实验动物体外寄生虫三种检测方法的比较

目的对几种实验动物体外寄生虫感染情况进行初步调查,并对三种检测方法进行比较。方法采用拔毛法、刮皮法、处死法三种方法。结果处死法检测四组小鼠样本的体外寄生虫感染率分别是75.5%、90.0%、73.3%、85%,拔毛法和刮皮法分别为19.8%、27.3%、10.0%、75.0%与19.8%、60.6%、40.0%、65.0%。用处死法测得豚鼠体表长虱和新西兰兔体表疥螨的感染率均为100%。结论处死法检测实验动物体表寄生虫效果较好,但处死法与其它两种方法结合,可使检测结果更具科学性。

同种异体成骨细胞-煅烧骨复合物动物体内植入

目的 观察同种异体煅烧骨 -成骨细胞复合物植入动物体内后成骨性能 .方法 以牛松质骨制成煅烧骨 (TBC)为载体 ,培养兔骨膜成骨细胞 (POB)构建复合物 ,把该复合物移植到 BAL B/ c裸鼠皮下和兔臀部肌袋内 ,以单纯 TBC植入做为对照 ,2 8d后取材 ,制成不脱钙组织切片、HE染色 .结果 裸鼠实验组 TBC材料内部 :成纤维细胞大量增生 .细胞排列紧密 ,形态多样 ,有的已变为软骨细胞 ,TBC表面有排列成行的成骨细胞环绕 .组织间有散在淋巴细胞浸润 .同时可见片状类骨质 .兔子实验组 TBC材料内部有结缔组织及细小血管长入 ,孔内充满软骨细胞并可见软骨组织钙化、崩解、成骨现象、有片状骨组织形成 ;而单纯 TBC对照组孔隙内有大量结缔组织及细小血管长入 ,未见骨组织形成 .结论 将TBC- POB材料植入体内后 。

特殊环境人工实验舱安全管理及质量保证

本文介绍了特殊环境人工实验舱的设备结构和基本工作要求。在遵守国标及安全管理的前提下,对安全性、有效性、可控性进行了阐述。

实验病理标本前期处理应注意的若干问题

实验病理技术中标本的取材、固定以及后续的制片染色,对病理诊断结果的可靠性、真实性有很大的影响,本文对动物实验病理制片关键步骤中易出现的问题及对策进行探讨。

BALB/c裸小鼠繁育的实验观察

在自制的隔离器内观察温度、昼夜明暗时间和相对湿度的变化对 BALB/c裸小鼠繁育的影响 ,经过 1 4个月的实验观察得出如下结论 :在隔离器内 ,温度为 2 5～ 2 7℃、昼夜明暗交替时间为 1 0∶ 1 4 h、相对湿度为 40 %～ 45%时 ,BALB/c裸小鼠的妊娠率为 95%、仔鼠离乳率其中纯合子 (nu/nu)为 98% ,杂合子 (nu/+)为 1 0 0 %、成年鼠死亡率为 0、出生仔鼠中纯合子与杂合子比率分别为 56%和 44% ;在实验变化范围内 ,温度、昼夜明暗交替时间和相对湿度的变化对成年鼠(雄性纯合子、雌性杂合子 )

颈总动脉向冠脉搭桥动物模型建立和应用

本实验通过１２条大，建立颈总动脉向左冠脉回旋支（ＬＣＸ）供血的动物模型，并设对照组，观察冠脉流量的变化，结果显示：实验组冠脉流量稳定，磁探头嵌在颈总动脉处较其嵌在ＬＣＸ上冠脉流量稳定。

建立大鼠异基因骨髓移植模型的实验研究

目的:建立较稳定的异基因骨髓移植模型,为异基因骨髓移植的相关研究提供实验参照。方法:以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A(对照组)、B(移植组)两组,移植当天A、B组均接受8.5Gy的全身照射(TBI),于照射后6h,A组回输等量培养液,B组经尾静脉输注供鼠骨髓细胞(2×108个/kg)。观察生存期外周白细胞计数,B组存活鼠检测Y染色体及观察有无移植物抗宿主病(GVHD)临床及病理表现。结果:A组大鼠于15d内全部死亡,外周白细胞计数明显减低,骨髓病理示造血组织减少,提示死于造血衰竭。B组大鼠均达到造血重建,8只存活超过50d,骨髓中能检测到供鼠Y染色体,另2只鼠分别于18、31d死亡,肝及小肠病理未见明显GVHD。结论:B组大鼠异基因骨髓成功植入,预处理的方式是可行的,同时单纯输入异基因骨髓细胞不能引起明显的GVHD。

外伤后癫痫动物模型的建立

目的将铁离子导入到大鼠的感觉运动皮质内,造成大鼠的外伤后癫痫的动物模型,观察大鼠术后癫痫发作的行为学改变。方法用离子导入法将铁离子导入到SD大鼠大脑皮质内,通电时间为10 min,通电电流为200μA。对照组大鼠给予相同的手术操作,但不导入铁离子。结果实验组内20只大鼠有18只出现癫痫发作,癫痫模型制作成功率为90%;对照组内20只大鼠内有一只出现癫痫发作,癫痫模型制作成功率为5%。结论用离子导入法制作大鼠外伤后癫痫动物模型的通电电流以200μA为最佳条件,通电时间为10 min。制造出来的模型的成功率较高,且为急性模型。

脊髓腹侧压迫损伤后c-Fos蛋白表达的实验研究

目的:研究脊髓腹侧压迫损伤后脊髓内部构筑变化及c-Fos蛋白的表达情况。方法:取健康新西兰大白兔24只,建立脊髓腹侧压迫损伤模型,分为压迫组和对照组,依次于造模手术后0.5、1、2、4h取材。取脊髓作连续切片后,采用HE及免疫组化方法,观察压迫后不同时间脊髓内部的病理变化与脊髓前角c-FOS阳性神经元的表达情况。结果:(1)造模组脊髓内部构筑出现不同程度的位移、偏转和变形,尤以灰质Ⅷ、Ⅸ板层明显,病变程度随压迫时间的增加而加重。(2)脊髓腹侧损伤后c-Fos阳性神经元细胞在脊髓前角、中间带和中央管周围的大多角形细胞以及后角的小圆细胞均有表达,其表达尤以前角Ⅷ、Ⅸ板层显著。压迫组c-Fos阳性神经元细胞数量与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脊髓腹侧压迫后,脊髓的外部形态和内部构筑均发生了变化、位移和不同程度的病理变化,尤以Ⅷ、Ⅸ板层比较明显,Ⅶ板层变化次之。c-Fos阳性神经元细胞在脊髓前角Ⅷ、Ⅸ板层的大多角形细胞呈高表达,提示c-Fos蛋白的表达可能与脊髓构筑变化有关。

直升机飞行人员低压舱耳气压功能分析

目的了解直升机飞行人员耳气压功能的整体状况。方法2013年8月对某部158名直升机飞行人员进行病史询问，并行电耳镜、纯音测听、声导抗及前鼻镜、鼻内镜检查。无低压舱检查禁忌证者进入舱内，以15m／s的速度“上升”至40001／1，停留5min后以5m／s的速度“下降”至地面，每“上升”和“下降”1000m时飞行人员在症状列表中选勾一次主观感觉。出舱后复查电耳镜、纯音测听和声导抗，与进舱前的检查结果进行对照。结果共完成检查157人（314耳），75例（左耳23例、右耳27例、双耳25例）在不同高度分别出现耳闷胀、耳压痛等症状，在3000—1000m下降时症状加重；出舱后电耳镜检查鼓膜Ⅱ度充血19例30耳（左耳2例、右耳6例、双耳11例），Ⅲ度充血1例1耳（右耳）；出舱后纯音测听听力异常20例31耳（左耳3例、右耳6例、双耳11例），呈轻到中度传导性聋；出舱后声导抗测试c型曲线19例22耳（左耳8例、右耳8例、双耳3例1，B型曲线3例3耳（左耳1例、右耳2例o157例314耳中，达耳气压功能不良诊断标准者10例17耳（左耳2例、右耳1例、双耳7例），分别占6．37％（10／157）和5．41％（17／314），其中轻度不良的6例12耳，中度不良的1例1耳（左耳），重度不良的3例4耳（左耳、右耳、双耳各1例）。结论直升机飞行人员耳气压功能的整体状况良好，但仍有极少数飞行人员没有很好掌握主动开放咽鼓管的动作要领，需加强训练。

年龄和性别因素对封闭群草原兔尾鼠正常血液生化指标的影响

目的 探讨性别和年龄因素对封闭群草原兔尾鼠正常血液生化指标的影响。方法 利用雅培(AEROSET)全自动血液生化测定仪对雄性组、雌性组、1月龄 2月龄组和 2 4月龄组封闭群草原兔尾鼠的 2 3项血液正常生化指标进行了测定。结果 两年龄组各指标间以及两性别组各指标间均无统计学差异。结论 本实验中封闭群草原兔尾鼠的性别因素和年龄 (1月龄 - 2月龄年龄段和 2 4月龄年龄段 )因素对测定的 2 3项正常血液生化指标没有显著影响。

封闭群草原兔尾鼠肝脏和胰腺的组织学观察

首次对封闭群草原兔尾鼠的肝脏、胰腺进行了组织学观察 ,结果表明 :1.草原兔尾鼠的肝脏纤维组织极少 ,肝小叶间界限不明显 ;部分中央静脉周围可见少量毛细胆管 ;门管区较少 ,分布不均匀 ,其静脉形状不规则、腔大 ,胆管及动脉则较小。 2 .胰腺分叶清晰 ,腺泡细胞较大 ,胞浆多呈嗜酸染色 ;小叶中部腺泡着色较深 ,外侧腺泡着色较浅 ;胰岛大小不等 ,细胞排列呈不规则索状 ,光镜下未见特殊改变。

乳鼠成骨细胞的原代培养与鉴定

目的：验证及改良成骨细胞原代培养常用方法，探讨该方法的可行性和应用价值。方法：取材于出生2～3d小鼠颅骨，以含20％胎牛血清的DMEM培养液进行培养，采用胶原酶消化法分离成骨细胞，并进行细胞接种与传代。细胞采用Gomori钙钴法染色并进行细胞形态观察，鉴定成骨细胞起源，根据细胞的生长曲线以及贴壁率观察细胞的生长情况。结果：原代培养48h后，大量细胞贴壁生长，呈长梭形或有2～3个突起，胞质透亮、饱满，7d后细胞铺满整个平皿底面。所得细胞经Gomori钙钴法鉴定，证实为成骨细胞。细胞接种后第1个24h为细胞潜伏适应期，第2～7个24h生长曲线基本为线性曲线，是细胞的对数生长期。细胞贴壁主要发生在接种10h之内。结论：采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法。

大鼠重症急性胰腺炎相关性肝损伤模型的建立

目的通过夹闭胰头部的方法建立一种新型大鼠重症急性胰腺炎相关性肝损伤（severeacutepancreatitis—associatedliverinjury）的动物模型。方法将SPF级健康雄性sD大鼠180只随机分为对照组、假手术组、肝损伤模型组，每组60只。再分别将每个分组中的60只大鼠随机分为6个分组，包括0、6、12、18、24和36h组，每组10只大鼠。肝损伤模型组用16cm弯止血钳夹闭胰头2h后松开。同时在相应时间点建立对照组及假手术组。在造模完成后，分别于相应各时间点采集血液、肝脏组织、胰腺组织标本。行血清淀粉酶（AMY）、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、中性粒细胞百分比检测，行肝脏组织、胰腺组织病理学观察。结果肝损伤模型组大鼠AMY12h[（5052．1±114．9）U／L]、中性粒细胞百分比值12h[（7：5．2±5．8）％]、ALT12h[（52．6±5．9）U／L]、AST12h[（629．5±57．4）U／L]达到峰值，均显著高于其他时间点组（P〈0．05）。肝损伤模型组与对照组和假手术组同一时间点组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。病理组织学观察可见造模后随时间进程胰腺炎呈加重表现，肝组织损伤24h最重。肝损伤模型组血清AMY与血液中性粒细胞百分比、ALT、AST呈正相关（r=0．796，P〈0．01；r=0．710，P〈0．01；r=0．875，P〈0．01）。胰腺病理学评分与肝脏病理学评分呈正相关（r．=0．919，P〈0．01）。结论通过夹闭胰头部的方法建立了一种新型大鼠重症急性胰腺炎（SAP）相关性肝损伤的动物模型，24h为肝损伤最严重的时间点，也是我们建模的最佳时间点，为急性坏死性胰腺炎致肝损伤的发病机制及药物干预研究提供了一种较为理想的动物模型。

牛煅烧骨与体外培养兔骨膜成骨细胞的相容性

目的 观察煅烧骨与培养的兔骨膜成骨细胞的组织相容性 ,为将复合物植入骨缺损提供实验依据 .方法 采用取材丰富的牛松质骨经脱脂、脱蛋白、煅烧等工艺处理制成的煅烧骨 (true bone ceram ic,TBC)为载体 ,将体外培养的兔骨膜成骨细胞复合到 TBC,4,10和 2 0 d取材 ,行扫描电镜观察 ,设对照组 .结果 4d后 ,煅烧骨面及孔内即有了细胞贴附生长 ,2 0 d全部长满 ,有胶原纤维形成 ,对照组则没有 .

雷帕霉素和罗格列酮对人乳腺癌细胞生长的影响

目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对人乳腺癌细胞株MCF-7体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供试验依据。方法:取对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞株,按2.0×10~6细胞/孔接种24孔板,按照析因试验安排4个试验组:①雷帕霉素组(8×10^(-5)mg/L);②罗格列酮组(50μmol/L);③联合组;④、实验对照组(不做任何处理的常规培养细胞)。各组各浓度分别设3个复孔,实验重复3次。采用MTT比色法观察雷帕霉素和罗格列酮对体外培养的MCF-7细胞系生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化。结果:罗格列酮和雷帕霉素均能有效的抑制体外培养的乳腺癌细胞株MCF-7的生长,雷帕霉素的抑制率最大(P<0.05)。联合用药不增加细胞生长抑制率(P<0.05)。结论:体外培养抑制试验证明雷帕霉素、罗格列酮均能有效的抑制乳腺癌细胞株MCF-7的生长。雷帕霉素联合罗格列酮不增加细胞凋亡。雷帕霉素和罗格列酮对MCF-7细胞株的干预作用是通过周期阻滞完成的。

西藏小型猪心脏、呼吸系统组织学观察

目的积累西藏小型猪心脏和呼吸系统的组织学资料,对西藏小型猪在相关生物学研究上的应用提供参考。方法将西藏小型猪心脏和呼吸系统各脏器固定于10%中性甲醛溶液中,常规石蜡切片,HE染色,光镜下观察。结果西藏小型猪心脏壁厚,心内膜下浦肯野纤维粗,束细胞大而清晰,排列规则;心肌纤维粗大,排列紧密,横纹较模糊,润盘少且不清楚,肌间血管丰富;心外膜较厚。西藏小型猪鼻黏膜较厚;气管和支气管假复层柱状纤毛上皮排列紧密,纤毛粗而长,黏膜下腺体量少;肺支气管周围无炎性细胞浸润,肺泡腔内尘细胞极少,肺泡壁和肺间质血管较丰富。结论西藏小型猪心脏、呼吸系统表现出高原动物组织学特点,其这种特点对今后西藏小型猪实验所涉及的组织学判断有重要参考价值。

氟对小鼠成骨细胞增殖的影响

目的 观察氟对体外培养小鼠成骨细胞增殖的影响。方法 原代培养小鼠成骨细胞，以0（对照组）、5、10、20、40mg／L剂量染氟，光、电镜观察成骨细胞的形态学变化；采用生长曲线、噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测细胞周期，观察细胞数量变化和细胞周期时相分布。结果 第10天时，5、10、20mg／L染氟组从形态学上表现出细胞增殖。而40mg／L组中出现细胞凋亡。染氟24h时，20mg／L组与对照组相比细胞增殖明显，差异具有统计学意义（P〈0．05），随着时间延长，染氟组表现出更强的增殖活性，至72h时，各染氟组成骨细胞增殖均高于对照组（P〈0．05）。24h时各染氟组间细胞增殖水平未见明显差异（P〉0．05），48h以后40mg／L组明显低于其他各染氟组（P〈0．05）。而染氟72h时5mg／L组增殖强度也低于10、20mg／L组（P〈0．05）。与对照组相比，10、20mg／L组处于G0／G1期的细胞数减少，而S期细胞数增加（P〈0．05），同时两组的细胞增殖指数也高于对照组（P〈0．05），生长表现出增殖状态；其中10mg／L组与其他染氟组之间，差异有统计学意义（P〈0．05），表现为细胞增殖能力增强。结论 低剂量的氟在较短作用时间内可以促进体外培养小鼠成骨细胞增殖，随剂量增加和暴露时间延长其促进作用减弱。

比格犬卵巢子宫内雌激素受体ERα、ERβ的免疫组织化学定位

目的研究雌激素受体α,β在比格犬卵巢及子宫内的定位。方法采用免疫组化SP法DAB显色结合BCIP/NBT及AEC显色检测ERα、ERβ在比格犬子宫及卵巢内的表达。结果比格犬ERα主要表达于卵泡颗粒细胞、卵巢间质腺腺上皮细胞及子宫内膜腺体腺上皮细胞胞核内,胞质内仅有少量表达,而在卵泡膜内膜的间质细胞,腺体周围的基质细胞及小动脉血管内皮细胞和平滑肌细胞、小静脉内皮细胞的胞核内有少量表达。而ERβ则以相同的组织特异性主要表达于上述组织细胞的胞质内,在胞核内有微弱表达。ERα表达于膜黄体细胞的胞核内,而在黄体颗粒细胞胞核与胞质内均有表达。而ERβ则仍特异表达于不同生理阶段黄体细胞的胞质内。BCIP/NBT与AEC双染未见ERα、ERβ在子宫内有明显的共表达现象。结论比格犬ERα、ERβ在子宫与卵巢组织内定位不同,ERα主要定位于胞核,在胞质内有微弱表达,而ERβ主要定位于胞质,在胞核内有零星表达。

新疆长白猪皮肤组织结构与人皮肤组织结构的比较

用常规病理切片技术,对新疆长白猪的皮肤组织结构与人的皮肤进行初步比较,为长白猪的实验动物化及治疗大面积烧伤提供生物敷料和相关的移植研究提供实验依据。结果表明,长白猪与人的皮肤在分层上相似,都是由表皮、真皮、皮下组织及皮肤的附属器构成。但也存在差异,长白猪皮肤的毛囊比人的毛囊粗大,汗腺多为大汗腺,极少有小汗腺,皮脂腺在分布位置上与人相同,但不发达,数量极少,胞浆中脂滴颗粒细小。但在新疆的特殊地理环境下培育数十年,长白猪是大面积深度烧伤治疗中异种皮片的提供者,也是创伤愈合机理研究及异种器官移植免疫排斥机制研究适合的动物模型。