北京大学医学部《医学微生物学》课程体系改革与建设的研究

本文通过文献查阅、考察与交流、梳理与整合和综合分析,在北京大学医学部"新途径"教学改革的基本框架下,设置了以《医学微生物学》核心课程内容为基础的传统课程模块,引入案例讨论和综合性实验等创新课程模块,配合新开设的选修课和专题讲座等补充课程模块,以及植根于科学研究平台的创新人才培养计划项目,构建了《医学微生物学》"3+1"分段式本科课程模块体系,以期对推动《医学微生物学》教学改革及培养创新性人才有所贡献。

新时代背景下医学微生物学课程思政的建设与应用探索

近年来,高等教育已经步入了课程思政全面建设的新时期,积极有效地落实课程思政已经成为高校教学的重点。医学微生物学是医学各专业学生均需要学习的专业必修课。目前,各种新发传染病不断出现,给社会带来巨大威胁。在同传染病做斗争的过程中,一线医务工作者和科研人员表现出了极大的勇气和担当,为我国各种传染病的有效控制做出了突出贡献,因此在医学微生物学教学过程中进行课程思政具有极强的必要性。但目前对医学微生物学课程思政的探索尚非常有限,为此,本研究对医学微生物学课程思政进行了建设,设计了多种可执行的模式并进行了探索,收到了良好的效果。本研究可以为医学微生物学的课程思政提供参考。

肺部感染的微生物谱变迁

肺部感染是指由微生物等感染因子引起的肺组织炎症和病变,临床可表现为肺炎、支气管炎和细支气管炎等疾病,甚至危及生命,其发病率高、传播范围广,对人类健康造成严重威胁。由于疫苗及抗生素的普及、人类社会及环境因素变化、临床介入诊疗技术的广泛使用及免疫功能低下人群的增加等因素,导致肺部感染病原谱日趋复杂,主要表现为经典的肺部感染病原体的流行规律发生改变、新发病原体不断出现、耐药性微生物感染日趋严峻、机会感染持续增加,这些变迁给肺部感染性疾病的防治提出了新的挑战。本文围绕肺部感染的微生物谱变迁进行简要综述,以助于采取有效措施对肺部感染进行预防和控制。

医学微生物学实验课程的多元化生物安全教育模式探索

当前,新发传染病不断出现,给人类健康带来巨大威胁,也给国境卫生检疫带来巨大压力。在医学生本科阶段加强医学微生物学生物安全理念的培养,对于建设高素质卫生检疫人才队伍具有重要意义。本文通过在医学微生物学教学中增加生物安全培训内容、加强生物安全防护措施、加强无菌操作技术培训、鼓励学生积极参与实验课前期准备和医学废弃物的标准化处理、重新选择和评价菌毒种、完善多媒体教学模式等多元化教学模式,提高了学生的生物安全意识,推动了本科实验室的规范化和科学化建设,更好地满足新时代医学人才培养的需要。

医学微生物实验教学中开展自主性实验的尝试

本文阐述了在医学微生物学实验课教学改革中开展自主性实验方面的有益尝试，并就自主性实验课的选项，内容设置，学时安排、考核、及教学效果评估等方面进行简要介绍。

基础知识与PBL学习过程对医学生能力提高的不同影响

目的分析基础知识掌握程度与PBL学习过程对医学生能力提高的不同影响,为医学教育的教学方法改革提供依据。方法选取以乙型肝炎为主题的医学微生物学科背景案例,以医学微生物学成绩、PBL平时成绩分组,比较案例相关内容考核成绩的差异。结果医学微生物学成绩高的学生,案例考试中情境式分析型单选题成绩高(P<0.05);PBL平时成绩高的学生,案例考试中情境式简答题成绩高(P<0.05)。结论基础学科知识的掌握程度与PBL讨论过程对医学生知识与能力的提高都有重要的意义。

HIV/HCV合并感染者的生物学特征与生存分析

目的：了解HIV／HCV合并感染者、单纯HIV感染者的肝脏受损状况、肝脏功能指标以及生存状况。方法：对河南省某地有偿献血所致的HIV／HCV合并感染组144人和单纯HIV感染组60人进行回顾性队列研究，记录其生存情况，进行CD4＋和CD8＋T淋巴细胞计数以及肝功能各项指标检查，B超检查肝脏纤维化情况。结果：HIV／HCV合并感染组的生存时间为21．998（20．960—23．036）a，单纯HIV感染组的生存时间为24．904（23．555～26．253）a，两组生存曲线差异具有统计学意义（x2=6．183，P=0．013）。两组CD4＋、CD8＋T淋巴细胞计数差异无统计学意义（Z=1．019和0．121，P〉0．05）。HIV／HCV合并感染组的肝脏纤维化率以及ALT、AST、PT异常升高的比例高于单纯HIV感染组（x2=6．410、4．123、4．312和4．040，P〈0．05）。结论：HIV可以促进HIV／HCV合并感者肝脏的纤维化进程。

人肠道病毒2A蛋白酶生物学作用研究进展

人肠道病毒(HEVs)是近年来危害亚太地区婴幼儿健康的重要病原体。随着HEVs研究的进展,对其2A蛋白在病毒复制、关闭宿主蛋白合成以及逃避机体固有免疫反应等方面的作用有了进一步的认识。本文主要对2A蛋白酶的生物学功能作一综述,对相关病毒致病机制研究以及2A蛋白开发应用有启发作用。

接触镜储存盒不同处理方式对常见接触镜相关角膜炎病原菌生物被膜的清除作用

目的评价接触镜相关角膜炎不同病原菌形成生物被膜的能力,并比较角膜接触镜储存盒(CLC)不同处理方式对其生物被膜的清除作用。方法通过静态生物被膜形成实验,在聚丙烯材质的CLC中37℃孵育金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌24 h,建立生物被膜模型。根据处理方式分为对照组、室温干燥组、护理液浸泡组、加热干燥组和浸泡加热组,采用系列稀释微量计数法测定各组生物被膜生物量,并计算生物被膜杀灭率。结果4个实验菌株均可在CLC内壁形成生物被膜。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌形成生物被膜的生物量分别为(10.78±2.12)、(9.19±0.57)、(8.03±0.30)和(7.50±0.07)lg CFU/ml;其中金黄色葡萄球菌形成生物被膜的生物量明显高于其他菌株,差异均有统计学意义(均P<0.05)。加热干燥组和浸泡加热组各菌株生物被膜生物量均低于相应对照组,护理液浸泡组金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌生物被膜生物量低于相应对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。加热干燥处理对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌的杀灭率分别为(51.76±16.75)%、(68.63±4.43)%、(83.51±13.97)%和(97.13±5.19)%,总体比较差异有统计学意义(F=31.806,P<0.001);各菌杀灭率两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。室温干燥处理对各病原菌生物被膜的杀灭率总体比较差异无统计学意义(F=0.620,P=0.606)。浸泡加热处理对大肠埃希菌和白假丝酵母菌的杀灭率分别为(100.00±0.00)%和(97.79±7.67)%,均明显高于其对金黄色葡萄球菌的(81.13±14.86)%和对铜绿假单胞菌的(74.22±11.91)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论加热处理或者结合使用护理液浸泡处理CLC可显著提高对实验菌株生物被膜菌的杀灭作用,有效清除CLC中的细菌或真菌污染。

从HBV X蛋白的生物学功能看靶向HBx临床治愈慢性乙型肝炎的可能性

HBx是乙型肝炎病毒基因组编码的一种具有转录调节活性的非结构蛋白,对从头感染初始阶段新形成cccDNA转录的激活和感染过程中cccDNA转录活性的维持都具有重要作用。其中,cccDNA是HBx表达的重要转录来源,但最早的HBx从何而来仍然未知。在HBV慢性感染过程中普遍存在HBV基因组片段的整合,已有大量数据显示,整合的HBV DNA片段所表达的表面抗原蛋白是HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBsAg的主要来源;而其表达的保留了结合宿主细胞因子部分功能的截短HBx是否仍有激活和维持cccDNA转录的作用还有待验证。近年来,以HBx为治疗靶点的抗HBV治疗研究也取得了诸多新进展,为CHB的临床治愈提出了新的靶标。

成人乙型肝炎疫苗接种专家建议

为了实现2030年消除病毒性肝炎公共卫生危害的目标,发挥乙型肝炎疫苗接种降低乙型肝炎病毒新发感染的作用,中华预防医学会组织专家制定了《成人乙型肝炎疫苗接种专家建议》。本建议旨在科学地指导成人乙型肝炎疫苗接种,提升人群免疫屏障、降低乙型肝炎病毒感染率和乙型肝炎发病率。

IL2rg^(-/-)大鼠支持人RSV在体内的长期感染

目的为了克服已有人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)动物模型的局限性,如半受纳性和感染持续时间短,本文利用TALEN基因编辑技术建立了IL2rg基因敲除(IL2rg^(-/-))的大鼠模型。方法用hRSV滴鼻感染该动物模型,观察感染期(0~35 d)的临床表征、体重及体温变化;记录不同时间点(滴鼻感染后第4、11、20、35天)鼻腔、气管、肺等呼吸道脏器的病毒总拷贝数;在观察终点(滴鼻感染后第35天)对感染动物的靶器官进行病理分析;观察不同时间点(滴鼻感染后第4、20、35天)外周血T、B、NK、NKT细胞的变化及不同时间点多种细胞因子的变化。结果(1)通过鼻内接种hRSV后,纯合的IL2rg基因敲除大鼠的呼吸道内能保持较高的病毒载量,鼻腔中病毒的平均峰值滴度能快速升至1×10^(10 )copies/g,至第5周时,病毒依然能维持复制,病毒载量亦可达到1×10^(7)copies/g。(2)但其鼻、气管和肺组织,无明显病变。(3)感染hRSV的IL2rg^(-/-)大鼠外周血B细胞含量有上升。(4)IL-6和MCP-1两种细胞因子都在感染前期上升,在观察终点回落。结论本研究基于TALEN技术建立了IL2rg^(-/-)大鼠模型,并发现该模型能很好地支持hRSV高水平复制和并长期感染,为抗病毒药物筛选、抗hRSV抗体体内效力评价,提供了良好的动物模型。

大道至简——简约慢性乙型肝炎疾病进展自然史建议

慢性HBV感染是慢性乙型肝炎、肝硬化和原发性肝癌的主要病因,为社会造成巨大的卫生和经济负担。慢性乙型肝炎的疾病进展由病毒、宿主免疫及感染肝细胞的相互作用所共同驱动。慢性HBV感染自然史分期的意义在于理解疾病进程、评估疾病进展阶段,指导抗病毒治疗时机及方案选择。或许是因为对是否有真正的免疫耐受期存在争议,我国《慢性乙型肝炎防治指南(2022年版)》淡化了疾病状态与宿主免疫状态的对应关系,对慢性HBV感染自然史的更新描述采用了2017版欧洲肝病学会指南的4种疾病阶段:HBe Ag阳性慢性HBV感染、HBe Ag阳性慢性乙型肝炎、HBe Ag阴性慢性HBV感染和HBe Ag阴性慢性乙型肝炎。同时,新指南也未能完全解决“不确定期”的问题。随着临床上扩大抗病毒治疗策略渐成趋势,现有的自然史分期已难以适应临床需要,更新势在必行。本文从慢性HBV感染自然史的发现历程以及现有自然史分期存在的问题和建议等方面展开阐述,以期简化自然史分期,适应现有抗病毒治疗方案的临床实践,方便临床医生进行治疗决策。

AU富集元件结合因子1(AUF1)在肝细胞癌中的表达及预后评估价值

目的探究AU富集元件RNA结合蛋白1(AUF1)对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响及可能机制,阐明AUF1在肝细胞癌(HCC)进展中发挥的作用及分子机制。方法利用UALCAN和TCGA-HCC数据库分析AUF1在泛癌中的表达以及AUF1表达水平与HCC患者临床病理学特征和预后的相关性;利用CCK-8、细胞凋亡、Transwell小室迁移等实验在细胞水平探究AUF1的功能;利用RNA-seq分析AUF1敲减后肝癌细胞转录组变化。计量资料两组间比较采用t检验,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验评估生存率差异。结果相较于正常组织,AUF1的mRNA和蛋白水平在多种肿瘤组织中呈异常表达(P值均<0.05)。AUF1的mRNA水平与HCC恶性程度以及早期肝癌的不良预后呈正相关(P值均<0.05)。与对照组相比,过表达外源AUF1促进肝癌细胞的增殖、抑制肝癌细胞的凋亡及迁移。而AUF1敲减则抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡及迁移。RNA-seq分析发现,AUF1敲减主要影响Wnt/β-cateinin通路,并下调β-catenin蛋白水平。结论AUF1的异常表达与早期肝癌的预后有关,AUF1的促癌作用可能与其激活Wnt信号通路有关。

北京市孕妇人群AIDS认知程度与健康教育干预的研究

目的 了解北京市孕妇对艾滋病 (AIDS)的预防知识、态度 ,以便为在该人群中采取切实可行的AIDS干预措施提供依据。方法 将孕妇分为干预组和对照组 ,两组均进行干预前问卷调查 ,然后对干预组采取讲课、发放AIDS预防宣传资料和小组咨询等干预措施 ,时间为 6个月 ;对对照组不采取任何措施。 6个月后 ,对两组分别进行问卷调查 ,与干预前调查内容相同。结果 干预组孕妇于干预前调查时 ,对AIDS有关知识的正确认识率与对照组差异无显著的统计学意义。但采取措施 6个月后 ,干预组正确认识率由干预前的 65 5 %上升至 80 5 % ,两者差异有非常显著的统计学意义 (χ2 =31 678,P <0 .0 1 ) ,但对照组干预前后差异无显著的统计学意义 (χ2 =3 2 84,P =0 .0 63)。结论 孕妇在干预前 ,对AIDS已有一定程度的了解 ,但对其传播途径认识模糊。因此 ,有必要对该人群开展AIDS预防的健康教育。

慢性乙型肝炎常见PC/BCP突变的可能致病机制

乙型肝炎病毒(HBV)感染是慢性肝炎、肝硬化及原发性肝癌的主要病因。慢性感染过程中,导致乙型肝炎e抗原(HBeAg)表达下降/消失的HBV突变株逐渐转换为优势株,其中以基本核心启动子区(BCP)和前核心区(PC)突变最为常见,突变病毒累积造成具有不良预后的HBeAg阴性患者占比逐年上升。近几年的研究表明,突变病毒不仅促进HBV复制,还能诱导病毒蛋白在肝细胞内堆积,堆积的病毒蛋白将诱发肝细胞内质网应激致肝细胞病变。本文对突变诱导的肝细胞病变机制进行探讨,旨在为及时调整治疗策略提供依据。

国际病毒分类委员会及其在线报告现状及发展

面对日益增长的新病毒种类和数量,及其复杂的内在关系,现有的病毒分类方法已凸显出其局限性。2019年,病毒分类和命名的权威机构国际病毒分类委员会(the International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV),基于病毒的系统进化关系提出了一种全新的、包含15个分类等级或阶元的病毒分类系统,并已经在ICTV的官方网站https://ictv.global/上线发布,公众可以在线免费查找动态的病毒分类信息。新的病毒分类系统能更好地揭示病毒错综复杂的内在关系以及群体进化机制,使我们能以更客观及系统的方法对病毒进行分类和命名。本文就ICTV网站有关病毒分类的主要概况,特别是最新的病毒分类和ICTV报告进展作一综述。

无创评分预测肝脂肪变性的优势与不足

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)全球负担加重提示了全民筛查和早期诊断的重要性。相比于影像学检查和肝组织活检,无创的肝脂肪变性评分为肝脂肪变性的预测提供了更加安全、简便和经济的方法。肝脂肪变性评分有助于减少低风险人群不必要的转诊,提高医疗保健的效率,且更适合NAFLD的流行病学研究。本文概述了NAFLD的检查手段和诊断标准,常见的肝脂肪变性评分,以及肝脂肪变性评分的优势、局限性及注意事项。

两种培养基对铜绿假单胞菌和大肠埃希菌生物被膜厚度的影响

目的探讨营养成分不同的两种培养基对临床分离的铜绿假单胞菌和大肠埃希菌形成生物被膜形态的影响。方法使用电击转化将pSMC21转入临床分离的3株铜绿假单胞菌和3株大肠埃希菌体内,构建表达绿色荧光蛋白的菌株。在Luria-Bertani(LB)和M9葡萄糖基础培养基中以盖玻片为支持表面,进行细菌生物被膜的连续培养。经过12天的培养周期,使用共聚焦激光扫描显微镜检测盖玻片上生物被膜的厚度。使用方差分析检验每个样本5个测量值的重复性,并用配对T检验来分析同一株细菌在两种培养基中生物被膜的厚度变化。结果pSMC21可以在6株临床分离株中稳定表达绿色荧光蛋白;每个样本5个测量值重复性好,其差异无统计学意义(P=0.46);大肠埃希菌在LB和M9培养基中形成生物被膜平均厚度的差异无统计学意义(t=-0.42,P>0.7),而铜绿假单胞菌在LB培养基中形成的生物被膜更厚,其差异有统计学意义(t=3.46,P<0.02)。结论铜绿假单胞菌所形成生物被膜的平均厚度因培养基成分的不同而有显著差异,而大肠埃希菌所形成生物被膜的平均厚度则不受培养基成分不同的影响。

北京某综合三甲医院对COVID-19疑似和非疑似患者进行SARS-CoV-2核酸筛查结果分析

目的以北京综合三甲医院为例,对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疑似患者和非疑似患者的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸筛查结果进行分析,为COVID-19的实验室诊断提供实验依据。方法SARS-CoV-2核酸检测的咽拭子标本来自2595例患者,COVID-19疑似患者81例,非疑似患者2514例。咽拭子标本采用QIAamp Viral RNA Mini Kit试剂提取RNA,分别采用国家药品监督管理局批准的3种(A、B、C)不同灵敏度试剂盒进行实时荧光PCR平行检测。结果81例COVID-19疑似患者标本中SARS-CoV-2核酸阳性检出率为6.17%(5/81),2514例非疑似患者标本中均没有检出SARS-CoV-2核酸。确诊的5例COVID-19患者,A试剂检出率为80.00%,B、C试剂检出率均为100.00%。结论在COVID-19低流行区(北京)综合三甲医院筛查的COVID-19疑似患者中SARS-CoV-2核酸阳性检出率较低。无症状的非疑似患者中SARS-CoV-2感染的概率极低,为减少核酸筛查的工作量,可采用混合标本检测。在实验室诊断中,对于低病毒载量的患者,可采用两种试剂盒平行检测,以提高实验室诊断的准确性。