蛋白酶解物对小鼠肠道黏膜炎的改善作用

探讨辣木籽蛋白酶解物(Moringa oleifera Seed Protease Hydrolysate,MSPH)对小鼠肠道黏膜炎的改善作用。提取辣木籽蛋白并进行酶解,冷冻干燥得到MSPH;随机将雄性BALB/c小鼠分为空白对照(Con)组、模型(Mod)组和MSPH组(800 mg/kg·BW),每组6只,腹腔注射5-FU诱导小鼠肠道黏膜炎,MSPH灌胃干预。每天记录小鼠体质量;通过HE染色观察肠道组织形态学并计算绒毛高度/隐窝深度;酶联免疫法测定小鼠血清(INF-γ、SIgA、ROS、G-CSF、ET、D-LA)和小肠组织(IL-1β、IL-6、MDA、MPO、TNF-α)含量变化;实时荧光定量聚合酶链式反应检测小肠组织ZO-1和Occludin m RNA表达量。与Mod组相比,MSPH组小鼠在实验后期体质量显著提高(P=0.001 1),脾脏和胸腺指数分别增加16.22%和34.69%,肠绒毛高度/隐窝深度增加25.88%,血清中INF-γ、ROS、G-CSF、ET、D-LA含量分别降低16.85%、17.50%、14.22%、8.28%、9.27%,SIgA含量升高23.07%,小肠组织中IL-1β、IL-6、MDA、MPO、TNF-α含量分别降低9.72%、11.23%、9.74%、7.29%、5.17%,肠道组织ZO-1和Occludin mRNA表达量增加121.64%和29.35%。因此,MSPH可以通过减轻炎症和氧化应激及降低肠道通透性改善5-FU诱导的小鼠肠道黏膜炎。

辣木基质栽培平菇营养成分比较

为充分利用辣木资源,添加辣木叶粉、辣木枝屑、辣木壳粉作为培养基质栽培平菇,分析平菇营养成分变化。结果表明,与对照相比,用添加辣木料的基质培养平菇,平菇子实体矿质元素、粗纤维和蛋白质明显增加,粗脂肪和粗多糖明显下降。处理T3、处理T8和处理T9配方下氨基酸含量增加较多,达到3.04%、3.08%和3.05%,氨基酸总量均比对照组提高70%以上,说明添加辣木叶粉75%(T3)、辣木壳粉50%(T8)和辣木壳粉75%(T9)具有明显提高平菇氨基酸含量的优势。

辣木叶抗糖尿病效果及其作用机制研究进展

辣木作为我国卫生部批准的新资源食品之一,其叶具有重要的食用和药用价值,在防治糖尿病及其并发症方面具有显著效果。该文概述了辣木叶在动物、细胞实验以及临床研究中的显著抗糖尿病效果,并进一步对辣木叶具体活性成分(黄酮类、多糖类和蛋白类等)在改善胰岛素抵抗、保护胰岛细胞、抑制肝脏糖异生、促进肝糖原合成、增强抗氧化作用以及降低血脂和胆固醇等方面的调控效果及其作用机制进行阐述。对已报道相关文献进行整合分析可知,辣木叶抗糖尿病作用可通过改善胰岛功能、调控肠道功能和肝糖代谢3条作用途径实现。其中,辣木叶中所含黄酮类活性成分或是其降糖优势成分,能够显著增加胰岛素分泌量、促进β细胞的增殖和阻止β细胞的调亡作用,抗糖尿病效果显著;同时,辣木叶中所含多糖类或蛋白类活性成分能够通过改善葡萄糖耐受量、增强胰岛素敏感性、促进肝糖原合成、抑制肝糖原分解等方式,最终达到辅助降糖目的。未来需要进一步明确辣木叶中的降糖优势成分及其降糖机制,以期为天然降糖药物的开发和辣木资源的高值化利用提供参考。

辣木籽水提物对5-氟尿嘧啶诱导小鼠空肠黏膜炎的调节作用

【目的】探究辣木籽水提物对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导引起的小鼠空肠黏膜炎的改善作用。【方法】将50只SPF级雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组(腹腔注射5-FU 130 mg/kg)及辣木籽水提物低、中、高剂量组(分别灌胃辣木籽水提物50、100和200 mg/kg)。第1~14天,每日正常组和模型组灌胃蒸馏水,辣木籽组灌胃不同剂量的辣木籽水提物;第15~16天,每日正常组腹腔注射生理盐水,其余组均腹腔注射5-FU;第17~18天观察;第19天处死小鼠。每日记录小鼠摄食量、饮水量及体质量;采用HE染色并观察小鼠空肠组织形态学变化;采用免疫组化法检测空肠增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况;采用Tunel法检测空肠细胞的凋亡情况;采用酶联免疫法(ELISA)测定空肠组织IL-6、IL-1β和TNF-α炎症因子的含量变化。【结果】与模型组相比,辣木籽水提物高剂量组(200 mg/kg)可显著缓解小鼠体质量下降,极显著提高空肠绒毛高度、降低隐窝深度、增加绒毛高度与隐窝深度的比值,提高空肠PCNA表达量,降低细胞凋亡程度,抑制IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。【结论】辣木籽水提物可改善5-FU诱导引起的小鼠空肠黏膜炎,且呈剂量依赖性。

秋延后辣椒长季节高效栽培技术

湖南宁乡利用秋延后辣椒长季节种植模式延长辣椒采收时间,让消费者元旦、春节吃上本地新鲜辣椒,经济效益较高,推广前景较好。本文作者从优选品种、分批播种、穴盘育苗、高温加药剂处理大棚、重施有机肥底肥、科学精准追肥、合理控制温湿度、专用网防倒伏、病虫害防控、挂树留红椒、剪枝再生、严格控制采收标准等方面对该技术的关键要点进行了介绍。

超声辅助纤维素酶法提取辣木籽多酚的工艺优化及其体外活性

本实验以辣木籽为原料,研究纤维素酶添加量、乙醇体积分数、纤维素酶解时间、超声时间对辣木籽多酚提取量的影响,并采用响应面法优化超声辅助纤维素酶法提取辣木籽多酚工艺。此外,研究辣木籽多酚的体外抗氧化和降糖降脂活性。结果表明,超声辅助纤维素酶法提取辣木籽多酚最佳工艺为:酶添加量0.30%、乙醇体积分数53.00%、酶解时间31.00 min、超声时间33.00 min,在此条件下,所得辣木籽多酚的提取量为6.90 mg/g,与预测值无显著性差异。辣木籽多酚提取物具有较好的抗氧化活性,对ABTS自由基和DPPH自由基的清除能力的IC_(50)分别为0.76和0.61 mg/mL。同时,辣木籽多酚提取物具有较好的胰脂肪酶和α-淀粉酶抑制活性,其对胰脂肪酶和α-淀粉酶抑制率的IC_(50)分别为1.35和6.55 mg/mL。该研究为辣木籽多酚提取物的提取和应用提供理论依据。

辣木籽素对单增李斯特菌的抑制作用

为了探究辣木籽素对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的抑制作用,采用牛津杯法、二倍稀释法和生长曲线评价辣木籽素对L.monocytogenes的抑菌活性。通过核酸泄漏和蛋白质泄漏、胞外总糖、PI染色探究辣木籽素对单增李斯特菌细胞膜通透性的影响;运用结晶紫染色、细菌表面疏水性、菌体泳动性及扫描电镜评估辣木籽素对L.monocytogenes生物被膜的影响;采用胞内Ca2+含量和细胞凋亡率分析辣木籽素对单增李斯特菌凋亡的影响。结果表明,辣木籽素对单增李斯特菌具有较强的抑菌活性,其最小抑菌浓度(MIC)为400μmol/L;经1 MIC辣木籽素处理后的单增李斯特菌生长明显受到抑制,细胞膜损伤率达50.20%,通透性显著增加(P<0.05);核酸、蛋白质和糖类等大分子物质泄漏量分别是对照组的2.59倍、2.38倍和1.34倍(P<0.05);与对照组相比,生物被膜形成、细菌表面疏水性、泳动性和粘附性显著降低58.10%、38.00%和68.19%(P<0.05);胞内Ca2+含量显著上升3.83倍(P<0.01),凋亡率达54.40%。辣木籽素可能通过抑制生物膜、改变细胞膜通透性和促进细胞凋亡而起到抑菌作用。该研究为辣木籽素应用于食品防腐奠定了理论基础。

辣木叶提取物对广西麻鸡的屠宰性能、器官指数、肉品质和肠道形态结构的影响

为开发利用辣木资源,探讨饲粮中添加不同水平辣木叶提取物对广西麻鸡的屠宰性能、器官指数、肉品质和肠道形态结构的影响。以辣木叶粉为原料制备辣木提取物,采用单因素完全随机设计,选取720只28周龄广西麻鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复30只。对照组麻鸡饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组广西麻鸡分别在对照组的基础上添加100、150、200 mg/kg的辣木叶提取物,预试期1周,正试期8周。结果表明:(1)试验Ⅰ组腹脂率显著低于对照组(P<0.05),试验Ⅱ组腹脂率显著低于对照组、试验Ⅲ组(P<0.05);(2)试验Ⅱ、Ⅲ组脾脏指数显著高于对照组、试验Ⅰ组(P<0.05),不同水平辣木叶提取物对其他器官指数无显著影响(P>0.05);(3)试验Ⅰ组胸肌系水力、腿肌系水力显著高于对照组、试验Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组胸肌剪切力显著低于对照组(P<0.05);试验Ⅱ组胸肌肉色、腿肌肉色显著高于对照组、试验Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05);(4)试验Ⅰ、Ⅱ组空肠绒毛高度显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组空肠隐窝深度显著低于对照组(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ组十二指肠绒毛/隐窝值显著高于对照组、试验Ⅲ组(P<0.05)。综上所述,广西麻鸡饲粮中添加不同水平辣木叶提取物可以提高脾脏指数,改善腹脂率、肉品质和小肠形态结构。在28周龄广西麻鸡母鸡饲粮中添加150 mg/kg辣木叶提取物具有更优效果。

辣木果荚提取物油脂成分的GC-MS分析

[目的]分析了解辣木油中脂肪酸的组分和含量,更好地了解其用途和价值。[方法]以新鲜辣木果荚提取的辣木油脂为研究对象,对辣木油中脂肪酸和挥发性成分应用GC-MS技术进行定性定量分析。[结果]辣木油中检测出含有13种脂肪酸成分和16种挥发性成分,并且不饱和脂肪酸含量达到82.76%,还包括亚油酸、亚麻酸和DHA 3种人体不能合成的必需脂肪酸,这些都是单独使用辣木籽提油所没有的成分,但是其挥发性成分中检查出含有28.38%的硫化物,即十字花科植物主要的刺激性成分,如要对此油加以利用,需要将此成分除去。[结论]为辣木果荚和辣木籽混合提取的辣木油今后的深入研究和产业化开发提供了参考依据。

基于非靶向代谢组学分析辣木叶发酵前后营养物质及代谢物变化

发酵是提高食品原料营养价值的重要方法之一。该研究以辣木叶为材料,探究辣木叶乳酸菌发酵对蛋白质、黄酮、多酚、多糖等营养及功能成分及抗氧化活性的影响,并采用非靶标代谢组学技术探讨辣木叶发酵前后代谢物的变化。结果表明,发酵10 d后辣木叶蛋白质含量增加了16.12%,黄酮含量提高2.1%,多酚含量提高16.35%,多糖含量提高42%。但辣木叶的抗氧化活性没有显著变化。此外,发酵后鉴定到96种差异代谢物,其中52种上调,44种下调。经代谢通路分析得到5条关键代谢通路,这些代谢途径与氨基酸类物质的代谢以及黄酮类、生物碱类等物质的生物合成有关,表明乳酸菌发酵对辣木叶营养物质的形成、生物活性的提高具有积极作用。研究结果为乳酸菌发酵辣木叶的代谢物鉴定提供理论依据,也为研发辣木叶功能食品提供理论参考。

辣木叶发酵饮料的发酵工艺优化

该研究以辣木叶为原料,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)为发酵菌种制备辣木叶发酵饮料,以感官评分、蛋白质含量为评价指标,利用单因素试验和Box-Behnken试验设计优化其发酵工艺条件,并测定其理化指标和微生物指标。结果表明,辣木叶发酵饮料的最佳工艺条件为辣木叶和水的料液比1∶5(g∶mL)、植物乳杆菌接种量1%、木糖醇添加量16.5%。在此优化条件下,辣木叶发酵饮料的感官评分为89.16分、蛋白质含量为(4.32±0.08)g/100 g、脂肪含量为(1.96±0.16)g/100 g、pH值为3.68±0.18、总糖含量为(16.35±0.20)g/100 g、总酸含量为(3.85±0.15)g/L、可溶性固形物含量为(26.84±0.12)%、菌落总数与大肠杆菌均符合相关国家标准。

基于网络药理学及分子对接技术探讨辣木叶抗肥胖的作用机制

目的:本研究基于网络药理学和分子对接技术预测和验证辣木叶活性成分抗肥胖的分子靶点和途径,探索辣木叶活性成分的抗肥胖作用及潜在机制。方法:利用PubChem、DisGeNET数据库和SwissADME、Swiss Target Prediction在线预测平台获取辣木叶活性成分靶点和肥胖相关靶点;利用Venny 2.0.1平台对活性成分靶点和肥胖相关靶点取交集,筛选出关键靶点,并利用STRING 11.0数据库进行PPI网络的核心靶点分析;采用Cytoscape3.8.2软件,构建“成分-靶点”相互作用网络,筛选出核心活性成分;基于David数据库进行GO功能富集和KEGG通路分析;最后,运用Auto Dock 4.2软件对通路富集靶点与核心成分进行分子对接。结果:筛选出辣木叶活性成分50个,共确定了126个辣木叶抗肥胖的核心靶点,其中主要活性成分为鼠李黄素、胆甾-5烯-3醇、杨梅素、木犀草素等。GO及KEGG分析结果显示,辣木叶活性成分通过RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、信号传导、基因表达的正调控、蛋白质磷酸化及凋亡表达的负调控等生物过程,通过HIF-1、胰岛素抵抗、二型糖尿病、胰岛素信号通路等多条通路发挥抗肥胖作用。分子对接结果表明11个核心成分均与靶点结合,其中靶点PIK3R1与鼠李黄素呈现出最低的亲和力,为-9.2 kcal/mol,PIK3CA与胆甾-5烯-3醇为-9.1 kcal/mol,PIK3R1与杨梅素为-8.8 kcal/mol,AKT1与木犀草素为-8.7 kcal/mol。结论:本研究揭示了辣木叶通过多成分、多靶点、多通路协同发挥抗肥胖作用,为辣木叶抗肥胖及其分子机制的深入研究提供理论依据。

不同提取方法对辣木籽原油和精炼油品质的影响

为探索辣木籽油的高效提取方法,以辣木籽为原料,分别采用索氏抽提法、乙醇水法和水酶法提取辣木籽原油,通过脱胶、脱酸工艺制备辣木籽精炼油,测定辣木籽原油和精炼油的理化指标、叶绿素和类胡萝卜素含量及脂肪酸组成,分析不同提取方法对辣木籽原油和精炼油品质的影响。结果表明:乙醇水法对辣木籽油的气味有一定影响,3种提取方法对辣木籽原油和精炼油的色泽和透明度影响不大;3种提取方法中,水酶法辣木籽原油的酸值,其原油和精炼油的碘值、水分及挥发物含量均最大,氧化诱导时间最长,叶绿素和类胡萝卜素含量最低;3种提取方法对辣木籽油的脂肪酸组成及相对含量无显著影响(p>0.05)。综上,3种提取方法中水酶法提取的辣木籽油的品质总体上较优。

脱胶对不同方法提取辣木籽油品质的影响

以辣木籽为原料,分别采用索氏抽提法、乙醇水法和水酶法提取辣木籽油,研究脱胶工艺对3种提取方法得到的辣木籽油品质的影响。结果表明:脱胶对3种方法提取辣木籽油的色泽和透明度影响较大,而对其气味影响不大;脱胶能够降低毛油中的酸价、叶绿素和类胡萝卜素含量;增加毛油的碘值、氧化诱导时间;3种方法提取的辣木籽油脱胶前后酸价、碘值、氧化诱导时间、叶绿素和类胡萝卜素含量有显著性差异;3种提取方法得到的辣木籽毛油中脂肪酸成分无显著性差异,均有15种脂肪酸组成且含量最高的脂肪酸均为油酸,脱胶前后3种提取方法得到的辣木籽油中脂肪酸含量也无显著性差异。故脱胶能够适当提高油脂的氧化稳定性,提高油脂品质。

辣木瑙螟幼虫的空间分布型及抽样技术研究

【目的】辣木瑙螟是在中国辣木上新发现的1种鳞翅目草螟科害虫,主要以幼虫取食叶片、钻蛀果荚形成危害。为明确其在田间的分布特点,2015年9月采用分层随机抽样法在云南省元江县的辣木园内对辣木瑙螟幼虫进行调查。【方法】通过6种聚集度指标(C、I、Ca、m^*/m、La、K)、Iwao的m^*-m回归模型、Taylor幂法则等分析了辣木瑙螟幼虫种群的空间分布型,并利用种群聚集均数分析了幼虫种群的聚集原因。【结果】辣木瑙螟幼虫在辣木上的空间分布型为依赖于密度的聚集分布,分布的基本成分为个体群,且个体间相互吸引。聚集均数分析表明:辣木瑙螟幼虫的聚集原因主要由其产卵、取食等习性和环境共同引起;辣木瑙螟幼虫平均虫口数受水平方向的影响较小,但受垂直方向的影响较大;建立了辣木瑙螟幼虫抽样数公式:N=t^2/D^2(3.548/m+0.253)和序贯抽样方程[T(n) n±1.95√1.95]【结论】本研究丰富了辣木瑙螟在云南省的研究数据,同时为林间虫情的预测预报及防治策略的制定提供参考依据。

辣木危险性害虫辣木瑙螟Noorda blitealis研究初报

【背景】辣木瑙螟是在我国辣木上新发现的一种小蛾类害虫,主要以幼虫取食叶片为害,严重时可将叶片全部取食。目前该虫在我国云南省已有分布,对辣木产业威胁极大。【方法】通过室内试验、田间调查和收集整理辣木瑙螟相关资料,研究并总结了辣木瑙螟的寄主植物、地理分布、形态特征、部分生物学特性、危害和发生情况。【结果】人工饲养与初步观察显示,辣木瑙螟幼虫期约16.17 d,蛹期约10.25 d,从初孵幼虫到成虫共需约26.42 d。在云南省元江县的调查结果显示,辣木被害株率达94%以上,单株虫量最高达302头·株-1,经常采收的地块枝被害率达80.80%、被害指数达0.54,受害程度显著高于未采收地块。【结论】关于辣木瑙螟的年生活史、世代数、危害损失、防治方法等方面尚待进一步研究。随着辣木种植面积的扩大,其他与辣木种植环境相似的地区也可能有辣木瑙螟的分布。因此,需采取系统调查和大田普查的方法加强监测,防止该虫蔓延。

10个黄皮辣椒自交系主要性状配合力及杂种优势分析

为选配优良黄皮辣椒亲本和杂交组合,以10个黄皮辣椒自交系为材料按不完全双列杂交设计组配25个杂交组合,对F1的11个主要性状进行配合力及杂种优势分析。结果表明,亲本A77、A244、A61的单位面积产量一般配合力效应值较高,可作为优良的杂交亲本使用;杂交组合中A50×A242的产量特殊配合力效应值最高,产量表现最好;有4个杂交组合的单位面积产量超标优势均在30%以上,是强优势组合。其中产量表现最好的2个组合为A50×A242、A61×A244,其单位面积产量超标优势分别为46.255%、42.616%,可以作为优良的杂交组合使用;相关分析结果表明,单位面积产量与果宽、果肉厚、单果质量显著或极显著正相关。

N、P、K、Ca缺素培养对辣木幼苗生长的影响

探究营养元素N、P、K、Ca缺素培养时,辣木幼苗表现出的营养缺乏症状和对生长的影响,为辣木的营养诊断和优质高效栽培提供理论依据。试验采用砂培盆栽法,设置全素(CK)、缺氮(-N)、缺磷(-P)、缺钾(-K)和缺钙(-Ca)5个处理,对不同缺素处理的幼苗症状进行观察,测定其苗高净生长量、茎粗和叶数。结果表明,辣木幼苗缺氮时症状出现最早,表现最为明显,主要为叶片小、全株淡黄色、植株矮小、长势较弱,缺磷、缺钾幼苗则无明显症状。在缺氮、缺磷、缺钾、缺钙处理下,辣木幼苗的苗高净生长量、茎粗均低于全素,其中缺氮对苗高净生长量和茎粗影响最大,N离子是限制辣木伸长和茎粗增长的主要影响因子。缺素对辣木幼苗叶数影响不明显。说明氮、磷、钾、钙缺乏对辣木幼苗生长造成一定程度的影响,但影响程度不同,缺氮影响最大。

辣木瑙螟幼虫虫龄的判定

【目的】明确辣木瑙螟幼虫最佳的分龄指标及幼虫虫龄数,为辣木瑙螟预测预报及防控提供基础资料。【方法】在实验室对辣木瑙螟幼虫头壳宽、体长和体宽3个外部形态指标进行测量,通过Dyar定律推断其龄数,并通过Crosby指数、Brook指数和回归分析对所测得的数据进行统计分析,判断分龄的合理性。【结果】辣木瑙螟幼虫分为5龄,1～5龄幼虫的头壳宽平均值分别为0.25、0.40、0.63、0.92和1.30 mm,体长平均值分别为2.09、3.69、6.10、10.09和12.93 mm,体宽平均值分别为0.34、0.57、0.94、1.33和1.92 mm。各龄幼虫头壳宽平均值的变异系数和Crosby指数最小,头壳宽与虫龄间的三次和二次线性拟合模型的相关系数最大(R2=0.9999),头壳宽与虫龄间指数拟合模型的相关系数(R2=0.9955)较高,拟合程度均较好。28℃下辣木瑙螟幼虫历期为10～13 d。【结论】辣木瑙螟幼虫分为5龄,头壳宽为辣木瑙螟幼虫虫龄判定的最佳指标,体长和体宽不适合用于辣木瑙螟幼虫虫龄的判定,其行为、体色和刚毛可为虫龄的判定提供参考。